Санитарно-бактериологическое исследование воздуха

В атмосферном воздухе содержится большое количество микробов – почвенных, сапрофитов, попадающих в воздух вместе с мельчайшими частицами почвы. Среди них находятся спорообразующие палочки, пигментные бактерии, грибы и дрожжи.

В воздухе закрытых помещений обнаруживаются микроорганизмы, постоянно обитающие в больших количествах на слизистых оболочках верхних дыхательных путей человека. Они выделяются в окружающую среду при чиханье, смехе, кашле и разговоре с мельчайшими частицами слюны и носоглоточной слизи.

От больных с локализацией патологического процесса в полости рта и верхних дыхательных путях на ряду с условно патогенными микроорганизмами – стафилококками и зеленящими стрептококками – выделяются в окружающую среду патогенные микробы- гемолитические стрептококки группы А, бактерии дифтерии, коклюша, туберкулеза и др. в зависимости от этиологии заболевания. Микробиологический анализ воздуха на патогенную флору производит только по эпидемическим показаниям.

Для повседневной санитарно-гигиенической оценки воздуха определяют:

1. общее количество микробов, находящихся в 1 м³ воздуха;

2. количество в том же объеме воздуха санитарно-показательных микробов. По концентрации этих микробов определяют степень загрязнения воздушной среды аналогично тому, как по титру кишечной палочки оценивают качество питьевой воды.

Обнаружение в воздухе закрытых помещений данных микробов, обладающих признаками патогенности, является показателем эпидемического неблагополучия данного объекта.

Норматив по оценке бактериальной загрязненности воздуха в настоящее время нет. Критерием для оценки чистого и загрязненного воздуха в жилых, невентилируемых помещениях (табл. 1 и 2) приняты показатели, предложенные А. И. Шафиром [4].

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объекты

Микробиологический анализ проходил в следующих помещениях гимназии: классная комната, коридор, столовая, спортзал (рис. 1). В классной комнате и коридоре материал для проведения исследований был получен в различные периоды учебного дня. Изучение содержания количества микроорганизмов в воздухе проводилось в 3-ной повторности.

Методы исследования

Для определения степени загрязнения воздуха в закрытых помещениях использовалось два вида питательных сред: ГРМ – агар и Агар – Эндо – ГРМ.

Таблица 1. Критерии для оценки загрязненности помещений по числу микроорганизмов в 1м³ воздуха

Таблица 2. Санитарно-микробиологические нормативы воздуха в хирургических отделениях

Питательный сухой агар для культивирования микроорганизмов (ГРМ - агар).

Состав панкреотический гидролизат рыбной муки…24,0

в граммах натрий хлористый…………………………. …..4,0

на 1л воды: агар микробиологический………………..12,0+2,0

Способ приготовления среды:

38,0 г порошка размешать в 1 л дистиллированной воды, кипятить 1-2 минуты до полного расплавления агара, фильтровать через ватно-марлевый фильтр, разлить в стерильные флаконы и стерилизовать автоклавированием при t = 121⁰С в течение 15 минут. Среду охладить до t = 45-50⁰C, разлить в стерильные чашки Петри слоем 4-5 мм. После застывания среды чашки подсушить при t = 37+1⁰C в течение 40-60 минут.

Рисунок 1 – Школьные помещения, в которых проводился анализ. А – классная комната, Б – коридор, В – столовая, Г – спортзал

Питательная сухая среда для выделения энтеробактерий (Агар – Эндо - ГРМ).

Состав панкреотический гидролизат рыбной муки…...12,0

в граммах экстракт пекарных дрожжей……………………..1,0

на 1л воды: натрий хлористый………………………………...3,4

лактоза…………………………………………….10,0

сульфит натрия…………………………………….0,8

натрий фосфорнокислый 2 – замещенный………0,5

фуксин основной………………………………..…0,2

агар…………………………………………...10,0+2,0

Способ приготовления среды:

36,7 г среды размешать в 1 л дистиллированной воды, кипять 2- 3 минуты до полного расплавления агара, профильтровать через ватно-марлевый фильтр, снова довести до кипения, охладить до t = 46-50⁰С и разлить в стерильные чашки Петри слоем 5-6мм. После застывания среды чашки подсушить при t = 37+1⁰C в течение 40-60 минут.

Наиболее старым методом микробиологического анализа воздуха является седиментационный метод (метод оседания Коха). Его используют только при исследовании воздуха закрытых помещений. Для этого чашки Петри с питательной средой при исследовании общей бактериальной загрязненности воздуха оставляют открытыми в местах отбора проб в течение 5-10 минут. По окончании экспозиции чашки закрывают и помещают в термостат при 37⁰С на 24 ч, а затем при комнатной температуре выдерживают еще сутки. О степени загрязненности воздуха судят по количеству выросших колоний. Данный метод пригоден для сравнительных оценок чистоты воздуха [6].

Методика расчета

Учет посева бактерий из воздуха производят путем подсчета выросших колоний бактерий отдельно. Зная площадь чашки Петри, можно определить количество микроорганизмов в 1м³ воздуха. Для этого: 1) определяется площадь питательной среды в чашке Петри по формуле πr ²; 2) вычисляют количество колоний на площади 1 дм² ; 3) пересчитывают количество бактерий на 1м³ воздуха [5].

Примерный расчет. В чашке Петри диаметром в 10 см выросло 25 колоний.

1) определяют площадь питательной среды в чашке Петри по формуле 3,14*5² или 3,14*25 = 78,5 см²

2) вычисляют количество колоний на площади 1 дм, равного 100 см²

25колоний – 78,5 см²

х=25*100/78,5=32 колоний

х колоний – 100 мм²

т. е. на площади 1 дм² имеется 32 колонии.

3) пересчитывают количество бактерий на 1м³ воздуха, который равен 1000л. Содержащиеся 32 колоний бактерий на площади 1 дм² соответствуют объему 10л воздуха. Чтобы узнать количество в 1м³ воздуха, составляют пропорцию:

32 – 10

х=32*1000/10=3200

х – 1000

Следовательно, в 1м³ воздуха содержится 3200 бактериальных телец.