Иммунологические методы

Ограничения культуральных и микроскопических методов для выявления T.vaginalis заставили учёных развивать альтернативные методы, которые могут определять антиген, антитело или нуклеиновые кислоты в уретральном или вагинальном экссудате. Иммунологические методы не получили должного распространения из-за отсутствия качественных отечественных тест-систем. Кроме этого, все методы серологической диагностики T . vaginalis  мало информативны, т. к данный антиген не вызывает 100%-го иммунного ответа. Хотя для подтверждения диагноза ими можно воспользоваться. Используются различные методы определения антител: агглютинация, непрямая гемаглютинация, диффузия в геле, флюоресценция антител и иммуноферментный анализ, метод иммуноблотинга. Определённое диагностичическое значение имеет прямое определение специфических белков T . vaginalis в биопробах с использованием моноклональных антител в качестве быстрого метода диагностики трихомоноза. Прямой иммуноферментный и иммунофлюоресцентный анализ мазков вагинального соскоба (тест-система фирмы California Integrated Diagnostics, Benicia, Calif.), использующий перокидазо - и флюорохром - меченые смеси моноклональных антител к различным структурам T.vaginalis был таким же чувствительным и специфичным, как и используемый культуральный метод. К тому же результаты определения возбудителя трихомоноза получают в течение одного часа, что позволяет произвести экспресс-скрининг [10,17,35,41,42].

1.4.4 Методы генной диагностики T .vaginali s

С начала 90-х годов в лабораторную клиническую практику стали, внедрятся технологии определения видоспецифических нуклеотидных последовательностей областей ДНК (мишеней) бактерий и клеток высших организмов. Сначала это была ДНК-гибридизационная технология. В тест-системе Affirm VP используются синтетические зонды для выявления как Gardnerella vaginalis, так и T.vaginalis из одного вагинального соскоба. Данная методика лучше, чем метод влажной камеры. Тем не менее, встречались ложноотрицательные результаты при её сравнении с культуральным методом (80% чувствительности относительно положительных образцов в культуре). Одна из гибридизационных методик - “дот-блот” гибридизация, в которой использовался фрагмент 2,3 ДНК T.vaginalis в качестве зонда, могла определить ДНК T.vaginalis в вагинальном секрете. Однако нестабильность зонда, выполнение специфических технических приёмов, особенно использование радиоактивной метки, являлись большими недостатками этой методики. После того как радиоактивно меченный зонд заменили на флюоресцентно-меченный ДНК-зонд, эта методика сразу нашла своё применение при выявлении бессимптомного носительства T. vaginalis. Новая генодиагностическая технология - ПЦР, в последнее время опережает остальные методы генодиагностики трихомоноза и наравне с культуральным методом широко используется в клинической практике.  Риу в 1999 г. предложили ПЦР методику идентификации ДНК влагалищной трихомонады с праймерами для амплификации повторяющегося фрагмента TV-E650. Сравнив свой метод с другими используемыми методиками диагностики: микроскопией нативного мазка, культуральным, а также с клиническими данными. Он считает, что предложенный метод ПЦР на 100% чувствителен и специфичен, т.к. не давал перекрёстной реакции с другими простейшими и Candida albicans. Использованная им методика ПЦР в два раза чаще выявляла трихомонаду, чем другие лабораторные методики. Японские учённые так же сумели подтвердить правомерность постановки диагноза “трихомониаз” в 19-ти случаях у женщин и в одном случае у мужчины методом ПЦР[43,44,45,46,48].

Лечение трихомоноза

Препарат выбора - метронидазол, или его аналог. Препарат назначают внутрь, внутривенно или внутривагинально. Эффективность химиотерапии достигает 80-95%. В последнее время чаще рекомендуется применять комплексную терапию, с использованием новейших препаратов, к примеру, таких, как Наксоджин. Кроме этого советуют проводить местную обработку слабыми дезинфекторами и растворами, снимающими воспаление. Причина данной терапии обусловлена адаптационными механизмами трихомонад. В силу чего сегодня редкий врач владеет методикой эффективного лечения этой патологии [1,2,18,25].

2.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Все исследования по теме квалификационной работы проводились на базе Одесского областного кожно-венерологического диспансера, расположенного по адресу: г. Одесса, ул. Воробьева, 5.

В исследовании, которое проходило в период с декабря 2003 года по май 2004 года, принимали участие исключительно мужчины в количестве 150 человек. Пациенты были обследованы на трихомоноз тремя методами: культуральным, микроскопии окрашенного мазка и ПЦР.

Всем обследуемым, за сутки до взятия материала производилась внутримышечная инъекция пирогенала, в дозе – 50 МПД, согласно инструкции приведенной [18]. Вследствие чего на момент анализа у 60% больных отмечались слизистые, слизисто – гнойные выделения.