Глава 3.Анализ раствора для внутримышечного и внутривенного введения препарата «Дибазол»

Наш препарат «Дибазол» в виде раствора для инъекций, фирма производитель ОАО «Дальхимфарм» 1% 1 мл 10 ампул. Исследуем препарат и определим его подлинность.

Из всех возможных аналитических реакций, описанных нами в предыдущей главе для установления подлинности препарата «Дибазол» в виде раствора для инъекций, мы выбирали наиболее селективные и чувствительные, имеющие яркие аналитические эффекты, но в тоже время и лёгкие в исполнении, не требующих сложного оборудования.

Для начала проверяем упаковку, маркировку, срок годности препарата. Перед нами препарат «Дибазол» в виде раствора для инъекций 10 ампул по 1 мл 1% раствора действующего вещества в картонной упаковке. В каждую пачку вложена инструкция по применению и нож ампульный. Фирма производитель ОАО «Дальхимфарм». Данная фирма производит препарат под своим торговым названием как дженерик. Открытое акционерное общество «Дальхимфарм» - один из крупных российских производителей готовых лекарственных средств расположенный в Дальневосточном Федеральном округе. Начало его работы положено в феврале 1939 года, когда Хабаровский химико-фармацевтический завод был единственным на Дальнем Востоке и Восточной Сибири. В настоящее время ОАО «Дальхимфарм», с филиалом в г. Москве, – современное фармацевтическое предприятие на котором трудится 1100 человек и которое входит в ТОП-20 российских производителей по товарообороту и в ТОП-5 по производству инъекционных растворов. Производственные мощности предприятия позволяют выпускать более 150 наименований лекарственных препаратов самого различного фармакотерапевтического действия. Это стерильные лекарственные средства большой и малой дозировки и нестерильные лекарственные средства. В ассортиментном перечне продукции более 80% составляют препараты госпитальной медицины, а 56% от общего выпуска входят в перечень ЖВНЛС. В соответствии с Программой развития фармацевтической и медицинской промышленности до 2020г., разработанной Минпромторгом России, на предприятии планомерно ведется работа по повышению квалификационного уровня сотрудников и техническому перевооружению производства, продолжается так же активная работа по расширению и обновлению перечня выпускаемой продукции по программе импортозамещения. Следовательно производитель не вызывает сомнений в качестве препарата. Поэтому в анализе в первую очередь попробуем определить является ли наш препарат оригинальным или фальсифицированным. Согласно инструкции по применению, каждая ампула содержит 10мг действующего вещества бендазол (2-(Фенилметил)-1H-бензимидазол)) в 1 мл раствора. Вспомогательные вещества: этанол (спирт этиловый) 95%, глицерол (глицерин); 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, вода для инъекций.

Проводим качественный анализ препарата. Для этого вынимаем ампулу из ячеечной упаковки. Встряхиваем ампулу, чтобы лекарство опустилось вниз, и надпиливаем в месте перехода от узкой части к широкой пилочкой для ампул ампулу по окружности. Ваткой, смоченной спиртом, протрём ампулу и отломим кончик в направлении от себя. Опустим иглу со шприцем на 5мл в ампулу, потянем поршень на себя и наберем лекарство, которое мы перельём в бюкс на 10мл с притёртой пробкой. Перед нами прозрачная бесцветная жидкость со специфическим запахом. Из бюкса выбираем шприцом 1мл препарата и переносим в пробирку. В которую добавляем 3мл воды и 3 капли разведённой соляной кислоты, 2-3 капли 0,1 н. раствора йода и взбалтываем. Образуется красно-серебристый осадок полийодида состава:

Не забываем что температура проведения реакции не выше 25°.

Для того что бы у нас не вышло ошибки с результатом проводим другую качественную реакцию на другую функциональную группу. Из бюкса выбираем шприцом следующие 1мл препарата и переносим в пробирку, к которой прибавляем 3 капли 3% спиртового раствора нитрата кобальта. Образуется голубое окрашивание.

Данная реакция говорит о том, что у нас в действующем веществе присутствует бендазол (2-(Фенилметил)-1H-бензимидазол).

Далее проверяем на вспомогательные вещества.

Выбираем шприцом следующие 1мл препарата и переносим в пробирку. Получим гидроксид меди (II), путем сливания растворов гидроксида натрия и сульфата меди (II). Прильем полученный осадок в нашу пробирку. Осадок гидроксида меди растворяется и образуется темно-синий раствор глицерата меди (II). У нас присутствует глицерин.

Выбираем шприцом следующие 1мл препарата и переносим в пробирку, куда добавляем три, четыре капли уксусного ангидрида и две три капли концентрированной серной кислоты. Слегка нагреваем. Чувствуем характерный фруктовый запах этилацетата. В последний 1мл раствора препарата перенесённого в пробирку добавляем 0.1М раствора нитрата серебра. Наблюдаем белый творожистый осадок хлорида серебра.

То есть мы можем сделать вывод, что проведя качественный анализ препарата перед нами препарат «Дибазол».

Переходим к количественному определению действующего вещества.

Не будем прибегать к сложному оборудованию физических методов анализа. Проведём простой метод прямой алкалиметрии. Возьмём из упаковки следующую ампулу, встряхиваем, чтобы лекарство опустилось вниз, и надпиливаем в месте перехода от узкой части к широкой пилочкой для ампул ампулу по окружности. Ваткой, смоченной спиртом, протрём ампулу и отломим кончик в направлении от себя. Опустим иглу со шприцем на 5мл в ампулу, потянем поршень на себя и наберем лекарство, которое мы перельём в коническую колбу на 50мл. Далее прибавляем 2 капли раствора фенолфталеина 5 мл спирто-хлороформной смеси (1:1), нейтрализованной по фенолфталеину. Затем титруем 0,1 н. раствором едкого натра при взбалтывании до слабо- розового окрашивания водного слоя (устойчивого в течении 30 секунд).

Действующего вещества ампуле на 5мл 1% р.р 0,05г

В 1мл содержится 0,01г. В п.2.7 305 приказа смотрим отклонения ±20.

0,01-100

х-20

х=±0,002

Следовательно наши пределы [0,008-0,012]

На титрование пошло 2,1 мл гидроксида натрия = V_{рабочего раствора}.

Рассчитываем массу

m = T_{рабочего раствора/определяемому веществу} * V_{рабочего раствора} = 0,024473*2,1 = 0,0513933г

T_{рабочего раствора/определяемому веществу} = (N_{рабочего раствора} *M_{эквивалентную определяемого вещества})/1000 = (0,1*244,73)/1000 = 0,024473г/мл

1 мл 0,1 н. раствора едкого натра соответствует 0,02447 г дибазола.

Мы израсходовали чуть больше 2.1мл 0,1 н. раствора едкого натра.

0.02447 * 2.1 = 0.05016 г.( Содержание дибазола в ампуле)

0.05016/5=0.010032г

что соответствует норме в допустимом отклонении [0,008-0,012]

Для определения других параметров нашего препарате, берём третью ампулу препарата вскрываем определяем номинальный объём. Объём раствора, выбранного из сосуда шприцом после вытеснения воздуха и заполнения иглы не должен быть меньше номинального. У нас он соответствует 1мл. Далее определяем прозрачность. Испытание проводим в пробирках с притёртой пробкой из прозрачного бесцветного стекла диаметром 15мм. Для сравнения в одну пробирку наливаем 1мл воды во вторую 1мл нашего препарата из шприца. Испытание проводим при освещении электрической лампой матового стекла мощностью 40Вт, расположенной над образцами просматривая раствор перпендикулярно оси пробирок на чёрном фоне через 5 минут после приготовления. Испытуемую жидкость считают прозрачной, если она по прозрачности не отличается от воды. Наш раствор прозрачен.

Далее сравниваем окраску обоих пробирок в дневном отражённом свете сверху вдоль вертикальной оси пробирок на матово-белом фоне. Испытуемую жидкость считаем бесцветной, если её окраска не отличалась от воды. Наш испытуемый раствор бесцветен.

Определяем механические включения в препарате. Пробирку с препаратом исследуем невооружённым глазом на чёрном и белом фоне при освещении лампой дневного света мощностью 60 Вт. При этом в растворе для инъекций механических примесей мы не обнаружили.

Определение pH испытуемого раствора проводим потенциометрически на приборе иономера ЭВ-74. Прежде чем определять значение рН, необходимо установить температуру исследуемого раствора. С этой целью нажимаем клавишу «t» и ручкой «Температура раствора» по шкале № 1 устанавливаем стрелку прибора на значении, соответствующем температуре раствора. Для измерения рН нажимаем клавишу «рХ» и проводим предварительную калибровку стеклянного электрода по буферным растворам с точно известными значениями рН. (Буферные растворы готовятся из фиксаналов, прилагаемых к прибору). Вливаем исследуемый раствор в стакан, опускаем в него электроды и измеряем приблизительное значение рН. Для точного определения значения рН нажимаем клавишу того узкого диапазона измерений, в который входит приблизительное значение рН, и снимаем показание по шкале № 2 или № 3. При этом учитываем, что для диапазона -1-4 (шкала № 2) показание стрелки уже соответствует значению рН. Наше значение pH=2,8, что соответствует норме.

Следовательно, мы можем сделать вывод, что наш препарат подлинный. И перед нами препарат «Дибазол» ОАО «Дальхимфарм» в виде раствора для инъекций. Качественные реакции с раствора йода и нитратом кобальта дают основания нам утверждать что наш препарат содержит действующее вещество бендазол (2-(Фенилметил)-1H-бензимидазол). Качественные реакции с гидроксидом меди, уксусным ангидридом и нитратом серебра, позволяют нам сделать вывод о содержании всех вспомогательных веществ заявленных в аннотации к лекарственному препарату. Количественное определение методом прямой алкалиметрии. Позволил нам сделать вывод, что у нас каждая ампула содержит по 1мл 1% раствора действующего вещества бендазола (2-(Фенилметил)-1H-бензимидазола), что так же соответствует количеству заявленному в аннотации к лекарственному препарату.

Мы могли бы прибегнуть к более точным физическим методом анализа например, ВЭЖХ или фотометрическому методу. Но данные методы требуют сложного оборудования и дорогих реактивов. Наши же методы позволят проводить анализ быстро, не требует сложного оборудования, аналитические эффекты фиксируются визуально. Проводить их можно в любой химической лаборатории оснащённой минимальным набором реактивов и химической посуды.

Заключение

В работе были рассмотрены история получения, строение, химические, физические свойства, а так же биологические функции препарата Дибазол. В соответствии с этим можно сделать следующие выводы:

1) С ростом числа людей страдающих гипертонической болезнью, значительно вырос спрос на медицинский препарат, снижающий артериальное давление. Самым эффективным на то время считался папаверин, который производился в ограниченном количестве и был достаточно дорогим. Все эти обстоятельства, заставили ученных химиков, приступить к поискам синтетического аналога. В результате исследований, был получен препарат Дибазол, который успешно прошел широкомасштабные исследования и клинические испытания.

2) Изучив строение дибазола можно сказать что: дибазол является производным иминдазола с бензойным радикалом. Наличие бензойного радикала обуславливает все свойства ароматического соединения с реакциями электрофильного замещения. Дибазол это гигроскопичный белый порошок, трудно растворим в воде, легко в спирте.

3) Ознакомившись с биологической ролью дибазола можно с уверенностью констатировать что: дибазол обладает сосудорасширяющим действием, стимулирует функцию спинного мозга. Вызывает расширение мозговых сосудов, поэтому показан при формах артериальной гипертензии.

4) Рассмотрев разные методы качественного и количественного анализа, можно сделать следующие выводы:

· из качественных методов наиболее практичная, дающая хороший аналитический эффект, эта реакция образования красно-серебристого осадка полийодида. Так же внимания заслуживают реакции дающие хорошие аналитические эффекты, реакция с нитратом кобальта, реакция окисления ванадатом аммония и другие рассмотренные в данной работе.

· из количественного определения наиболее чувствительный метод, дающий наиболее точное определение содержание дибазола в препарате даёт метод ВЭЖХ(Высокоэффективная жидкостная хроматография) другие рассмотренные методы можно применить, если по каким либо причинам нельзя провести метод ВЭЖХ.

5) При исследовании препарата «Дибазол» ОАО «Дальхимфарм» в виде раствора для инъекций мы можем сделать вывод, что наш препарат подлинный. И перед нами препарат «Дибазол» ОАО «Дальхимфарм» в виде раствора для инъекций. Качественные реакции с растворами йода и нитрата кобальта дают основания нам утверждать что наш препарат содержит действующее вещество бендазол (2-(Фенилметил)-1H-бензимидазол). Качественные реакции с гидроксидом меди, уксусным ангидридом и нитратом серебра, позволяют нам сделать вывод о содержании всех вспомогательных веществ заявленных в аннотации к лекарственному препарату. Количественное определение методом прямой алкалиметрии, позволило нам сделать вывод, что у нас каждая ампула содержит по 1мл 1% раствора действующего вещества бендазола (2-(Фенилметил)-1H-бензимидазола), что так же соответствует количеству заявленному в аннотации к лекарственному препарату.

Глоссарий

№ п/п	Понятие	Содержание
	Алкалиметрия	это метод аналитического характера, с помощью которого определяется количество свободных кислот или солей в щелочных соединениях.
	ВЭЖХ	это метод колоночной хроматографии, в котором подвижной фазой служит жидкость, движущаяся через хроматографическую колонку, заполненную неподвижной фазой (сорбентом).
	Дефлегматор	приспособление для разделения жидкостей при фракционной перегонке
	Дженерик	лекарственное средство, продающееся под международным непатентованным названием либо под патентованным названием, отличающимся от фирменного названия разработчика препарата
	Кожухотрубчатый теплообменник	устройство, в котором осуществляется теплообмен между двумя теплоносителями, имеющими различные температуры
	ОАО «Дальхимфарм»	Открытое акционерное общество «Дальхимфарм» — один из крупных российских производителей готовых лекарственных средств расположенный в Дальневосточном Федеральном округе.
	Полимерный сорбент ProntoSIL-120-5-C18 AQ	Не подвижная фаза при хроматографии.
	Раствора для инъекций	это жидкая лекарственная форма для парентерального введения
	ТОП	верхние строчки рейтинга
	Фальсифицированное лекарственное средство	лекарственное средство, не соответствующее требованиям фармакопейной статьи либо в случае ее отсутствия требованиям нормативной документации или нормативного документа.
	Элюент	Подвижная фаза в хроматографии

Список литературы

1. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия. В 2 частях. Часть 1. Общая фармацевтическая химия: Учеб. для фармацевтических институтов и факультетов мед. институтов. — М.: Высшая школа, 1993. - 432 с.

2. Викторов, М.М. Методы вычисления физико-химических величин и прикладные расчеты. - Л.: Химия, 1977. - 359 с.

3. Глущенко, Н. Н. Фармацевтическая химия: Учебник для студентов средних профессиональных учебных заведений / Н. Н. Глущенко, Т. В. Плетенева, В. А. Попков; Под ред. Т. В. Плетеневой. — М.: Издательский центр "Академия", 2004. — 384 с.

4. Гетероциклические соединения т. V / Пер. с английского В.С. Володиной, М.Я. Карпейского, Р.М. Хомутова; под ред. Н.К.Кочеткова. - М.: Издательство иностранной литературы, 1961. - 602 с.

5. Жебентяев А.И., Арзамасцев А.П. Фотометрия азотсодержащих лекарственных веществ с применением кислотных красителей (обзор литературы). //Фармация. - 1993. - №4. - С. 63-67.

6. Иноземцев П.О. Cпектрофотометрический анализ дибазола и его лекарственных форм. // - Иркутск; 2009. - С. 85.

7.Илларионова Е.А., Сыроватский И.П., Иноземцев П.О. Спектрофотометрическое определение бендазола. // Сибирский медицинский журнал. - 2009. -№ 8.- С. 42-44.

8. Иоффе, И.Л. Проектирование процессов и аппаратов химической технологии: Учебник для техникумов. - Л.: Химия, 1991. - 352 с.

9.Логинова, Н. В., Полозов Г. И. Введение в фармацевтическую химию: Учебное пособие – Мн.: БГУ, 2003.-250 с.

10. Майофис, Л.С. Технология химико-фармацевтических препаратов. - Л.: Государственное издательство медицинской литературы, 1958. - 538 с.

11. Машковский, М.Д. Лекарственные средства. В двух частях. Ч. 1 - 12-е издание - М.: Медицина, 1998. - 736 с.

12. Павлов, К.Ф. Примеры и задачи по курсу процессов и аппаратов химической технологии: учебное пособие для вузов / К.Ф. Павлов, П.Г. Романков, А.А. Носков; под ред. П.Г Романкова. - 11-е изд. - М.: ООО «РусМедиаКонсалт», 2004. - 576 с.

13. Рамш, С.М. История создания отечественного лекарственного препарата «Дибазол»/ Историко-биологические исследования. - 2011. - С. 36-59с.

14. Растатурин, В.А. Материальные балансы производств основного органического синтеза: текст лекций. - Л.: ЛТИ им. Ленсовета, 1986. - 56 с.

15. Рубцов, М.В. Синтетические химико-фармацевтические препараты: справочник / М.В. Рубцов, А.Г. Байчиков. - М.: Медицина, 1971. - 328 с.

16. Фармацевтическая химия: Учеб. пособие / Под ред. Л.П.Арзамасцева. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. - 640 с.

17. Фармацевтический анализ лекарственных средств / Под общей редакцией В.А.Шаповаловой – Харьков: ИМП "Рубикон", 1995 -123с.

18. Рамш, С.М. ДИБАЗОЛ: ВЧЕРА, СЕГОДНЯ, ЗАВТРА [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://science.spb.ru/files/IzvetiyaTI/2011/11/Articles/07/files/assets/downloads/publication.pdf. – Загл. с экрана. (20.04.15).

19. Аносов Н.Н., Розин М.А. Прозерин, эзерин, дибазол и их применение в невропатологии. Л.: Мед-гиз, Ленинградское отделение, 1956. 196 с.

20. Рамш, С.М. История создания отечественного лекарственного препарата «Дибазол» [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://cyberleninka.ru/article/n/istoriya-sozdaniya-otechestvennogo-lekarstvennogo-preparata-dibazol. – Загл. с экрана. (20.04.15).

21. Лазарев Н.В., Розин М.А., Порай-Кошиц Б.А.,Эфрос Л.С., Гинзбург О.Ф. Психостимулирующее средство дибазол: а.с. 527192. СССР: № 421468; заявл. О 24.11.1949. опубл. 05.09.1976. Бюл. № 33, 1976. С. 16.

22. Поповский М.А. Панацея – дочь Эскулапа. Рассказы о людях и лекарствах. М.: Детская литература, 1973. 272 с.

23. Николай Васильевич Лазарев: Очерки жизни и деятельности / Отв. ред. (сост.) Брехман И.И., Гадаскина И.Д.. Владивосток: Дальнаука, 1993. 232 с.

24. Аничков, С.В., Порай-Кошиц Б.А., Эфрос Л.С., Гинзбург О.Ф. Спазмолитическое средство ≪дибазол≫: а.с. № 528095 СССР; № 421469; заявл. 25.11.1949. опубл. 15.09.1976. Бюл. № 34, 1976. С. 14-15.

25. Аничков, С.В. Избирательное действие медиаторных средств. Л.:Медицина, ЛО, 1974. 295 с.

26.Харкевич Д. А. Фармакология: Учебник. 9-е изд., перераб., доп. и испр.

М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. 736 с.

27.Хрусталев Ю. М. Философия науки и медицины. М.: ГЭОТАР-Медиа,

2009. 245 с.

28. Рудакова И. П., Ильина И. Г., Скачилова С. Я., Мелентьева Т. А., Миха- 

лев О. В., Самылина И. А. // Фармация. 2009. № 8. С. 42.

29. Емшанова С. В., Садчикова Н. П.,  Зуев А. П.// Хим.-фарм. журн. 2007.

Т. 41. № 1. С. 41.

30.Guideline on the limits of genotoxic impurities. EMEA/CHMP/

QWP/251344/2006. London, 2007. [Электронный ресурс] (http://www.

ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Scientiըc_guideline/2009/09/

WC500002903.pdf).

31. Эпштейн Н. Б. // Хим.-фарм. журн. 2004. Т. 38. № 4. С. 40.