Диагностические мероприятия при инфекционных заболеваниях: лабораторные исследования, бактериологическая, вирусологическая диагностика, серологическая диагностика

Тема 3.

Непременным условием успешной борьбы с инфекционны­ми болезнями является их ранняя диагностика. Распознавание инфекционных болезней базируется на совокупности сведений, полученных при сборе анамнестических данных, выявлении у больных характерных признаков (симптомов и синдромов) ин­фекционного заболевания и правильной оценке полученных ла­бораторных данных.

Анамнез. В распознавании инфекционных болезней важное значение имеют расспрос больного и сбор анамнеза. Необходимо как можно подробнее выяснить историю развития заболевания: когда больной почувствовал первые признаки заболевания, остро или постепенно оно развивалось, был ли продромальный период, динамику симптомов болезни во все дни, предшествующие обра­щению за медицинской помощью. Необходимо уточнить, прини­мал больной или нет какие-либо медикаменты и если принимал, то как они повлияли на течение болезни. Не следует думать, что больной сможет сам подробно рассказать историю своего заболе­вания. Поэтому необходим активный и подробный расспрос паци­ента.

Особое внимание следует уделять эпидемиологическому анам­незу. Цель сбора эпидемиологических данных — выяснение по­тенциального или возможного источника инфекции, а также уста­новление механизма и пути заражения. Эти данные следует соби­рать с учетом предполагаемого инкубационного периода. Необходимо обращать внимание на поездки и пребывание паци­ента в зонах, где могло произойти инфицирование (полевые усло­вия, эндемичные регионы и т.д.), контакты с больными людьми и животными и т. д. Нельзя всех больных с инфекционными заболе­ваниями расспрашивать по единой и универсальной схеме. Для каждого инфекционного заболевания характерны свои эпидемио­логические особенности. Правильно собранный эпидемиологиче­ский анамнез позволяет предположить инфекционный генез забо­левания.

Объективное обследование больного. Данные объективного осмотра позволяют выявить симптомы и синдромы, характерные для той или иной инфекционной болезни. Изначально следует об­ращать внимание на положение тела больного, поскольку при не­которых болезнях больной может занимать вынужденное положе­ние (например, запрокинутая голова при менингитах и т.д.). Осмотр больного производят поэтапно, оценивая каждую систему в отдельности (кожные покровы и видимые слизистые оболочки, лимфатические узлы, костно-суставную систему, органы крово­обращения, органы дыхания, органы пищеварения, мочеполовую систему, нервно-психическую сферу и т.д.). Результатом объек­тивного обследования больного должно стать выявление симпто­мов болезни, имеющих диагностическое значение. Особое внима­ние следует уделять патогномоничным симптомам, наличие кото­рых достаточно точно позволяет установить тот или иной диагноз (пятна Вельского—Филатова—Коплика при кори, спазм жева­тельных мышц (тризм) при столбняке, характерный карбункул при сибирской язве и т. д.). К сожалению, патогномоничные симптомы проявляются только при некоторых инфекционных болезнях, поэ­тому большее значение имеют так называемые опорные симпто­мы. Под ними подразумевают симптомы, характерные для опреде­ленных инфекционных заболеваний, но которые могут также встречаться и при других инфекциях. К числу таких симптомов следует отнести характер стула у больных с шигеллезом — скуд­ный с примесью слизи и крови, менингеальные симптомы при менингококковом менингите и т. д.

Выявление при осмотре зева гиперемии миндалин, фолликулов, налетов, участков некроза помогает при диагностике таких заболе­ваний, как инфекционный мононуклеоз и скарлатина. Налеты, рас­пространяющиеся за пределы миндалин, характерны для дифтерии.

Вовлеченность в патологический процесс опорно-двигательного аппарата отмечается при таких инфекционных заболеваниях, как бруцеллез, иерсиниоз, полиомиелит и др.

Вид языка больного также может помочь при диагностике не­которых инфекционных заболеваний. Например, при скарлатине с 3—4-го дня болезни язык очищается от налета и становится ярко-красным с выступающими сосочками, из-за чего его называ­ют «малиновый язык», а при брюшном тифе язык утолщен, обло­жен грязно-серым налетом с отпечатками зубов на боковых по­верхностях, которые свободны от налета.

Часто при инфекционных болезнях у больных выявляются дис­пепсические расстройства в виде тошноты, рвоты, жидкого стула.

В этих случаях необходимо обращать внимание на состояние жи­вота (вздутие, урчание, болезненность при пальпации), чувстви­тельность и болезненность сигмовидной кишки. При наличии рво­ты и поноса необходимо производить их осмотр с регистрацией консистенции, объема, цвета, запаха, наличия примеси слизи и крови. Для некоторых инфекционных болезней типично увеличе­ние печени и селезенки, поэтому важно не только констатировать их увеличение, но и определить размеры.

Цвет мочи, ее количество имеют существенное значение при диагностике таких болезней, как вирусные гепатиты, геморраги­ческая лихорадка с почечным синдромом, лептоспироз.

Для менингитов типично появление менингеальных симптомов (ригидности мышц затылка, симптомов Кернига, Брудзинского и др.), выявление которых у больных служит показанием для про­ведения люмбальной пункции. Нарушение зрения в виде «тума­на», «сетки» перед глазами, двоение в глазах могут быть одним из ранних признаков ботулизма.

При стертых и атипичных формах болезни выявляемых симп­томов бывает недостаточно для своевременного распознавания заболевания, поэтому в таких случаях особое значение приобрета­ют методы лабораторного и инструментального исследований.

Лабораторные и инструментальные методы исследования

Данные объективного осмотра, а также эпидемиологические данные позволяют с большей или меньшей достоверностью пред­положить наличие у больного инфекционной болезни. Подтверж­дение же диагноза инфекционного заболевания осуществляется с помощью специальных лабораторных методов исследования, це­лью которых является получение прямых или косвенных данных, подтверждающих наличие или пребывание микроба-возбудителя в организме больного. К методам прямого обнаружения микроба- возбудителя в организме относятся бактериоскопические и бакте­риологические, а к косвенным методам — серологические, имму­нологические и аллергологические. Выбор методов исследования производится в зависимости от характера предполагаемого у боль­ного заболевания, свойств микроба-возбудителя, места его лока­лизации и максимальной концентрации, путей выведения из орга­низма и стадии болезни. Следует помнить, что результативность лабораторных методов исследований в значительной степени за­висит от правильности забора материала на исследование, его хранения и доставки в лабораторию. Отрицательный результат ис­следования может быть причиной несоблюдения правил забора и пересылки исследуемого материала, поэтому получение отрица­тельного результата исследования не может служить поводом ка­тегорического исключения предполагаемого диагноза.

Бактериоскопический (микроскопический) метод использует­ся для обнаружения под микроскопом возбудителей инфекцион­ных болезней в патологическом материале (крови, слизи, ликворе, пунктате бубона, фекалиях т.д.), взятом от больного. Из получен­ного материала делают мазок (мазок-отпечаток) с последующим окрашиванием различными красителями. Преимущество бактериоскопического метода заключается в его быстроте. Результат исследования может быть получен уже через несколько часов. Чувствительность бактериоскопического метода может быть су­щественно повышена при использовании специфических сыворо­ток, содержащих антитела к возбудителю, помеченных специаль­ными красками — флюорохромами. Такой метод исследования на­зывается иммунофлюоресцентным и относится к методам ранней диагностики многих инфекционных болезней. К бактериоскопическим методам относится также исследование «толстой капли».

Техника забора материала и приготовления мазков со слизи­стых оболочек ротовой полости, зева, небных миндалин и носа. Мазок из зева следует брать натощак или не ранее чем через 2 ч после полоскания горла, приема пищи, питья или других проце­дур. Для забора исследуемого материала используют предвари­тельно простерилизованные в лаборатории сухие или слегка увлажненные физиологическим раствором ватные или марлевые тампоны, намотанные на деревянную палочку или проволоку из нержавеющего материала и помещенные в пробирку. Придавли­вая шпателем корень языка книзу и кпереди, тампон осторожно вводят в ротовую полость (не касаясь языка, зубов и слизистых оболочек рта) и собирают интересующий патологический матери­ал (слизь, гной и т.д.). Налет или слизь лучше снимать на границе пораженного участка, где концентрация микробов всегда больше, чем в других местах. Полученный материал наносится на предмет­ное стекло, обводится стеклографом, маркируется, высушивается и направляется в лабораторию на исследование.

Перед взятием на исследование слизи из носа больному необ­ходимо предварительно очистить носовые ходы либо путем вы­смаркивания, либо специальными сухими ватными фитилями. Следует осторожно, не травмируя слизистую, удалить корочки.

Появление на слизистой носа крови может отрицательно сказать­ся на результативности проводимого исследования. Вводимый в каждую ноздрю тампон должен плотно прикасаться всеми сторо­нами к стенкам носовых ходов. Полученный таким образом мате­риал сразу же засевается на соответствующие плотные питатель­ные среды и наносится на предметное стекло, затем обводится стеклографом, подсушивается, маркируется и направляется в ла­бораторию для микроскопического исследования.

Для проведения риноцитологического исследования взятие ма­териала производится аналогичным образом с той лишь разницей, что полученные на предметном стекле отпечатки обрабатываются в лаборатории специальными красками и при микроскопии в них определяются клеточный состав и характер внутриклеточных включений.

Для приготовления мазков-отпечатков слизистой носа исполь­зуют специальные пластинки из стекла или плексигласа длиной 70—80 мм, шириной 5—6 мм и толщиной 2,0—2,5 мм с закру­гленными и хорошо отшлифованными краями. Предварительно следует хорошо очистить носовые ходы от слизи и корочек. Пла­стинки вводятся в носовой ход на глубину не более 2—3 см и слег­ка прижимаются к носовой перегородке. Выводить пластинки из носового хода нужно осторожно, чтобы не смазать отпечаток. Гра­ницы отпечатка обводятся стеклографом, подсушиваются, марки­руются и направляются в лабораторию для дальнейшего исследо­вания.

Смывы из носоглотки используют главным образом для выде­ления вирусов при гриппе и других острых вирусных инфекциях. Смывы необходимо производить в первые дни болезни, когда кон­центрация микроба-возбудителя в слизи максимальна и он интен­сивно выделяется в окружающую среду. Для забора смыва на ис­следование больной должен трижды прополоскать горло стериль­ным физиологическим раствором, используя каждый раз по 10—15 мл жидкости. Смывы собирают в стерильную банку. После полоскания горла заднюю стенку глотки больного протирают сте­рильным ватным тампоном, который также помещают в банку со смывами. Взятый материал плотно закрывают крышкой и направ­ляют в лабораторию для последующего проведения вирусологиче­ских, иммунофлюоресцентных и прочих исследований.

Техника приготовления мазка крови и препарата «толстая ка­пля». Эти препараты необходимы для диагностики малярии и воз­вратного тифа. Препарат «толстая капля» является основным ме­тодом диагностики малярии, поскольку позволяет за один и тот же интервал времени исследовать в 20—40 раз больше крови, чем в обычном мазке.

Кровь на исследование может забираться в любой период бо­лезни, но лучше это делать во время лихорадки (сразу после озно­ба), поскольку в этот период в крови находится наибольшее коли­чество паразитов. Забор крови, как правило, производят из чет­вертого пальца левой руки (можно из мочки уха), предварительно обрабатывая дезинфицирующим раствором (70%-м спиртом). Обычные мазки крови делают по методике, общепринятой для ге­матологических исследований. Первую каплю крови, выступив­шей после прокола кожи, стирают сухой ватой и только вторую каплю наносят (не касаясь пальцем стекла!) на хорошо обезжи­ренное предметное стекло, а затем с помощью другого стекла со шлифованным краем делают мазок. Правильно сделанный мазок должен быть ровным и тонким. После подсушивания мазок мар­кируют простым карандашом (указывается фамилия больного или номер анализа по списку, а также ставится дата).

Препарат «толстая капля» делается аналогичным образом, од­нако при этом капли крови на предметном стекле не размазывают по всей длине стекла, а кончиком иглы или углом другого предмет­ного стекла круговыми движениями доводят до 10—15 мм в диа­метре. Толщина полученной капли должна быть такой, чтобы сквозь нее был виден газетный шрифт. Чрезмерно толстые капли делать нежелательно, поскольку после высыхания они растрески­ваются и могут отставать от стекла. Обычно на одном предметном стекле делают 2—3 «толстые капли». Иногда «толстую каплю» на­носят на влажный мазок крови. Такой препарат является более удобным, поскольку в мазке хорошо сохраняется часть поражен­ных эритроцитов, что важно для уточнения вида паразита. Полу­ченный таким образом препарат высушивают при комнатной тем­пературе не менее 2—3 ч и окрашивают по методу Романовского — Гимзы в течение 30—45 мин. Окрашенный препарат осторожно ополаскивают водопроводной водой, избегая сильной струи, кото­рая может смыть каплю, и просушивают в вертикальном положе­нии. Фиксацию мазка производят в течение 10 мин, помещая его в 96%-й этиловый спирт. На обратной стороне стекла стеклографом указывается фамилия больного или его регистрационный номер. Обнаружение плазмодиев в препарате служит абсолютным под­тверждением диагноза малярии.

Бактериологический метод заключается в выделении чистой культуры микроба-возбудителя путем посева материала, взятого от больного, на питательные среды с последующим изучением свойств выделенных микробов. Материалами для исследования могут служить кровь, спинномозговая жидкость, рвотные массы, кал, моча и т.д. Результативность бактериологического исследова­ния зависит от многих условий. Материал от больного следует за­бирать до начала этиотропного лечения (назначения антибиоти­ков и других антибактериальных препаратов). Общим недостат­ком бактериологического метода является длительность исследования. Это связано с тем, что микробы растут медленно, поэтому окончательный результат может быть получен только че­рез 2— 4 дня, а иногда и позже. Для выделения каждого микроба требуется определенная питательная среда. В тех случаях, когда диагноз больного неясен, посевы производят одновременно на не­скольких питательных средах. Как правило, бактериологическое исследование предусматривает одновременное определение чув­ствительности выделенного микроба к основным группам анти­биотиков и химиопрепаратов, что необходимо для выбора опти­мальной этиотропной терапии.

При проведении бактериологического исследования оптималь­ным условием является максимально быстрая доставка материала в лабораторию. Посев крови, например, осуществляют только не­посредственно у постели больного. В тех случаях, когда быстрая доставка (в течение 2—3 ч) материала в лабораторию невозмож­на, используют консервирующие смеси, которые имеют различ­ный состав в зависимости от целей бактериологического исследо­вания. Взятый на исследование материал без консерванта при комнатной температуре хранить нельзя, поскольку в нем проис­ходит размножение сопутствующей (сапрофитной) микрофлоры и возникают аутолитические процессы, которые губительно воздей­ствуют на патогенную флору. При отсутствии в отделении консер­вирующих смесей материал для бактериологических исследова­ний до посева нужно хранить в холодильнике при температуре +4 "С или на льду.

Правила взятия материала на бактериологическое исследова­ние. Для сбора материала должна использоваться только стериль­ная посуда, не содержащая даже следов дезинфицирующих средств. Забор материала должен происходить в стерильных усло­виях, при этом необходимо исключить загрязнение взятого мате­риала посторонней микрофлорой.

Забор крови. Кровь для посева следует брать с соблюдени­ем всех правил асептики с целью исключения попадания микро­организмов из внешней среды. Категорически нельзя производить забор крови на бактериологическое исследование из установлен­ного в вену сосудистого катетера. Посев крови целесообразно про­водить при наличии лихорадки. Стерильные шприц и иглы, ис­пользуемые для взятия крови, нельзя проверять на проходимость воздухом. Кровь забирают из локтевой вены в стерильный шприц в количестве 10 — 20 мл (не менее 10 мл у взрослых и 5 мл у детей) либо у постели больного, либо в процедурном кабинете. Забор и посев крови осуществляются, как правило, двумя медицинскими работниками. Один человек обрабатывает кожу больного над пун­ктируемой веной, пунктирует ее и производит взятие крови, а дру­гой открывает над пламенем спиртовки пробки флаконов, под­ставляет флаконы со средой под струю крови из шприца, затем повторно обжигает горлышко и пробку флакона и закрывает их. Место укола предварительно дезинфицируют 70%-м спиртом, за­тем 5%-й настойкой йода и снова спиртом. Извлеченную из вены иглу снимают не руками, а прокаленным пинцетом. Флаконы должны содержать достаточное количество жидкой питательной среды для того, чтобы при разведении крови (1 : 10—1 :60) прео­долеть ее естественные бактерицидные свойства. Флакон с пита­тельной средой и кровью необходимо в тот же день доставить в лабораторию.

Забор кала. Для бактериологического исследования ис­пражнения собирают в судно или горшок, которые необходимо предварительно тщательно промыть кипятком, поскольку в них не должно содержаться даже остатков дезинфицирующих средств, губительно действующих на патогенные микробы. Материал за­бирается сразу после дефекации простерилизованным шпателем или палочкой (не более 10 г) и переносится в стерильную пробир­ку или специальный патрон с плотно закрывающейся пробкой. Для исследования нужно брать слизь, гной, фибриновые пленки, а не материал с примесью крови, присутствие которой может ока­зывать бактерицидное действие. Взятый на исследование матери­ал следует как можно быстрее доставить в лабораторию и засеять на питательную среду, поскольку срок хранения испражнений в стерильной посуде ограничен двумя часами и по истечении этого срока материал уже не пригоден для дальнейшего исследования. Взятие испражнений на исследование может осуществляться и непосредственно из прямой кишки с помощью металлической петли.

Забор спинномозговой жидкости (ликвора). Для бактериологического анализа спинномозговую жидкость обычно получают путем либо люмбальной пункции, либо пунк­ции боковых желудочков мозга. Пункция должна проводиться только врачом. Ликвор для бактериологического исследования собирают в стерильную пробирку (1—2 мл) при проведении люмбальной пункции с соблюдением всех правил асептики и не­медленно доставляют в лабораторию. Учитывая высокую чув­ствительность менингококков и некоторых других бактерий к температурному режиму, следует избегать воздействия низкой температуры.

Забор желчи. Желчь для исследования (в том числе бакте­риологического) собирают при зондировании в процедурном ка­бинете отдельно по порциям А, В и С в три стерильные пробирки с соблюдением всех правила асептики. Полученные порции желчи должны быть доставлены в лабораторию не позднее, чем через 1 —2 ч от момента взятия.

Забор мочи. На бактериологическое исследование берут среднюю порцию свободно выпущенной мочи в количестве 3 — 5 мл, собранную в стерильную посуду после тщательного туа­лета наружных половых органов. Катетеризация мочевого пузыря обычно не применяется, поскольку велика вероятность инфици­рования мочевых путей. Она производится только в исключитель­ных случаях, когда требуется уточнение локализации воспалитель­ного процесса (в мочевом пузыре или в почках). Мочевой пузырь при этом опорожняют катетером и промывают раствором анти­биотика, после чего с интервалом 10 мин берут пробы мочи для исследования. При инфекционном процессе в почках во всех пор­циях мочи обнаруживаются микроорганизмы, а при инфекции мочевого пузыря моча остается стерильной.

Как и при других бактериологических исследованиях, матери­ал для исследования следует брать до начала антибактериальной терапии или в интервалах между курсами лечения.

Бактерии, содержащиеся в моче, достаточно быстро размножа­ются при комнатной температуре. В связи с этим взятая на иссле­дование моча должна быть максимально быстро доставлена в ла­бораторию (не позднее 1—2 ч при хранении при комнатной тем­пературе) . Допускается хранение собранной мочи в течение суток в условиях холодильника. Нарушение режима хранения и достав­ки в лабораторию собранной мочи может повлиять на результаты при определении степени бактериурии.

Забор мокроты. Мокроту на исследование собирают в сте­рильную банку утром во время приступа кашля. Перед процеду­рой больной должен провести туалет ротовой полости (почистить зубы, прополоскать рот кипяченой водой) с целью механического удаления остатков пищи, слущенного эпителия и микрофлоры.

Забор материала из глаз. Материал для исследования забирают с пораженных мест в разгар воспалительного процесса с соблюдением правил асептики. Не менее чем за 5—6 ч до ис­следования должны быть отменены все медикаменты и процеду­ры. Взятие материала производит врач-окулист в следующем по­рядке.

1. Конъюнктива. Отделяемое берут с конъюнктивы платиновой петлей, предварительно прожженной в пламени спиртовки и осту­женной, или стерильной стеклянной палочкой. При наличии обильного гнойного отделяемого используют стерильные ватные тампоны, которыми берут гной с внутренней поверхности нижне­го века движением к внутреннему углу глазной щели. При взятии материала следует придерживать веки руками, чтобы ресницы не касались тампона.

2. Край век. Кусочки гноя удаляют пинцетом. Материал берут из язвочки у основания ресниц.

3. Роговица. После обезболивания материал на исследование берут платиновой петлей или другим подходящим инструментом. Если больной применяет контактные линзы, необходимо исследо­вать их внутреннюю поверхность. В этом случае взятый влажным тампоном материал наносят на предметное стекло, обезжиренное и прокаленное над пламенем горелки. Затем мазки высушивают, стекло маркируют, на его обратной стороне обводят границы мазка.

Забор материала из ушей. При поражении наружного уха сначала проводят обработку кожи 70%-м спиртом с последу­ющим промыванием физиологическим раствором, после чего от­деляемое из очага собирают на стерильный ватный тампон.

При поражениях среднего и внутреннего уха исследуются пунктаты и материал, полученный во время оперативного вмеша­тельства, собранный в стерильную посуду.

Серологические методы используются для обнаружения в сы­воротке крови специфических антител, которые вырабатываются в организме человека в ответ на внедрение возбудителей данной инфекционной болезни. По своей диагностической ценности се­рологические методы приближаются к бактериологическим, по­скольку позволяют достаточно точно устанавливать этиологию за­болевания. Сущность серологического исследования состоит в определении нарастания титра специфических антител. Посколь­ку иммунный ответ при инфекционных заболеваниях начинает вырабатываться на 5 — 7 день от начала заболевания, забор крови должен производиться не ранее указанных сроков. Максимальное нарастание титра антител регистрируется только к концу разгара болезни и в стадии реконвалесценции. В силу этого серологиче­ские реакции у инфекционных больных становятся положитель­ными, как правило, только в конце 1-й или начале 2-й недели забо­левания. В дальнейшем их титр продолжает нарастать, что являет­ся важным диагностическом признаком. Повторные серологические исследования при бактериальных инфекциях проводятся, как пра­вило, не раньше, чем через 5—7 дней, а при вирусных инфекциях берутся «парные сыворотки» с интервалом в 10—12 дней. Для ди­агностики большое значение имеет нарастание титра антител при повторном исследовании в 4 и более раз.

Техника взятия материала на серологическое исследование. Для постановки серологических реакций у больного берут из вены 3 — 5 мл крови в сухие и чистые пробирки. Для взятия крови обыч­но используются иглы с более широким просветом, через которые кровь свободно вытекает из вены, что не повреждает эритроциты. Наличие гемолиза может отрицательно влиять на результаты ис­следования. Кровь из локтевой вены собирается непосредственно в пробирку. Для того чтобы получился более плотный сгусток кро­ви и больший выход сыворотки, пробирку после взятия крови сна­чала помещают на 30 мин в термостат при температуре 37 "С, а за­тем переносят в холодильник и оставляют на 30 — 60 мин при тем­пературе 4 °С. После отстаивания пробирку центрифугируют, сыворотку крови с помощью пипетки переносят в другую сухую пробирку и хранят в холодильнике при температуре +4 "С до по­становки реакции.

Наиболее широкое распространение получили такие серологи­ческие реакции, как реакция агглютинации (РА), реакция непря­мой гемагглютинации (РНГА), реакция связывания комплемента (РСК), реакция иммунофлюоресценции (РИФ), иммунофермент- ный анализ (ИФА).

В направлении на исследование необходимо точно указывать, на какую реакцию направляется анализ и какой необходимо ис­пользовать диагностикум. Например: «кровь на реакцию связыва­ния комплемента с антигеном Провацека» (на сыпной тиф).

Наиболее широкое распространение получили такие серологические реакции, как реакция агглютинации (РА), реакция непрямой гемагглютинации (РНГА), реакция связывания комлемента (РСК), реакция иммуннофлюорисценлиз (ИФА).ции (РИФ), иммунноферментный анализ.

В последние годы в медицинскую практику стали широко внедряться принципиально новые молекулярно-биологические методы диагностики, основанные на обнаружении генетического материала микроба-возбудителя в крови больного, например, метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).

В диагностике ряда инфекционных болезней (таких, как бру­целлез, туляремия, орнитоз, токсоплазмоз, сап и др.) используются также аллергические пробы. Принцип их действия основан на том, что в организме человека в процессе развития заболевания фор­мируется сенсибилизация — повышенная чувствительность к специфическим антигенам микроба-возбудителя, в результате чего при введении этим больным соответствующих антигенов (аллер­генов) на месте их введения возникают покраснение и инфиль­трат. Наиболее часто используется внутрикожное введение аллер­генов, но они могут также вводиться накожно и в конъюнктивальный мешок. Название используемых препаратов-аллергенов, как Правило, соответствует названию болезни. Так, для диагностики бруцеллеза применяют бруцеллин, туляремии — тулярин, сибир­ской язвы (антракса) — антраксин, туберкулеза — туберкулин.

Внутрикожную пробу ставят на ладонной поверхности пред­плечья. После обработки кожи спиртом вводят тонкой иглой 0,1 мл аллергена строго внутрикожно, чтобы получилась «лимонная» ко­рочка. В связи с использованием малых объемов препарата для постановки кожно-аллергических проб следует применять только туберкулиновые шприцы. Одновременно для контроля на другом предплечье также внутрикожно вводится 0,1 мл растворителя ал­лергена (физиологический раствор). При наличии у больного со­ответствующего заболевания на месте введения препарата разви­вается местная аллергическая реакция, проявляющаяся в виде ги­перемии, инфильтрата и отека. При резко положительной реакции, что бывает крайне редко, у больных могут наблюдаться некроз кожи, лимфангоит и увеличение ближайших (регионарных) лим­фатических узлов. Кожно-аллергические пробы становятся поло­жительными уже с 8— 10-го дня болезни и сохраняются в течение нескольких месяцев и даже лет. Учет результата пробы обычно проводят через 24 и 48 ч путем измерения размера инфильтрации и отека кожи на месте введения аллергена, а не гиперемии. При резко выраженной положительной пробе появляется инфильтрат кожи диаметром более 6 см, повышается температура, развивает­ся регионарный лимфаденит. При положительной пробе диаметр инфильтрата составляет 3—6 см, а признаки общей реакции пол­ностью отсутствуют. При слабо выраженной положительной реак­ции диаметр инфильтрата составляет 1 — 3 см, а при сомнительной реакции — менее 1 см. Появление только гиперемии или гипере­мии и инфильтрации, которые исчезают в течение 24 ч, оценива­ется как отрицательная или сомнительная реакция.

Постановка внутрикожных аллергических проб является толь­ко вспомогательным методом диагностики инфекционных заболе­ваний, поскольку положительный результат пробы свидетельству­ет лишь о сенсибилизации организма данным аллергеном, а не об острой стадии заболевания. Следует также помнить, что положи­тельные кожно-аллергические пробы могут быть как у лиц, пере­несших в анамнезе соответствующие инфекционные болезни, так и у привитых.

При использовании биологического метода диагностики ин­фекционных болезней проводится искусственное заражение ла­бораторных животных материалом, взятым от больных людей (кровь, кал, моча, мокрота и др.), у которых подозревается инфек­ционная болезнь. В случае развития у зараженных животных ха­рактерных патологоанатомических изменений внутренних орга­нов ставится диагноз соответствующего заболевания. Биологиче­ский метод используется для диагностики ботулизма, сапа, чумы и некоторых других зоонозов.

Для лабораторной и дифференциальной диагностики в клини­ке инфекционных болезней используются инструментальные ме­тоды, к которым относятся ректороманоскопия, колоноскопия, ла­пароскопия, ультразвуковое исследование и другие методы.

Вирусологический метод включает культивирование вирусов, их индикацию и идентификацию. Материалами для вирусологического исследования могут быть кровь, различные секреты и экскреты, биоптаты органов и тканей человека. Исследование крови часто проводят в целях диагностики арбовирусных заболеваний. В слюне могут быть обнаружены вирусы бешенства, эпидемического паротита, простого герпеса. Носоглоточные смывы служат для выделения возбудителя гриппа, кори, риновирусов, респираторно-синцитиального вируса, аденовирусов. В смывах с конъюнктивы обнаруживают аденовирусы. Из фекалий выделяют различные энтеровирусы, адено-, рео- и ротавирусы.

Для выделения вирусов используют культуры клеток, куриные эмбрионы, иногда лабораторных животных.

Источник получения клеток — ткани, извлечённые у человека при операции, органы эмбрионов, животных и птиц. Используют нормальные или злокачественно перерождённые ткани: эпителиальные, фибробластического типа и смешанные. Вирусы человека лучше размножаются в культурах клеток человека или почечных клеток обезьян.

Большинство патогенных вирусов отличает наличие тканевой и типовой специфичности. Например, полиовирус репродуцируется только в клетках приматов, что определяет необходимость подбора соответствующей культуры. Для выделения неизвестного возбудителя целесообразно одномоментное заражение 3-4 культур клеток, так как одна из них может оказаться чувствительной.