Методы диагностики микозов

Медицинская микология.

Роль грибов в патологии человека. Причины, предрасполагающие к грибковым заболеваниям

Грибы относятся к эукариотам. Представляют собой многоклеточные или одноклеточные организмы. Тело грибов называется талом, состоит из тонких ветвящихся нитей (гифы). Из гиф формируется мицелий или грибница.

Гифы врастающие в субстрат называются вегетативные, отвечают за питание грибов, растущих над поверхностью или воздушная часть – это воздушные или репродуктивные гифы (бесполое размножение).

Гифы представляют собой длинные трубочки, окруженные ригидной клеточной стенкой. В цитоплазме имеются ядро и органеллы. Гифы высших грибов имеют перегородки – септы, такой мицелий носит название септальный.

Гифы низших не имеют перегородки. Мицелий называется истинным, если все клетки имеют общую клеточную стенку.

Псевдо – не имеют общую клеточную стенку.

Дрожжевые грибы. Имеют вид овальных клеток, одноклеточные.

 

Размножение половое или бесполое.

Подавляющие большинство принадлежит классу несовершенных грибов. У них бесполый способ размножения.

 

По типу дыхания – аэробы, но тканевые формы могут быть анаэробы.

 

Большинство грибов – обитателей окружающей среды – сапрофиты. Наряду с ними выделяют группу грибов – симбионтов (например, многие базидиомицеты существуют в симбиозе с корнями высших растений и т.д.). Особую группу составляют грибы-паразиты растений, животных и человека. К последним относятся патогенные и условно-патогенные грибы (их большинство).

Заболевания грибковой этиологии у человека обозначают термином “микозы”.

Большинство возбудителей микозов человека относятся к условно-патогенным микроорганизмам, поэтому важно учитывать предрасполагающие факторы к заболеваемости микозами:

- Нарушение обмена веществ и функции эндокринной системы.

-Возраст  дети дошкольного и школьного возраста чаще подвержены дерматофитиям, а новорожденные, дети первого года жизни и лица старческого возраста – кандидозам.

-Гипо- и авитаминозы.

-Нерациональная антибиотикотерапия, развитие дисбактериоза.

-Иммунодефицитные состояния различной этиологии, в том числе ВИЧ-инфекция.

- Профессиональная вредность при нерациональных условиях труда в медицинской промышленности (производство антибиотиков, в первую очередь, различные биотехнологические производства).

- Чрезмерная потливость и дисфункция вегетативной системы.

- Наличие травм – входных ворот инфекции.

 

Патогенез микозов сложен и окончательно не изучен.

Споры, фрагменты мицелия многоклеточных грибов попадают естественными путями (чаще контактным, воздушно-капельным, алиментарным путем) в организм человека и начинают активно размножаться. Внутрибольничные инфекции могут быть вызваны грубами.

Для микозов характерно клиническое многообразие от поверхностных до органных поражений и даже развитие генерализованных форм инфекций – сепсиса.

При органных поражениях наиболее частыми мишенями оказываются легкие, ЖКТ, печень, поджелудочная железа, почки. При этом присутствуют специфические симптомы, и заболевания трудно диагностируются. Заподозрить грибковую этиологию процесса можно при отсутствии эффекта от использования антибактериальных химиотерапевтических средств, в том числе и антибиотиков, тенденции к хронизации процесса.

Мицелий многоклеточных грибов прорастает в ткани, сосуды (его фрагменты могут отрываться, обуславливая закупорку даже магистральных сосудов и тромбоэмболию).

Из-за способности грибов расщеплять кератин высок процент поражений кожи и ее дериватов.

 

Вирулентность грибов обусловлена их способностью размножаться в тканях, повреждая их, продукцией ферментов агрессии (протеаз, кератиназы, фосфолиаз, фосфотаз и др.) и экзотоксинов.

Например, грибы рода Candida, вид C.albicans продуцируют экзотоксин, к которому высоко чувствительны белые мыши.

Представитель рода Aspergillus, A.flavus – флавотоксин, воздействующий на энтероциты и обуславливающий развитие пищевого токсикоза.

Классификация микозов

По локализации и распространенности вызываемых грибами поражений микозы делят на:

1. Поверхностные, или кератомикозы – поражение эпидермального слоя кожи и ее придатков дериваты.

2. Дерматомикозы – поражение слоя собственно дермы кожи и волосяных луковиц.

3. Глубокие микозы – поражение внутренних органов.

 

4.Микозы, вызываемые условно-патогенными грибами, среди которых на первом месте по частоте заболеваемости стоят кандидозы.

 

Первые три группы микозов преимущественно сапронозные экзогенные инфекции.

Микозы, вызываемые условно-патогенными грибами, в основном имеют эндогенную природу, так как эти грибы могут входить в состав нормальной микрофлоры организма человека и вызывать заболевания на фоне снижения его защитных сил.

Методы диагностики микозов

1. микроскопическое исследование, особенно при кератомикозах, когда доступным для исследования материалом являются соскобы с пораженной кожи, специально полученные препараты пораженных волос и ногтей.

Грибы  достаточно крупные по размерам среди микроорганизмов.

Дрожжевые клетки легко выявляются как при иммерсионной микроскопии, так и под малым увеличением светового микроскопа в окрашенных по методу Грама мазках-препаратах как грамположительные микроорганизмы.

Мицелярные грибы плохо окрашиваются, их выявляют при темнопольной микроскопии неокрашенных препаратов, либо с помощью люминесцентной микроскопии, если мицелий гриба обладает спонтанной флюоресценцией в УФ-лучах.

Основным методом, подтверждающим диагноз микоза, является микологическое исследование. Его цель – выделение чистой культуры гриба и ее идентификация. Недостаток – длительность исследования, так как первичный рост грибов происходит лишь на 3-5-е сутки.

Методом ускоренной диагностики микозов является иммуноиндикация. Реакции с мечеными сыворотками (флюорохромами, ферментами, радиоизотопами), РСК, РПГА, реакция коагглютинации со стандартными антительными препаратами позволяют выявлять антиген грибов в исследуемом материале без выделения чистой культуры. Исследуемый материал, также как и при микологическом исследовании, зависит от клинических форм микозов.

Аллергический метод диагностики - по результатам внутрикожных аллергических проб.

Диагноз, основанный только на результатах иммуноиндикации или только аллергического метода диагностики, носит ориентировочный характер, так как могут широко встречаться носительство (особенно условно-патогенных) грибов и высокая бытовая сенсибилизация их аллергенами.

Используется серологическое исследование для выявления антител в сыворотках больного (реакции иммунитета, но со стандартными антигенами, с диагностикумами из грибов). Диагностическим критерием выявления инфекционных антител является обнаружение нарастания их титра при постановке реакций с разведениями парных сывороток больного, взятых в разные сроки болезни.

При обнаружении при микроскопическом исследовании или выделении при микологическом исследовании условно-патогенных грибов из материала важны критерии этиологической значимости:

1)обнаружение и выделение грибов из в норме стерильного материала (например, кровь, ликвор, для Candida – слизь из носовых ходов, ушная сера);

2)количественные показатели:

при микроскопии – обнаружение псевдомицелия, клеток возбудителя в каждом поле зрения под большим увеличением микроскопа – свидетельствует об активном размножении гриба и развитии заболевания;

при микологическом исследовании – выделение гриба из разведений мокроты, мочи, фекалий 10–3 –указывает на обсемененность выше нормы и свидетельствует о поражении соответствующего органа;

3)наличие антител в сыворотке больного к выделенному возбудителю.

Кератомикозы

Для кератомикозов (поверхностных микозов) характерно поражение эпидермиса кожи и ее дериватов (ногтей, волос).

Как правило, это сапронозные инфекции (возбудители – обитатели окружающей среды с контактным путем заражения).

Наиболее распространенными поверхностными микозами являются:

· разноцветный лишай (малясериоз),

· черный лишай (кладоспориоз),

· белая и черная пьедра,

· грибковые поражения ногтей на пальцах рук у детей.

Возбудителем разноцветного лишая являются дрожжеподобные грибы рода Phityrosporum (старое название Malasseria), вид – P.furfur. Клетки гриба, представляют собой короткие почкующиеся изогнутые гифы, лежащие гроздями.

Клиническая картина: появление в местах размножения гриба (на спине, плечах, груди, животе) шелушащихся розовых пятен с последующей депигментацией,  настолько характерна, что дала название самому заболеванию.

Диагноз подтверждается легко обнаруживающимися при микроскопическом исследовании гифами грибов в соскобах с пораженной кожи. Разноцветный лишай встречается повсеместно. Его развитию способствуют гиперинсаляция и дисбактериозы.

 

Возбудителем черного лишая является мицелярный гриб рода Cladosporium, вид C.werneckii. Для него характерен септированный мицелий, обладающий коричневым пигментом, и бесполое размножение почкованием. Поражает роговой слой подошв и ладоней. При развитии мицелия появляются светло-коричневые пятна, которые затем чернеют. Диагноз подтверждается результатами микроскопии соскобов с пораженной кожи.

 

Возбудителем белой пьедры является плесневый гриб из рода Trichosporon, вид T.cutaneum. Заболевание характеризуется поражением чешуек кожи и волос бороды с образованием белых узелков. При диагностике (микроскопии) в мазках обнаруживают ветвящиеся гифы гриба с артроспорами (мицелий у Trichosporon несептированный). Белая пьедра достаточно часто встречается среди мужского населения Англии, Италии, Франции, США и Японии.

 

Возбудитель черной пьедры – гриб из класса аскомицетов, рода Piedraia (вид P.hortai). Заболевание характеризуется поражением волос головы и образованием черных узелков. Диагноз подтверждается результатами микроскопии  септированный мицелий с аскоспорами, которые содержат половые споры гриба. Заболевание  встречается в странах Южной Америки, Африки и Юго-Восточной Азии.