Комплемент по классическому пути, что приводит к лизису

Эритроцитов. Эта сыворотка является составной частью

Гемолитической (индикаторной) системы, применяемой в РСК.

Гемолитическую сыворотку получают путем 3–4-кратной

Иммунизации кроликов взвесью эритроцитов барана с интервалом в

Дня.

Титром гемолитической сыворотки называется то ее

Максимальное разведение, которое в объеме 0,5 мл в присутствии

комплемента вызывает гемолиз 0,5 мл 3 %-ной взвеси эритроцитов

барана в течение часа при 37 °С. Титр должен быть не ниже 1 : 1200 –

1 : 1500.

Комплемент – это совокупность нескольких нормальных

Компонентов свежей сыворотки с различными физико-химическими

Свойствами. Он содержится в большинстве сывороток теплокровных

И холоднокровных животных. Комплементарная функция выражена

Наиболее интенсивно в сыворотке морских свинок, поэтому они и

Служат донорами комплемента в лабораториях.

Основным свойством комплемента является его способность

Вызывать лизис сенсибилизированных соответствующими

Иммунными сыворотками клеток, а также адсорбироваться системами

антиген + антитело.

Комплемент широко применяется для серологической

Диагностики ряда инфекционных заболеваний в реакции связывания

76

Комплемента (сифилис, гонорея, бруцеллез, туляремия, риккетсиозы,

Грипп, клещевой энцефалит и др.).

Учитывая чрезвычайную лабильность некоторых компонентов

Комплемента, для постановки РСК выбирают оптимальную дозу

Комплемента. Для этого производят его титрование в присутствии

Гемолитической системы. Титр комплемента – минимальная его

концентрация, обеспечивающая полный лизис 3 %-ной взвеси

Бараньих эритроцитов в присутствии гемолитической сыворотки.

Рабочая доза комплемента увеличивается по сравнению с титром на

25–30 %. Избыток или недостаток комплемента могут значительно

Исказить результаты РСК.

В настоящее время производят сухой консервированный

Комплемент.

Иммунные антивирусные сыворотки

Иммунные антивирусные сыворотки получают из крови

Гипериммунизированных животных. Они предназначены для

Идентификации и типирования вирусов в реакциях: нейтрализации

Вирусов, торможения гемагглютинации, РСК, преципитации в геле,

Иммуноэлектрофореза, иммунофлюоресценции.

Животных для иммунизации выбирают с учетом свойств

Вирусов. При этом животные должны быть свободны от каких-либо

Патогенных вирусов, так как их присутствие может повлиять на

Результат серологических реакций. Наилучшими продуцентами

Противогриппозных сывороток являются куры, морские свинки,

Хорьки; аденовирусных – кролики; энтеровирусных – кролики,

Морские свинки, обезьяны; противоэнцефалитных – белые мыши.

Антигенами для иммунизации животных могут быть как

Вирусные вакцины, так и свежевыделенные штаммы вирусов.

Антивирусные диагностические сыворотки выпускаются двух

видов:

– поливалентные, позволяющие установить к какой группе

(семейству) относятся идентифицируемые вирусы;

– типоспецифические, содержащие антитела к одному типу вируса.

Выпускаются антивирусные сыворотки в сухом виде и перед

Употреблением растворяются дистиллированной водой соответственно

Высушенному объёму. Сыворотки, разведенные стерильно, можно

Сохранять в замороженном виде несколько месяцев.

77

Выбор серологической реакции для типирования вируса или его

Антигенов производят с учетом биологических свойств вируса.

Диагностические сыворотки,

Содержащие меченые антитела

Серологические реакции с использованием метки позволяют

Быстро получить результаты, как правило, отличаются высокой

Чувствительностью и находят широкое применение для экспресс-

Диагностики вирусных и бактериальных инфекций.

Данные сыворотки широко применяются для постановки

Реакций ИФА (иммуноферментного анализа); РИФ (реакции

Иммунофлюоресценции); РИА (радиоиммунного анализа).

В качестве метки для антител соответственно используются:

Ферменты для ИФА; флюорохромы и металлы лантаноидной

Группы – для РИФ; изотопы – для РИА; ферритин – для

Иммунноэлектронной микроскопии.

Меченые сыворотки выпускаются 2 разновидностей:

– антимикробные меченые сыворотки, содержащие антитела

против определенных видов бактерий, вирусов, риккетсий, хламидий;

– антиглобулиновые меченые сыворотки, содержащие антитела

Против гамма-глобулинов крови человека или животных.

Меченые флюорохромом сыворотки

Для постановки рекции иммунофлюоресценции (РИФ)

РИФ основана на использовании флюоресцеинизотиоцианата –

ФИТЦ или других флюорохромов, химически связанных,

Конъюгированных с АТ. При этом меченые АТ сохраняют

Иммунологическую специфичность и вступают во взаимодействие со

Строго определенными корпускулярными АГ. Комплексы АГ с

Мечеными АТ можно легко определить по интенсивному желто-

Зеленому свечению при изучении препарата в люминесцентном

Микроскопе.

Разновидности РИФ:

– прямой метод Кунса;

– непрямой метод Кунса;

– антикомплементарный метод.

78

В прямом методе Кунса используются флюоресцирующие