Шигеллы. Патогенез дизентерии. Роль факторов инвазии, распространение

Входные ворота – ротовая полость, где активируются факторы неспецифической защиты ( лизоцим, макрофаги, нейтрофилы)

Желудок: под действием соляной кислоты и ферментов честь гибнет, высвобождается эндотоксин.

Тонкая кишка: желчь часть шигелл разрушает, высвобождается эндотоксин, который обуславливает первые признаки заболевания – озноб и лихорадку.

Оставшиеся шигеллы проникают в дистальные отделы толстого кишечника, происходит адгезия их к слизистой кишечника, колонизация, отторжение ворсин кишечника в местах прикрепления, развитие воспаление. С помощью белков-инвазинов проникают в энтероциты, активно размножаются в них. Выделяют шигатоксин и шигаподобный токсины, которые нарушают обмен в-в (водно-солевой, углеводный и белковый). Разрушается эпителиальный покров кишечника, развитие катарально-язвенного воспаления.

7. Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов. Серодиагностика (РИФ, РПГА).

Антитела к возбудителям брюшного тифа и паратифов обнаруживаются в сыворотке крови больных с 8-10 дня заболевания.

РИФ:

Ингредиенты:

1)Сыворотка крови больного

2)Диагностикум

3)антиглобулиновые антитела, меченные флюорохромом.

АГ помещают на стекло и фиксируют. Наносят сыворотку больного. В результате взаимодействия АГ и АТ обр. иммунные комплексы. Затем АТ, непрореагировавшие с АГ диагностикума, смывают. Наносят антиглобулиновые антитела, меченные флюорохромом. Они взаимодействуют с обр. иммунными комплексами. Затем непрореагировавшие антиглобулиновые антитела, меченные флюорохромом, смывают. Образовавшиеся иммунные комплексы дают зеленое свечение в УФ- лучах люминесцентного микроскопа. Это положительная реакция. При отрицательной реакции , т.е. если не обр. иммунные комплексы, свечения не наблюдается.

РПГА. Ингредиенты:

1)ИХН ( во все лунки)

2)сыворотка крови больного

3) антигенный эритроцитарный диагностикум.

В 5 опытных лунках титруем сыворотку больного от 1:20 до 1:320.

2 контрольные лунки: контроль сыворотки и контроль диагностикума.

В опытные лунки добавляем одинаковое количество антигенного эритроцитарного диагностикума. В термостат.

Учет результатов:

«+» реакция – обр. зонтиков.

«-» реакция – обр. пуговок.

8. Сыворотка диагностическая холерная люминесцирующая, приготовление, назначение.

Сыворотка диагностическая холерная люминесцирующая – это МБП, содержащий АТ, дающие свечение в люминесцентном микроскопе и предназначенные для идентификации холерного вибриона.

Изготовления холерных флуоресцирующих иммуноглобулинов включает в себя следующие этапы:

· получение антигена,

· гипериммунизацию кроликов-продуцентов с целью получения сыворотки-полуфабриката;

· выделение из гипериммунной сыворотки серологически активной иммуноглобулиновой фракции;

· конъюгирование иммуноглобулиновой фракции с флуорохромом;

· контроль уровня специфической активности и специфичности конъюгата;

· ​стабилизацию препарата флуоресцирующих антител.

Можно применять в экспрес-диагностике холеры – проведение прямой РИФ.

9. Факторы патогенности холерного вибриона. Токсины и их характеристика.

Главными факторами патогенности явл.:

· Токсинкорегулируемые пили– обеспечивают колонизацию вибриона на микроворсинках тонкой кишки.

· Холерный энтеротоксин – белок, состоящий из 1субъединицы А и 5 субъединиц В. В- субъединицы ответственны за связывание всей молекулы токсина с клеточным рецептором слизистой тонкой кишки.

А-субъединица проникает внутрь клетки, активирует АЦ, усиленный синтез цАМФ, это изменяет активный транспорт ионов: усиленно выделяются ионы хлора, затрудняется всасывание хлора и натрия, что составляет осмотическую основу для выделения в просвет кишечника воды.

· Нейраминидаза укрепляет связь В-субъединицы с эпителиоцитами и облегчает проникновение энтеротоксина внутрь клеток

· Растворимая гемагглютинин/протеаза способствует отделению вибрионов от рецепторов эпителиоцитов и их выходу из кишечника во внешнюю среду, обеспечивая им эпидемическое распространение.

· ​Эндототсин – ЛПСЮ, выделяется при разрушении вибриона. Активирует каскад арахидоновой кислоты, запускает синтез простагландинов, происходит сокращение гладкой мускулатуры и развитие тенезм.

10.Бактериологическоеисследование при пищевых токсикоинфекциях. Особенности.

Материал для исследования:

- Испражнения

- Рвотные массы

- Промывные воды желудка

- Пищевые продукты и сырье, с которыми связывают развитие болезни

Для обнаружения безусловно-патогенных микробов на соответствующие накопительные и селективные среды засевают неразведенный исследуемый материал. Для выявления УПМ готовят серийные разведения материала в ИХН или в0,1% пептонной воде. Плотный материал перед посевом измельчают в асептических условиях с добавлением ИХН.

Делают мазок, окраска по Граму.

Для выявления и идентификации бактерий используют подходящие пит. среды и тесты:

· Среда Левина или Эндо – выявление энтеробактерий

· ЖСА –стафилококки

· МПА с фурагином –псевдомонады

· МПА - бациллы

· ​Среда Китта-Тароцца – клостридии.

Выделяют чистую культуру, проводят идентификацию, определяют чувствительность к антибиотикам, определяют факторы патогенности, б/х св-ва.