Схема определения колицингенотипов шигелл Зонне

Рисунок 9.

Колицинотипирование, т.е. определение спектра чувствительности культур Зонне к колицинам, определяют следующим образом.

Свежие эталонные колициногенные штаммы Фредерика, выросшие на среде Ресселя, сеют уколом петли в соответствующие квадраты чашки с 1,5%-ным МПА, подкрашенным генцианвиолетом, и инкубируют при 37º в течение 24 часов. Выросшие колонии бактерии убивают парами хлороформа, и поверхность агара заливают 2,5 мл расплавленного 0,7%-ного МПА, содержащего 2 капли 6-часовой испытуемой бульонной культуры шигелл Зонне. После 20-часового роста при 37° производят учет результатов опыта. При наличии чувствительности к колицинам испытуемого штамма бактерии Зонне вокруг колоний колициногенных культур образуются зоны задержки роста подобно зонам задержки роста вокруг дисков с антибиотиками. Культура считается чувствительной к колицину, если ширина задержки роста бактерий более 2 мм. Результаты регистрируют плюсами: + - зона задержки 2 мм; ++ - зона задержки 2-5 мм, +++ - зона задержки 5-10 мм, ++++ - зона задержки более 10 мм.

В.

Вирулентность дизентерийных бактерий обусловлена наличием у них факторов адгезии и колонизации, инвазии. (Эти факторы патогенности контролируются главным образом плазмидами). Кроме того, шигеллы способны вырабатывать 2 типа экзотоксинов: цитотонины (термолабильный и термостабильный) и цитотоксины (способностью вырабатывать цитотоксины шигеллу наделяют конвертирующие умеренные фаги).

Патогенность шигелл определяется с помощью кератоконъюнктивальной пробы на морской свинке.

Типовые и индикаторные культуры набора Абботта и Шеннона для колициногенотипирования шигелл Зонне.

Схема колициногенотипирования шигелл Зонне по Абботту и Шеннону.

Обозначения: + наличие зоны торможения индикаторных штаммов,

- отсутствие зоны торможения,

V – вариабельные результаты.

Занятие 8.

Дата________

Тема: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ДИАГНОЗ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ

(продолжение).

План занятия.

А. Микробиологический диагноз пищевых токсикоинфекций (окончание).

1. Учет результатов посева на среды "пестрого ряда" и микроскопия выделенной культуры.

2. Разбор серологической классификации сальмонелл.

3. Агглютинация выделенной культуры на стекле с адсорбированными монорецепторными 0- и Н-сыворотками.

Б. Микробиологический диагноз дизентерии (продолжение).

I. Изучение результатов посева, сделанного на предыдущем занятии. Посев подозрительной колонии на МПА, среду Ресселя и среды "пестрого ряда".

В. Микробиологический диагноз эшерихиозов.

1. Посев испражнений больных эшерихиозом детей на среды Эндо и Левина.

Методические указания.

A. Микробиологический диагноз пищевых токсикоинфекций (окончание).

§ 1. Зарегистрировать результаты посева выделенной культуры на среда "пестрого ряда", промикроскопировать посевы на МПА и зарисовать. На основании изучения биохимизма и морфологии выделенной культуры решить вопрос о ее принадлежности к роду сальмонелл и записать в тетради.

§ 2. Разобрать особенности антигенного строения и принципы современной серологической классификации сальмонелл (демонстрация схемы).

§ 3. Поставить реакцию агглютинации выделенной культуры на стекле с адсорбированными монорецепторными 0- и Н-сыворотками.

Результаты реакции агглютинации зарисовать и записать в тетради.

Б. Микробиологический диагноз дизентерии (продолжение).

§ 1. Внимательно рассмотрев посевы на дифференциально-диагностических средах Левина и Плоскирева, найти колонии, подозрительные на дизентерийные (бесцветные, прозрачные). Часть колонии промикроскопировать с окраской по Граму и зарисовать, а оставшуюся часть засеять на скошенный МПА, среду Ресселя, среду Пешкова для определения подвижности и среды "пестрого ряда".

B. Микробиологический диагноз эшерихиозов.

§1. Произвести посев испражнений ребенка, больного эшерихиозом, на чашки с дифференциально-диагностическими средами Эндо и Левина.