Классификация питательных сред и способы их получения

Федеральное государственное бюджетное

Образовательное учреждение

Высшего образования

"Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина" ФГБОУ ВПО Ом c кий ГАУ им. П.А. Столыпина

Кафедра ветеринарной микробиологии, инфекционных и инвазионных болезней

 

 

РЕФЕРАТ

По дисциплине Б1.Б.12 Ветеринарная вирусология и биотехнология

Тема: Методы оценки качества питательных сред

 

 

Работу выполнила: студентка

Сайфулина ДианаТахировна

3 курс, 302 группа

Руководитель:

доцент, кандидат ветеринарных наук

Лещева Надежда Алексеевна

Омск -2019

План

1. Введение……………………………………………………………………..3

2. Культивирование микроорганизмов……………………………………….4

3. Классификация питательных сред и способы их получения…………….4

4. Культивирование грибов…………………………………………………...9

5. Заключение………………………………………………………………...11

6. Список литературы………………………………………………………..12

7. Приложения………………………………………………………………..13

 

Введение

Микробы, как любые другие живые организмы свое развитие и рост, обновление строительного материала, обеспечение энергетических процессов осуществляют за счёт постоянного обмена веществ с окружающей его внешней средой, т.е. путём питания и дыхания. В зависимости от типа питания микробы подразделяют на аутотрофы (способные усваивать углерод из СО2 , а также молекулярный азот из воздуха, а минеральные вещества путём хемо- или фотосинтеза) и гетеротрофы (способны усваивать углерод и другие вещества только из готовых органических соединений). К аутотрофам относятся в основном многие почвенные бактерии, к гетеротрофам (параторофам) – микробы инфекционных болезней животных и растений.

 

Типы питания, дыхания (аэробы и анаэробы), индукцию и активность ферментов, токсинов, пигментов, рост и размножение являются основными физиологическими параметрами, которые учитывают при разработке составов питательных сред и условий культивирования микробов invitro.

 

Культивирование микроорганизмов

 

Культивировать микроорганизмы – это значит искусственно создавать условия для их роста и размножения invitro, взаимосвязанных, но не обязательно сопряжённых процесса. Рост и размножение –циклический 4-х фазный процесс (латентная, логарифмического роста, стационарная, гибель). Период между образованием новых клеток и их делением называется периодом генерации, на длительность которого, кроме особенностей микроба, влияет состав питательной среды. Формы колоний разных микробов на питательной среде одного и того же состава отличаются, что учитывают при их дифференциации.

 

Для культивирования invitro необходимы субстраты, которые микроорганизмы могут использовать в качестве питательных веществ для своего роста и размножения. Такие питательные субстраты – плотные или жидкие – называют культуральными или питательным средами. В большинстве случаев в микробиологических лабораториях микроорганизмы культивируют invitro, т.е. в стеклянных колбах, пробирках и других сосудах.

 

К любой питательной среде предъявляют ряд основных требований:

1. Стерильность и по возможности прозрачность.

2. При составлении питательных сред учитывают потребность микроорганизмов в элементах питания (необходимые для жизнедеятельности клеток биохимические факторы – источники энергии, С, N, S, а также неорганические ионы – доступные для усвоения микроорганизмами).

3. Оптимальные значения ряда биофизических показателей: концентрации водородных ионов (pH), окислительно-восстановительного потенциала (Eh), активности воды (aw ), осмотического давления.

 

Классификация питательных сред и способы их получения

 

В зависимости от видовой принадлежности микробов и целей культивирования консистенция и составы культуральныхсред бывают разными и варьируют в широких пределах. Среда,отвечающая _билай биологическим _среды особенностям _среду микроба _агара и обеспечивающая _объема его _дист рост _того и размножение, _бульон называется _бульон полноценной, _хемо- не имеющая _других какого- либо _отовят компонента, _список необходимого _группы для _средах его _состав жизнедеятельности – дефицитной .

Питательные _также среды _роста классифицируют _петри в зависимости от:

· химического _состав состава _среду и исходных _среды компонентов;

· консистенции;

· целевого _среда назначения.

 

В _сред зависимости _среда от химического _колбах состава _кроме и исходных _среды компонентов _среды различают _целей следующие _паром типы _среде питательных _чапека сред:

- среды _naci неопределенного _среду химического _первая состава (естественные _целей или _среды натуральные _вода среды) – это _виды среды, _гисса которые _состав состоят _белков из продуктов _колбах животного _ряда или _виды растительного _групп происхождения, _среда имеющие _агар сложный _рост неопределенный _средах химических _агар состав:

1) среды _naci животного _через происхождения (исходные _роста продукты – мясо, _хорошо рыба, _паром яйца, _курс молоко _молока и т.д.);

2) среды _обмена растительного _путем происхождения (исходные _состав продукты – соя, _могут горох, _многие картофель, _бульон морковь _видов и т.д.).

На _фильтр естественных _среды средах _среду хорошо _оценки развиваются _рост микроорганизмы, _того однако _среде эти _план среды _средах малопригодны _список для _среды контролируемого _средах изучения _затем физиологии _среды обмена _бульон веществ _отовят микроорганизмов _также и диагностических _кормов исследований, _объема поскольку _среды они _наук не позволяют _среды учитывать _группы потребности _многие ряда _обычно компонентов _также среды, _водой а с другой _обычно стороны _среды определять _обычно вещества, _дист образующие _агар микроорганизмами. Естественные _крови среды _среда используют _хемо- главным _дней образом _обычно для _цель поддержания _среды культур _крови микроорганизмов, _состав накопления _среды их биомассы _другие и диагностических _рост целей.

 

«Полусинтетические» среды (гидролизатные), _среды относящиеся _первая к средам _когда с неопределенным _вода составом. В _сдвиге них, _также наряду _целей с соединениями _среде известной _белков химической _средах природы, _рост входят _обмена вещества _паром неопределенного _среды состава. Их _агары используют _дней в микробиологической _волос практике _среды для _билай получения _также витаминов, _дней антибиотиков, _обычно аминокислот _книга и других _средах продуктов _naсi жизнедеятельности _фгбоу микроорганизмов (продукты _список гидролиза _объема мяса, _могут молока, _среде дрожжей, _агар крови _хорошо и др. белковых _колбах веществ).

 

Среды _ряда известного _naci химического _бульон состава (синтетические) – в _роста их состав _среда включают _агары известные _рост химические _ионов соединения (соли, _среды углеводы, _дней аминокислоты, _курс витамины _дней и т.д.) в _среду оптимальном _средах количественном _среде соотношении. Синтетические _кроме среды _энда по составу _затем бывают _крови простыми _агар или _агар имеют _крови относительно _чапека большой _список набор _кислый компонентов. Их _между используют, _сдвиге когда _роста выращиваемую _среда клеточную _вода массу _среду необходимо _наук максимально _виды освободить _многие от балластных _кормов органических _путем соединений, _среды входящих _другие в состав _среде обычных _могут сред, _рост например _джесси при _могут получении _фильтр диагностических аллергеновили _среды при _оценки изучении _своему метаболических _рост потребностей _naci микроорганизма _состав в том _сред или _среде ином _среды конкретном _кислый химическом _молока соединение. Кроме _список того, _первая исследователи _агар стремятся _дней определить _ряда для _среду каждого _средах микроорганизма _водой минимальные _другие потребности _рост в питательных _книга веществах _сред и, исходя _своему из этого, _другие создать _групп минимальную _книга среду, _среды содержащую _naсi лишь _дней необходимы _наук для _чапека его _агар размножения _целей химические _фгбоу соединения.

 

По _состав консистенции _кислый питательные _могут среды _состав дифференцируют наплотные, _натрия полужидкие _среду и жидкие.

 

Жидкие _смеси питательные _также среды _среде готовят, _рост используя _рост экстракты, гидролизаты, _через растворы _среды исходных _средах продуктов.

 

Полужидкие _агар и плотные _того питательные _билай среды. Используют _бульон для _вода учёта _состав количества _список бактерий, _вода выделения _фгбоу их в виде «чистой» культуры _оценки и других _роста целей. Необходимую _состав консистенцию _этого среде _агары придают _затем добавлением _отовят различных _вода уплотнителей -_колбах агар-агар _naсi или _агар желатину.

 

Агар-агар (малайское _средой желе)- растительный _состав коллоид, _хемо- получаемый _среды из некоторых _среды морских _группы водорослей. В _водой его _дней состав _среде входят _средах главным _целей образом _среде полисахариды _отовят с ничтожным _среде количеством _план азотистых _роста веществ. Для _кроме получения _когда плотных _ионов сред _джесси его _список добавляют _своему в количестве 1,5-2%,полужидких –0,3-0,7%.

 

Желатина – кислый азотистосодержащийпродукт, _кислый добываемый _своему при _целей выварке _среде костей _сдвиге и хрящей. Обычно _рост в питательные _средах среды _среду вносят 10-20% желатины. Но _отовят ряд _вода бактерий _среды выделяют _кроме протеолитические _паром ферменты, _хорошо разлагающие _среды желатину, _обмена что _дист делает _список его _список неудобным _другие для _паром применения.

 

По _средой целевому _naci назначению _первая различают:

A. Общеупотребительные (основные) среды.

 

Их _среды применяют _целей для _агар культивирования _виде относительно _состав неприхотливых _рост микроорганизмов.

 

Мясная _книга вода: _бульон Получение – мясной _натрия фарш _среду заливают _рост водопроводной _отовят водой 1:2, _водой кипятят 1ч., _среде затем _дней фильтруют, _отовят доливают _бывают водой _сред до первоначального _агар объема, _паром разливают _целей по емкостям, _состав плотно _через закрывают _среды и стерилизуют автоклавированиемпри 120О _роста С 20 мин.

 

Перевар Хоттингераготовят _роста из мясных _агар отходов _состав путем _наук их триптическогогидролиза. Жир, _книга фасции, _ионов сухожилия _сред нарезают, _волос заливают _другой кипящей _ионов водой 1:2, _обычно кипятят, _фильтр охлаждают _среды до 45О _дист С, добавляют _хорошо панкреатин, _группы подщелачивают _вода раствором _вода карбоната _среде натрия, _вода встряхивают, _кормов добавляют _рост хлороформ, _среды закрывают _другие и выдерживают _средах в теплом _могут месте 10 дней.

 

Мясо-пептонныйбульон (МПБ). Для _также приготовления _фильтр используют _другой мясной _могут бульон. К 1 л _других мясного _могут бульона _сдвиге добавляют 5-10 г _агара пептона (первый _виде продукт _среду гидролиза _среды белка _паром с высокой _натрия молекулярной _могут массой) для _агар повышения _натрия калорийности _среде среды _среды и 5 г NaCIдля _агар создания _чапека осмотической _рост активности. Затем _среда устанавливают _состав нейтральную _энда или _сред слабощелочную _этого реакцию _бульон среды. Кипятят. Фильтруют _среду через _книга бумажный _курс фильтр, _оценки разливают _среде по колбам, _водой пробиркам _обмена и стерилизуют автоклавированием при 1200 С 20 мин.

 

Мясо–пептонный_фгбоу агар(МПА): _рост к 1 л МПБ _среды добавляют 15-20 г _бульон мелко _затем нарезанного _вода агар-агара. Среду _групп нагревают _группы до растворения агара, _ионов устанавливают _дней слабощелочную _список реакцию _кормов среды 20%-ным _среды раствором _курс Na2 CO3 , _дней фильтруют _водой и через _затем воронки _роста разливают _naсi в пробирки, _своему стерилизуют автоклавированием при1200 20 мин.

 

Мясо-пептоннаяжелатина (МПЖ). К 1 литру _среды МПБ _вода добавляют _среде желатин _путем до конечной _среды концентрации 10-20%, _среде нагревают, _среды устанавливают слабо-щелочную_путем pH, _naсi кипятят, _жидкие фильтруют, _сред разливают _бульон по пробиркам _многие и стерилизуют _также в кипятильнике _среде Коха _смеси текучим _среду паром 3 дня _крови или _среды однократно автоклавированием при 1200 С при 1 атм. течение 20 мин.

 

Полужидкий мясо-пептонный_энда агар(ПЖА) готовят, _колбах как _состав МПА, _агар но добавляют 0,25% агара, _кислый кипятят _агар до его _видов расплавления, _сред устанавливают требуемую_путем pH, _водой фильтруют _виде в горячем _сред виде _волос и стерилизуют автоклавированием.

 

Бульон Хоттингера :основной _среды перевар Хоттингераразводят _других водой 1:5 (1:8), _ряда добавляют 0,5% NaСI, 0,1 г гидрофосфатакалия, _дист устанавливают pH, _белков кипятят 150-20 мин, _также фильтруют, _крови разливают _того по емкостям _вода и стерилизуют автоклавированием при 1200 20 мин.

 

Агар_среды Хоттингераготовят, _могут добавляя _среде к бульону Хоттингера 2% агар-агара.

 

Питательный _дист бульон _делает содержит: триптический_сдвиге гидролизат кильки –10,05, NaCI- 4,95. 15 г _наук порошка _чапека этого _среды бульона растворяют а 1 л дист. Воды, _агары кипятят 2 мин, _хемо- фильтруют, _список разливают _своему по емкостям _naсi и стерилизуют _состав а автоклаве _роста при 1200 С 20 мин (Ph 7,3).

 

Питательный агарсодержит: _рост ферментативный гидролизаткормовых _виды дрожжей – 12 г, агар- 12,5 г; NaCI–5,5 г. Навеску 36 г _рост полученного _naci порошка _гисса растворяют _оценки в 1 л дист. Н2 О, _оценки кипятят 3 мин, _курс фильтруют, _водой стерилизуют автоклавированием при1200 С 20 мин (pН 7,3).

B. Обогащенные _дней среды.

 

Многие _целей виды _бульон болезнетворных _агар бактерий _фгбоу плохо _среды растут _фгбоу на обще-употребительныхсредах, _гисса поэтому _кислый в основные _дней среды _среды добавляют _могут кровь, _среду сыворотку _путем крови, _хемо- углеводы _состав и т.д. Такие _дист среды _среде получили _средах название _среды обогащенных .

 

Сывороточныйи _средах кровяной агары: _дней к расплавленному _колбах и охлажденному _кислый стерильному _других питательному агару добавляют дефибринированнойкрови _чапека или _агары сыворотки _naсi крови (лошади, _паром КРС, _петри кролика). Компоненты _состав перемешивают, _среде разливают _среду в чашки _среды Петри, _фильтр пробирки _делает и оставляют _массой до застывания.

 

Сывороточный _молока и кровяной _рыба бульоны _среды готовят _хемо- аналогично.

 

Растворы _роста углеводов _бывают стерилизуют _петри текучим _фгбоу паром _кроме или _список фильтрованием _кроме и добавляют _книга в количестве 0,5- 1% к _агар пит._среды среде.

C. Специальные _среде среды.

 

Среды, _хемо- разработанные _среды с учетом _фильтр специфических _фгбоу ростовых _целей потребностей _среде ряда _рост бактерий.

 

Среда _кроме Мак-Коя :куриные _курс яйца _натрия обрабатывают _другой спиртом, _сред проводят _вода через _хемо- пламя _дней горелки. Стерильно _вода вскрывают, _среды желтки _вода отделяют _энда от белков. К 60 частям _обмена желтков _первая добавляют 40 ч _средах физиологического _колбах раствора. Компоненты _сред перемешивают _средах и разливают _naсi в пробирки _кислый и помещают _виды в наклонном _волос положении _массой в аппарат _агар для _курс свертывания _состав сыворотки. Стерилизуют.

 

Среда Терскихсостоит _обычно из фосфатной _рост смеси Зеренсенаи _список кроличьей _через сыворотки.

 

Смесь Зеренсена: _затем раствор А: гидрофосфатнатрия, _целей вода дист.; _когда раствор _натрия Б: дигидрофосфаткалия, _роста вода дист. К 90 мл _список раствора Адобавляют 10 мл _петри раствора _видов Б и доводят _naсi объем _среды до 1000 мл, _дней разливают _среды по пробиркам, _среды стерилизуют, _колбах а затем _молока добавляют 6-8 капель _вода стерильной _среды инактивированной _билай сыворотки _среды кролика.

D. Элективные (избирательные) среды

 

Предназначены _крови для _других культивирования _обычно определенных _смеси групп _цель микроорганизмов, _обмена обеспечивающие _среды преимущественное _naсi развитие _кормов одного _среды вида _целей или _обмена группы _курс родственных _агар микроорганизмов _наук и менее _дней пригодные _дней или _агар совсем _среду не пригодные _среду для _среды развития _naсi других.Их _кормов применяют _другие главным _крови образом _массой для _отовят выделения _петри микроорганизмов _молока из мест _обмена их естественного _того обитания _водой и получения _агар накопительных _дней культур. Элективные _путем среды _первая чрезвычайно _хемо- разнообразны _naсi по своему _дист составу. По _также консистенции _кормов среды _делает данного _среды типа _петри могут _могут быть _вода плотными _билай и жидкими. Жидкие _жидкие среды _среды называются _группы средами _среде обогащения _колбах или _среды накопления, _также их применяют, _роста когда _другие ставят _энда цель _жидкие увеличить _рост количество _обмена искомого _билай микроорганизма _крови смешанной _состав популяции. Среды _крови стерилизуют автоклавированиемтекучим _дней паром _среды или _среды в автоклаве _рост под _делает давлением _многие при 1 атм 12-30 мин.

 

Молочно-солевой_целей агарпредназначен _дней для _средах избирательного _среды культивирования _первая стафилококков.

 

Среда _агар Шустовой _naci предназначена _хорошо для _билай выделения _средах сальмонелл

 

Среды Раппопортаи _виды Мюллера _оценки предназначены _отовят для _крови культивирования _водой сальмонелл.

 

Среда _колбах Кауфмана – это _входят среда _вода обогащения _агар для _состав сальмонелл

 

Казеиново - угольный_роста агар(КУА) с _своему пенициллином _массой используют _состав для _среды культивирования бордетелл.

 

E. Дифференциально- диагностические _среды среды.

 

Предназначены _среде для _роста выявления _других ферментов _целей у микроорганизмов. В состав этих сред входит основная питательная среда, обеспечивающая рост изучаемого микроорганизма, субстрат для обнаружения фермента и индикатор, по изменению цвета которого судят о сдвиге pH среды в результате расщепления субстрата.

 

Среды Гисса используют для изучения ферментативных свойств выделенных культур микроорганизмов. К 100мл дист. Воды добавляют 1% пептона, 0,5 г NaCI. Компоненты растворяют, фильтруют, устанавливают pH,добавляют один из углеводов субстратов, агар-агар, а затем индикатора Андрэдэ. Готовую среду разливают по 3мл в пробирки, стерилизуют текучим паром 3 дня по 30 мин.

 

Среда Энда содержит лактозу в качестве субстрата и предназначена для дифференцировки бактерий, различающихся по способности расщеплять глюкозу.

 

Среда Левина , по целевому назначению аналогична среде Эндо, но содержит другой индикатор.

 

Агар Плоскирева предназначен для выделения сальмонелл, содержит лактозу в качестве субстрата и компоненты, подавляющие рост сопутствующей микрофлоры.