Гистологические методы исследования

Кусочки органов размером 0,5х0,5 см фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина в течение 48 часов при комнатной температуре. Срезы изготавливали на санном микротом толщиной 5-7мкм. Окраску срезов проводили гематоксилином Эрлиха с последующее докраской 1 % раствором эозина и судана III на жир. Окрашенные срезы заключали в полистирол. Изучение срезов проводили под световым микроскопом при увеличении в 400 раз

Результаты исследований

Накопление свинца и кадмия в органах крыс

При исследовании наличия химических веществ в биологических объектах, прежде всего, необходимо изучить накопление и распределение их в организме. Это необходимо для того, чтобы можно было судить о материальной кумуляции токсикоэлементов в организме и установлении органа накопителя. Изучение накопления и распределения свинца и кадмия в организме дает возможность проведения корреляции между патологическим процессом в органах, содержанием токсикоэлементов в них и изменением биологических показателей в крови животных.

Скорость всасывания соединений тяжелых металлов, их распределение и токсичность зависит не только от биологических особенностей органов пищеварения, а так же физико–химических свойств всасываемых веществ, взаимодействие их с компонентами пищи и от присутствия в кормах различных добавок.

Как известно, содержание протеина в рационе влияет на всасывание токсикоэлементов в организме животных.

В ходе исследований было установлено, что больше всего свинца накапливается в органах крыс, причем больше всего он накапливается в почках и составляет 11,85 ± 0,12 мг/кг. Если сравнивать с контрольной группой, то содержание свинца увеличивается в 24 раза (Р<0,001).

В печени уровень свинца увеличивается в 15 раза, а в сердце 13 раз и составляет – 7,58 ± 0,67 мг/кг и 5,61 ± 0,47 мг/кг соответственно.

При поступлении в организм крыс соединения кадмия на протяжении двух недель, его уровень также больше всего увеличивается в органах крыс.

Содержание токсикоэлемента составляет: в почках – 0,94 ± 0,21 мг/кг, в печени – 0,71 ± 0,62 мг/кг и в сердце –0,75 ± 0,32 мг/кг, т.е. это количество больше, чем в контрольной группе: в почках в 35,7 (Р<0,001), в печени – 23 раза (Р<0,001) и в сердце – в 28 раз (Р<0,01).

Таблица 1. Содержание свинца и кадмии в органах крыс.

Биохимические показатели сыворотки крови крыс

В ходе исследований было установлено, что у крыс, получавших соединения свинца с мясом, количество общего белка в сыворотке крови уменьшается по сравнению с контролем в 1,3 раза и составляет 53,4 ± 0,5 г/л (Р<0,001) (Таблица 1 ).

Содержание белка в сыворотке у крыс, получавших соединения кадмия с мясом составляет 59,7 ± 0,2 г/л, т.е. меньше, чем в контрольной группе в 1,1 раз (Р<0,001). (Таблица 2 ).

Количество альбуминов в сыворотке крови этой группы также уменьшается при поступлении свинца – в 1,2 раза и при поступлении кадмия – 1,1 раз и составляет 31,6 ± 1,3 г/л и 35,5 ± 0,4 г/л соответственно (Р<0,01).

А уровень глобулинов в тоже время увеличивается, при поступлении в организм свинца – в 1,4 раза и при поступлении кадмия – 1,5 раза и составляет 31,1 ± 0,7 г/л и 34,1 ± 0,7г/л соответственно.

За счет увеличения количества глобулина и уменьшения альбумина в сыворотке крови уменьшается и коэффициент А/Г. Если в контрольной группе он составил 1,70, то во 2-ой группе он равен 1,02 и в 3-ой группе – 1,04.

Таблица 2. Биохимические показатели крови крыс

Таким образом, при поступлении в организм крыс соединений свинца и кадмия с мясом уровень белка в сыворотке крови уменьшается в 1,3 раза и 1,1 раз, альбумина – в 1,2 и 1,1 раз, а количество глобулина увеличивается в 1,4 и 1,5 раз соответственно.

Проведенные нами исследования по определению показателей безазотистых органических компонентов показали, что в cыворотке крови крыс, получавших соединение свинца, уровень холестерина увеличился в 1,1 раз и составил 12,20 ± 0,33 мкмоль/л (Р<0,01), а у крыс, получавших соединения кадмия – в 1,32 раза и составил 14,7 ± 0,14 мкмоль/л (Р<0,001).

Наблюдается уменьшение количества глюкозы в сыворотке крови крыс при поступлении в организм кадмия и составило: в 3-ей группе – 4,49 ± 0,13 ммоль/л т.е. произошло уменьшение в 1,28 раз (Р<0,001), в 1,15 раз (Р<0,01), и в 1,02 раза (Р<0,01) соответственно

Причиной или следствием различных патологических состояний является нарушение нормального функционирования ферментных процессов. В ходе исследований была определена активность следующих ферментов: аспарагиновой аминотрансферазы (АсАТ), аланиновой аминотрансферазы (АлАТ) и щелочной фосфатазы.

При поступлении в организм крыс соединений свинца с мясом происходит увеличение показателей ферментов сыворотки крови: щелочной фосфатазы в 2,86 раз, АсАТ – в 1,56 раз, АлАТ – в 1,98 раз и составляет 3,09 ± 0,04 ммоль/л, 1,76 ± 0,09 ммоль/л, 1,09 ± 0,08 ммоль/л соответственно (Р<0,001). При этом коэффициент де – Ритиса также уменьшился и равнялся 1,61.

Аналогичные данные были получены и в опытных группах крыс, получавших с рационом соединения кадмия.

Таким образом, увеличение показателей ферментов при интоксикации крыс соединениями свинца и кадмия указывает на патологические изменения в организме.