ПОЛ и антиоксидантная защита в мембранах тромбоцитов у больных стабильной стенокардией в зависимости от ИМТ

анализируемые показатели, ед. измерения	ИМТ 20-25 кг/м2 (n=57)	ИМТ >25 кг/м2 (n=50)	р
ДК, нмоль/мг липидов	64,22±4,5	110.1±8,2	<0,001
МДА, нмоль/мг липидов	9,9±0,9	12,1±1,7	<0,002
ШО, I/мг липидов	56,98±	34,33±2,8	<0,001
СОД, у.е. торм/мг белка	2,0±0,3	2,3±0,2	н/д
каталаза , мкмоль/мин/мг белка	1,2±0,06	1,5±0,3	н/д
a-ТФ, нмоль/мл	2,2±0,2	2,2±0,2	н/д

 

У больных с избыточным потреблением животного жира содержание ОХС и соотношения ОХС/ОФЛ были достоверно (p<0,05) выше, чем у больных ИБС с оптимальным потреблением жиров (Рис.3).

Особого внимания заслуживает достоверное увеличение содержания ОХС (p<0,01), а также соотношения ОХС/ОФЛ (p<0,05) в мембранах Тр у курящих больных ИБС.

Рис. 4. Содержание ШО в мембранах Тр у курящих больных ИБС

Кроме того, у курящих больных стабильной стенокардией (Рис. 4) было установлено достоверное повышение уровня ШО (p<0,01), что согласуется с данными Harats et al. (1990) о том, что курение непосредственно может вызывать окислительный стресс.

Согласно данным корреляционного анализа, были получены определенные взаимосвязи между количеством выкуриваемых сигарет и содержанием ОХС (r_xy=+0,367, p<0,05), ШО (r_xy=+0,312, p<0,05) и a-ТФ (r_xy=-0,422, p<0,05) в мембранах Тр. Эти результаты, в какой-то мере, согласуются с данными Brezinka and Padmos (1993) о том, что риск внутрикоронарного тромбоза достоверно связан с количеством выкуриваемых сигарет.

                                                                                                    Таблица 3.

Содержание ЛФХ фракции в клеточных мембранах тромбоцитов в зависимости от наличия факторов риска

показатели, ед. измерения	больные ИБС		P
	некурящие (n=50) 0,015±0,003	курящие (n=57) 0,026±0,004	<0,05
ЛФХ, мкмоль/мл	ИМТ 20-25 кг/м2 (n=57) 0,021±0,002	ИМТ >25 кг/м2  (n=50) 0,031±0,003	<0,01
	не злоупотребляли жирами (n=39) 0,013±	злоупотребляли жирами (n=68) 0,028±0,003	<0,02

Увеличение содержания ЛФХ (Таб. 3) как продукта метаболизма ФЛ происходит при воздействии курения, ожирения и избытка животных жиров, как и при других состояниях, сопровождающихся окислительным стрессом (Биленко М.В., 1989; Грибанов Г.А., 1991).

Особого внимания заслуживают наиболее выраженные значения корреляционной зависимости (p<0,001) с отрицательным вектором между ОХС плазмы и ОФЛ (r_xy=-0,344) мембран Тр, ФХ (r_xy=-0,512) , ФЭА (r_xy=-0,343), СФМ (r_xy=-0,523) и ФС (r_xy=-0,72), что свидетельствует о существенной зависимости концентрации основных фракций ФЛ от уровня ХС плазмы.

 Обнаружена прямая корреляционная зависимость (p<0,001) между уровнем ОХС плазмы и накоплением метаболитов ПОЛ - ШО (r_xy=+0,357) и МДА (r_xy=+0,105).

При проведении корреляционного анализа была установлена отрицательная зависимость между возрастом больных и содержанием ОФЛ (r_xy=-0,37; p<0,01) и ФС (r_xy=-0,251; p<0,05) в тромбоцитарных мембранах.

Таким образом, клеточные мембраны Тр у больных стабильной стенокардией характеризуются накоплением ЛФХ, ОХС, активацией ПОЛ на фоне сниженной активности неферментативного звена антиоксидантной защиты. Гиперхолестеринемия, ожирение, избыточное потребление животных жиров, артериальная гипертония и курение усугубляют нарушения в структурно-функциональной организации клеточных мембран Тр у больных ИБС, что подтверждает их роль как факторов прогрессирования ИБС и риска артериальных тромбозов.

Наличие изменений в липидной структуре и активация ПОЛ являются основанием для проведения лечебных и профилактических мероприятий, направленных на коррекцию указанных нарушений.

 

2. Влияние фосфолипидного продукта “Витол” на структурно-функциональные параметры клеточных мембран тромбоцитов у больных ИБС

С целью коррекции обнаруженных в ходе исследования изменений в качестве биологически активной пищевой добавки 65 пациентам со стабильной стенокардией напряжения назначался комплекс нативных ФЛ “Витол” в дозе 5г/день в течение 21 дня. У всех больных проводилось исследование клинической эффективности и изучение параметров клеточных мембран Тр.

Применение фосфолипидного продукта “Витол” сопровождалось улучшением субъективного состояния(81,3% больных), а также достоверным снижением ХС плазмы.

“Витол” оказывал воздействие на липидную структуру мембран Тр, проявлявшееся в достоверном увеличении ОФЛ и их фракций, а также снижении ОХС и соотношения ОХС/ОФЛ (Таб. 4).

У больных стабильной стенокардией использование комплекса нативных ФЛ “Витол” вызывало достоверное снижение (p<0,01) содержания первичных продуктов ПОЛ - ДК при значительном росте a-ТФ (p<0,001) в мембранах тромбоцитов (Рис. 5, 6).

 

Таблица 4.

Влияние фосфолипидного концентрата “Витол” на структурные параметры клеточных мембран тромбоцитов у больных стабильной стенокардией ( M ± m).

показатели, ед. измерения	больные ИБС, (n=65)		Р
	до лечения	после лечения
ФЭА, мкмоль/мл	0,046±0,004	0,089±0,005	<0,001
ФХ, мкмоль/мл	0,060±0,005	0,086±0,006	<0,001
СФМ, мкмоль/мл	0,028±0,005	0,065±0,009	<0,001
ФС, мкмоль/мл	0,024±0,004	0,055±0,007	<0,001
ЛФХ, мкмоль/мл	0,019±0,003	0,044±0,007	<0,002
ОФЛ, мкмоль/мл	0,17±0,01	0,290±0,06	<0,05
ОХС, мкмоль/мл	0,35±0,03	0,26±0,03	<0,05
ОХС/ОФЛ, ЕД	2,0±0,1	0,9±0,06	<0,001

 

 

Рис 5. Содержание ДК в мембранах Тр	Рис. 6. Содержание a -ТФ в мембранах Тр

При проведении сравнительного анализа влияния антиангинального лечения ИБС и “Витола” на структурные параметры Тр было установлено достоверное увеличение всех фракций ФЛ, ОФЛ после приема комплекса нативных ФЛ, а также уменьшение содержания ОХС в мембранах Тр и снижение ОХС/ОФЛ, в отличие от антиангинальной терапии в обычном режиме. Параллельно было установлено достоверное снижение содержания первичных продуктов ПОЛ - ДК и значительный рост a-ТФ в мембранах Тр.

Изучение влияния “Витол” на клеточные параметры Тр проводилось с учетом влияния факторов риска.

Применение “Витола” у больных ИБС без сопутствующей артериальной гипертонии вызывало более значительное (p<0,01) снижение уровня ОХС в мембранах Тр по сравнению с больными с гипертонией.

Рис 7. Влияние “Витола” на фосфолипидный состав мембран у курящих больных

Комплекс нативных ФЛ “Витол” у некурящих больных ИБС оказывал более выраженное воздействие на фосфолипидный состав мембран Тр. (Рис.7). Данные корреляционного анализа также показывают, что курение имеет обратную связь уровнем ОФЛ (r_xy=-0,360; p<0,05) и прямую связь с содержанием ОХС (r_xy=+0,453; p<0,05).

Рис. 8. Содержание a -ТФ и активность СОД у курящих больных после курса лечения “Витолом”

Заслуживают внимания изменения со стороны изучавшихся параметров антиоксидантной защиты; у курящих больных ИБС наблюдался достоверный рост СОД и a-ТФ, однако увеличение a-ТФ было меньшим, чем у некурящих больных (рис.8). Данные корреляционного анализа подтверждают влияние курения на содержание СОД (r_xy=+0,5, p<0,02) и a-ТФ (r_xy=-0,416, p<0,05) после “Витола”.

“Витол” оказывал более выраженное модулирующее действие на мембраны Тр (Рис. 9) у больных ИБС повышенным весом (ИМТ >25 кг/м²).

* - p<0,05

* - p<0,001

Рис. 9. Влияние “Витола” на липидную структуру Тр у больных с повышенным весом

У больных избыточным весом (ИМТ>25кг/м²) по сравнению с больными с нормальным весом наблюдался более выраженное (p<0,01) увеличение содержания a-ТФ при его равных исходных значениях.

Фосфолипидный концентрат “Витол” оказывал более выраженное (p<0,05) влияние, проявлявшееся в более низком содержании ОХС (0,25±0,025 мкмоль/мл) у лиц, не ограничивавших потребление животных жиров по сравнению с больными ИБС, не злоупотреблявших жирами (0,34±0,028 мкмоль/мл). Показатели ПОЛ и звеньев антиоксидантной защиты при избыточном потреблении жиров существенно не отличались от таковых у больных без избыточного потребления животных жиров.

Рис. 10. Влияние “Витола” на уровень ОХС и ОФЛ в мембранах Тр у больных ИБС с нормо- и гиперхолестеринемией

 

Следует отметить статистически значимое увеличение содержания ОФЛ по уровню всех фракций как при нормальном (ХС плазмы<6,2 ммоль/л, или < 240мг/дл), так и при повышенном уровне ХС (>6,2 ммоль/л, или >240мг/дл) плазмы, более выраженное увеличение легкоокисляемых фракций было зарегистрировано у больных ИБС с гиперхолестеринемией. Кроме того, у обследованных с гиперхолестеринемией наблюдается статистически значимое снижение ОХС мембран Тр (Рис. 10).

После лечения нативными ФЛ обращает внимание снижение с высокой степенью достоверности уровня ДК и статистически значимое увеличение содержания основного жирорастворимого антиоксиданта a-ТФ как при нормо-, так и гиперхолестеринемии.

Концентрат нативных ФЛ “Витол” оказывает значительное влияние на липидный состав как в группе больных в возрасте от 40 до 49 лет, так и более старшей возрастной группе (от 50 до 60 лет). При этом в более старшей возрастной группе после приема “Витола” содержание ФХ достоверно выше (что не способствовало изменению соотношения легкоокисляемых фракций к трудноокисляемым), а коэффициент ОХС/ОФЛ (Рис.11) достоверно ниже, чем в группе больных в возрасте от 40 до 50 лет.

Рис. 11. Влияние “Витола” на соотношение ОХС/ОФЛ в мембранах тромбоцитов в зависимости от возраста больных.

Данные корреляционного анализа (p<0,05) также подтверждают, что содержание ФХ (r_xy=+0,339), СФМ (r_xy=+0,328), ОФЛ (r_xy=+0,315) после приема “Витола” имеют положительную связь с возрастом.

В возрастной группе от 40 до 49 лет наблюдалось статистически достоверное снижение ДК при практически неизменном уровне вторичных и конечных продуктов ПОЛ (Рис.12). В группе больных стабильной стенокардией в возрасте от 50 до 60 лет наблюдается снижение уровня ШО с высокой степенью достоверности при отчетливо выраженной тенденции к снижению ДК и МДА в липидном бислое. Отсутствие реакции со стороны конечных продуктов липопероксидации у более молодых больных, возможно, обусловлено активацией утилизации липоперекисей до метаболически инертных соединений, что является одним из способов регуляции активности процессов ПОЛ в мембранах Тр (Жмуров В.А., 1993).

больные ИБС, возраст 40-49 лет	больные ИБС, возраст 50-60 лет

Рис. 12. Продукты ПОЛ после “Витола”

Особенностью действия комплекса нативных ФЛ является его активирующее влияние на антиоксидантную защиту в тромбоцитарных мембранах у больных ИБС. После применения препарата “Витол” во всех группах больных регистрировалось статистически значимое возрастание содержания a-ТФ.

Согласно данным экспериментальных исследований ФЛ присуща синергическая антиоксидантная активность; возможна частичная регенерация a-ТФ по ходу окисления при взаимодействии его феноксильных радикалов с ПНЖК фосфолипидов.(Сторожок Н.М., 1995. 1997). Отмечено, что наибольший синергический эффект свойственен ФЛ, имеющим в своем составе азотистые основания и ПНЖК (Климов А.Н., Никульчева Н.Г., 1995; Сторожок Н.М., 1995; 1997; Wassal et al., 1986, 1990; Shamovski et al., 1991, 1992).

Подводя итог сказанному выше, необходимо отметить, что при стабильной стенокардии напряжения клеточные мембраны тромбоцитов характеризуются повышенной “жесткостью” и активацией ПОЛ на фоне снижения уровня основного антиоксиданта - a-ТФ.

Комплекс нативных фосфолипидов “Витол” оказывает наиболее существенное воздействие на липидную структуру мембран Тр у больных ИБС, стабильной стенокардией в сочетании с гиперхолестеринемией, ожирением, при злоупотреблении жирами, а также в более старшей возрастной группе. Использование БАД “Витол” в качестве профилактического средства позволяет корригировать нарушения структурно-функционального состояния мембран тромбоцитов при ИБС.

 

ВЫВОДЫ

1. У больных стабильной стенокардией по сравнению со здоровыми лицами в клеточных мембранах Тр наблюдаются мембранопатологические изменения, характеризующиеся возрастанием ОХС, увеличением коэффициента ОХС/ОФЛ при увеличении содержания ЛФХ. Параллельно регистрируется активация перекисного окисления липидов на фоне снижения уровня a-ТФ липидном бислое тромбоцитарных мембран.

2. Наличие таких факторов риска ИБС как гиперхолестеринемия, ожирение, избыточное потребление животных жиров, курение, возраст (старше 50 лет) усугубляет имеющиеся нарушения структурно-функциональной организации клеточных мембран Тр.

3.Включение в комплексную терапию больных ИБС концентрата нативных ФЛ “Витол” в качестве БАД в дозе 5г/сутки в течение 21 дня сопровождается снижением ОХС плазмы.

4. У больных стабильной стенокардией после использования БАД на основе нативных ФЛ в мембранах тромбоцитов наблюдается достоверное увеличение всех основных фракций ФЛ, достоверное снижение ОХС, что приводит к нормализации соотношения ОХС/ОФЛ.

5. Комплекс нативных ФЛ “Витол” оказывает выраженное антиоксидантное действие, характеризующееся снижением содержания первичных (ДК) и конечных (ШО) продуктов ПОЛ в мембранах тромбоцитов, статистически значимым возрастанием a-ТФ в мембранах Тр.

6. Мембраностабилизирующий и антиоксидантный эффекты нативных ФЛ наиболее выражены у больных ИБС старшей возрастной группы (>50 лет), с cопутствующим ожирением, избыточным потреблением жиров животного происхождения, а также при исходном уровне ОХС плазмы более 6,2 ммоль/л (240 мг/дл).