Методика определения пероксидазы в картофеле

На срез картофеля капнуть 1-2 капли гидрохинона и 1-2 капли перекиси водорода. Оставить на 2-3 минуты. Наблюдается красно-коричневое окрашивание среза картофеля.

Практическое занятие № 16.

Задание к занятию № 16.

Тема: ЭНЕРГЕТИЧЕСКИЙ ОБМЕН.

Лабораторно-практические работы.

3.1. Определение каталазной активности в интактных эритроцитах по методу Крайнева.

3.2. Качественная реакция на каталазу.

Выходной контроль.

4.1. Тесты.

4.2. Ситуационные задачи.

5. Литература:

5.1. Материалы лекций.

5.2. Николаев А.Я. Биологическая химия.-М.: Высшая школа, 1989. С. 212-223, 228-231.

5.3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1990.С. 213-224.

5.4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 2004. С. 305-316.

5.5. Кушманова О.Д., Ивченко Г.М. Руководство к практическим занятиям по биохимии.- М.: Медицина, 1983, раб. 36.

2. Основные вопросы темы.

Терморегуляторная функция ЦПЭ.

На синтез молекулы АТФ расходуется примерно 40-45% всей энергии электронов, переносимых по ЦПЭ, 25% тратится на работу по переносу веществ через мембрану. Остальная часть энергии рассеивается в виде теплоты и используется на поддержание температуры тела. Дополнительное образование теплоты происходит при разобщении дыхания и фосфорилирования, которое может быть биологически полезным. Оно позволяет генерировать тепло для поддержания температуры у новорожденных, у зимнеспящих животных и у всех млекопитающих в процессе адаптации к холоду. У них существует бурый жир – особая ткань, специализирующаяся на теплопродукции посредством разобщения дыхания и фосфорилирования. Бурый жир содержит много митохондрий. Около 10% всех белков приходится на так называемый разобщающий белок (РБ-1) – термогенин.

Короткие пути окисления.

К коротким путям окисления относятся пути окисления субстратов, в результате которых синтезируется менее 3 молекул АТФ:

- окисления субстратов, коэффициент окислительного фосфорилирования Р/О=2 АТФ (сукцинат, ацил-КоА, глицерол-3-фосфат и др.);

Цианрезистентное дыхание.

При данном пути окисления электроны и протоны от субстратов передаются на ФАД-зависимые дегидрогеназы, ФАД восстанавливается до ФАДН₂, а с ФАДН₂ протоны и электроны транспортируются на 1/2О₂. Это приводит к образованию Н₂О₂. Например, по такому пути окисляется ксантин – промежуточный продукт распада пуриновых нуклеотидов в мочевую кислоту.

Общий путь катаболизма – цикл трикарбоновых кислот (ЦТК).

Цикл Кребса открыт Гансом Кребсом в 1937г. (цикл трикарбоновых кислот), за открытие этого цикла Кребс в 1953г. получил Нобелевскую премию.

В ЦТК включается ацетил-КоА, который образуется в результате окисления жирных кислот, отдельных аминокислот и др. Некоторые метаболиты (глюкоза, глицерин и др.) превращаются в ПВК, из которой образуется ацетил-КоА в процессе окислительного декарбоксилирования:

пируватдегидрогеназный

комплекс

ПВК ацетил-КоА

НАД (РР), ФАД (В2), ТДФ (В1),

HS- КоА (В3), липоевая кислота

Функции ЦТК.

• Интегративная функция (объединяющая обмен белков, жиров и углеводов через образование ацетил-КоА).

• Водородгенерирующая функция – образуется 4 пары протонов Н+.

• Энергетическая функция – образуется 1 молекула АТФ между сукцинил-КоА и сукцинат (субстратное фосфорилирование).

• Анаболическая (пластическая) – метаболиты ЦТК используются для синтеза других веществ:

- ацетил-КоА – в синтезе холестерина и его производных (желчных кислот, стероидных гормонов, провитамина Д₃), высших жирных кислот, кетоновых тел, ацетилхолина и др;

- α-кетоглутаровая кислота – глутаминовая, глутамин, ГАМК, пролин, аргинин;

- сукцинил-КоА – гем;

- СО₂ – глюкоза, высшие жирные кислоты, пуриновые и пиримидиновые нуклеотиды;

- фумаровая кислота – в синтезе мочевины;

- ЩУК – аспарагиновая кислота, аспарагин, глюкоза, метионин, треонин.