Тема 1. ТЕХНИКА ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

 

 

 

1. Устройство светового микроскопа

2. Этапы приготовления гистологического препарата

а) Приготовление срезов

б) В случае приготовления мазков, отпечатков и тотальных, или плё-

ночных, препаратов этапы 2 и 3 из перечисленных опускаются.

Кислые	Примеры – эозин (розовый), кислый фуксин	Окрашиваемые ими структуры содержат оснóв- ные группы и называются оксифильными (аци- дофильными, или эозинофильными). Пример - многие белки цитоплазмы.
Оснóвные	Гематоксилин (фиолетовый), азур II	Окрашиваемые структуры содержат кислые группы и называются базофильными. Пример – молекулы ДНК в клеточном ядре.
Нейтраль- ные	Обычно это смесь оснóвного и кислого красителей	Некоторые структуры красятся лишь одним из этих двух красителей, а некоторые, называемые нейтрофильными, – сразу обоими красителями.
Индиффе- рентные	Пример – судан III	И эти красители, и окрашиваемые ими вещества являются гидрофобными (липофильными). Так, судан III растворяется в каплях жира и кра- сит их в ярко-оранжевый цвет.

1. Окраска гематоксилином и эозином	Ядра клеток – благодаря ДНК, базофильны и красятся в фиолетовый цвет. Цитоплазма чаще всего, благодаря белкам, оксифильна и красится эозином в розовый цвет
2. Окраска железным гематоксилином	Препарат обрабатывают железноаммиачными квасцами и красят гематоксилином. Хорошо выявляются границы клеток, ядра, поперечная исчерченность в поперечнополосатых мышечных тканях.
3. Окраска по методу Романовского	Два красителя – азур II и эозин. Применяется для окраски мазков крови и красного костно- го мозга.

Реакция Браше	На РНК
Реакция Фёльгена	На ДНК
ШИК- реакция	На поли- сахариды

5

 

Методы окраски гистологических препаратов

 

 

 

 

 

а) Типы красителей

б) Наиболее распространённые способы окраски

в) Гистохимические методы исследования

Основаны на специфической реакции между химическим реактивом и определённым

 

 

компонентом препарата.

Р-ция с толуиди-

Новым синим

Реакция с

Суданом III

На гликоз-

амингиканы

На нейтраль-

ные жиры

 

 

4. Электронная микроскопия: ход электронных «лучей»

Источник электронов – катод.

Анод – разгоняет электроны и имеет отверстие, через которое они проскакивают.

Далее – конденсор (электромагнитная катушка, фокусирующая «лучи» на образце),

объектив (катушка, принимающая «лучи», которые расходятся от образца)

и окуляр (катушка, направляющая «лучи» на люминесцентный экран).

Пост- клеточные структуры	Это происходящие из обычных клеток структуры, которые - окружены плазмолеммой, - но лишены ядра, а часто (хотя не всегда) и многих или всех органелл.	Примеры: - эритроциты, - тромбоциты, - роговые чешуйки (корнеоциты)
Над- клеточные структуры	а) Симпласты – окружённые плазмолем- мой многоядерные структуры, образующие- ся путём слияния клеток.	Пример: - миосимпласты (в мышечных волокнах скелетных мышц).
б) Синцитий – совокупность клеток, свя- занных цитоплазматическими мостиками, которые остаются после делений между до- черними клетками.	Пример – совокупность сперма- тогенных клеток, раз- вивающихся из одной стволовой клетки.
Меж- клеточное вещество	а) Волокна – коллагеновые, эластические, ретикулярные.
б) Основное аморфное вещество – образовано протеогликанами и гликопротеинами.
в) Производные (волокон и аморфного вещества) – базальные мем- браны, эластические мембраны, костные пластинки.

1.	Клетка – это элементарная единица живого. (Органеллы по отдельности такими единицами не являются.)
2.	Все клетки сходны по общему плану строения (плазмолемма, ядро, цитоплазма).
3.	Клетки размножаются только путём деления («каждая клетка – только из клетки»).
4.	У многоклеточных клетки функционируют в тесной связи друг с дру- гом, образуя ткани и органы, составляющие единое целое – организм.

6

 

Раздел 2. ЦИТОЛОГИЯ