Морфология прокариот. Методы выявления: окраска, микроскопия

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

изучить морфологию прокариот; особенности ультраструктуры бактерий, функции отдельных структур; ознакомиться с методами приготовления и окраски микропрепаратов для микроскопии.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:

1. Основные формы и размеры бактерий.

2. Протопласты, сферопласты и L-формы бактерий.

3. Постоянные и непостоянные структуры бактериальной клетки.

Функциональное значение отдельных структурных компонентов.

4. Различия в структуре грамположительных и грамотрицательных бактерий. Химический состав. Функции.

5. Механизмы взаимодействия красителей с клеточной стенкой бактерий при окраске по Граму.

6. Методы изучения микроорганизмов в нативном и окрашенном состоянии. Простые и сложные методы окрашивания. Методы Грама, Циля-Нильсена, Ожешко, Нейссера, Бурри-Гинса, Романовского-Гимза.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:

n приготовить препараты: живые (нативные), фиксированные;

n окрасить препараты простым методом и методом Грама.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ

о механизмах окраски структурных компонентов бактерий: клеточной стенки кислотоустойчивых бактерий, спор, капсул, жгутиков, включений.

Работа №1 Морфология прокариот

Цель: сравнить формы и размеры микроорганизмов (см. теоретическую справку - Морфология прокариот)

Результат:

Результат:

Результат:

Вывод:

Работа№2. Изучение структуры клеточной стенки

Цель: изучить структуру клеточной стенки бактерий; освоить технику приготовления фиксированных препаратов.

Схема строения бактериальной клетки:

А) Назвать обязательные компоненты бактериальной клетки и охарактеризовать их

Б) Дать характеристику перечисленных структурных компонентов бактериальной клетки, методы их выявления, охарактеризовать участие в процессах метаболизма и значение структур для процессов репродукции, биосинтеза белка, энергетической, регуляторной, адгезивной функциях клетки.

Структурные компоненты бактериальной клетки и их функции:

Непостоянные компоненты и их природа	Функции	Метод выявления
Капсула   Слизистая структура, прочно связана с клеточной стенкой (полисахариды или полипептиды)	1) Защитная 2) Антигенная 3) Адгезивная	Световая микроскопия, окраска по Бурри, Бурри-Гинсу
Жгутики   Состоят из белка-флагеллина, являющимся Н-антигеном   Пили   Состоят из белка	Обеспечивают движение бактерий   Пили 1го порядка обеспечивают адгезию к поражаемой микробной клетки. Пили 2го порядка – конъюгационные, обеспечивают перенос частиц генетического материала от донора к реципиенту	В мазках «висячая капля», «раздавленная капля», при фазово -контрастной микроскопии   Электронная микроскопия
Плазмиды   Дополнительные факторы наследственности в виде замкнутых колец ДНК с небльшой молекулярной массой	1) Регуляторная – компенсация нарушений метаболизма ДНК клетки хозяина   2) Кодирующая – внесение в бактериальную клетку новой генетической информации	Электронная микроскопия
Включения   Гликоген, полисахариды, бета-оксимасляная кислота, полифосфаты (валютин)	Запас питательных веществ	Световая микроскопия. Валютин окрашивают по Леффлеру или Нейссеру
Спора   Образуют Гр+ бактерии, из одной клетки образуется спора. Плотная многослойная оболочка, с большим содержанием кальция и липидов низким содержанием воды	Сохранение генетической информации, при неблагоприятных условиях. Расположена: - субтерминально - терминально - центрально	Световая микроскопия, окраска по Ожешко.

Схема построения клеточной стенки: