Вирус желтой лихорадки

Патогенез. Вирус репродуцируется преимущественно в клетках печени, что приводит к нарушению их функции. Кроме печени, тяжело поражаются почки вследствие их жирового перерождения. Дегенеративные изменения наблюдаются в мышце сердца.

Эпидемиология и профилактика. По эпидемиологическим признакам желтая лихорадка подразделяется на два типа: джунглевая (лесная) и городская (классическая). Первая является эндемической, природно-очаговой инфекцией, которая передается комарами от обезьян. Городской тип передается домашними комарами от больных людей.Желтая лихорадка встречается в странах Африки и Южной Америки, иногда приобретая характер эпидемий. Вспышки зарегистрированы и в других странах.Для специфической профилактики используются живые вакцины. Лица, выезжающие в неблагополучные по желтой лихорадке районы, должны обязательно вакцинироваться.

Вирус денге является причиной лихорадки денге. Это переносимый москитами одиночный положительно-цепочечный РНК-вирус семейства Flaviviridae; род флавивируса. Было обнаружено пять серотипов вируса, каждый из которых может вызывать полный спектр заболеваний. Денге — это вирусная болезнь, передаваемая комарами, которая в последние годы быстро распространяется во всех регионах ВОЗ. Переносчиками вируса денге являются женские особи комаров, в основном вида Aedes aegypti и, в меньшей степени, Ae. albopictus. Этот комар передает также чикунгунью, желтую лихорадку и инфекцию Зика. Денге широко распространена в тропиках, причем местные различия в степени риска зависят во многом от осадков, температуры и стихийной стремительной урбанизации.

Тяжелая денге (известная еще и как геморрагическая лихорадка денге) была впервые распознана в 1950-х гг. во время эпидемий денге в Филиппинах и Таиланде. В настоящее время тяжелая денге поражает большинство азиатских и латиноамериканских стран и является одной из ведущих причин госпитализации и смерти среди детей в этих регионах.

Существует 4 разных, но тесно связанных между собой серотипов вируса, вызывающих денге (DEN-1, DEN-2, DEN-3 и DEN-4). После выздоровления от инфекции, вызванной одним из этих серотипов, возникает пожизненный иммунитет к этому конкретному серотипу. Однако перекрестный иммунитет к другим серотипам после выздоровления бывает лишь частичным и временным. Последующие случаи инфицирования другими серотипами повышают риск развития тяжелой денге.

Семейство Флавивирусы. Возбудитель гепатита С. Структура вириона, культивирование. Резистентность к химическим и физическим факторам. Патогенность для человека, иммунитет, лабораторная диагностика, профилактика

Гепатит С - наиболее тяжелая форма вирусного гепатита, которую называют еще посттрансфузионным гепатитом. Это значит, что заболевали им после переливания крови. Это связано с тем, что тестировать донорскую кровь на вирус гепатита С стали всего несколько лет назад. Достаточно часто происходит заражение через шприцы у наркоманов. Возможен половой путь передачи и от матери — плоду. Наибольшую опасность представляет собой хроническая форма этой болезни, которая нередко переходит в цирроз и рак печени. Хроническое течение развивается примерно у 70–80% больных. Сочетание гепатита С с другими формами вирусного гепатита резко утяжеляет заболевание и грозит летальным исходом.

Морфология. В. имеет суперкапсид. Вирус гепатита С – это РНК-содержащий вирус, представленный одной нитью, которая заключена в капсид. Капсид окружен нуклеокапсидным белком. Это мелкий сферический вирус, диаметр 30-60 нм.Геном очень маленький, содержит 1 ген, в котором зашифрована структура 9 белков. Эти белки участвуют в проникновении вируса в клетку, в создании и сборке вирусных частиц и в переключении на себя некоторых функций клетки. Вирус обладает сложной антигенной структурой. Антигенами являются: 1. Гликопротеины оболочки. 2. Сердцевинный антиген. 3. Неструктурные белки. З, около 1 % населения планеты инфицировано HCV.

Резистентность. Вирус гепатита С при температуре окружающей среды от +4°С до +20°С устойчив до 6 недель. Превышение или уменьшение порогов температуры сказывается на его активности в первую и вторую недели после попадания во внешнюю среду. Были проведены исследования по влиянию этанола и антисептиков на активность вируса. Результаты показали, что уничтожить вирус можно только при строгом соблюдении концентрации растворов. Опыты с вакуумной заморозкой вируса показали, что он сохраняет свою жизнеспособность практически бесконечно. После размораживания вирус с тем же успехом может являться источником заболевания, как и только что выделившийся из организма больного гепатитом С. Гарантия дезактивации и уничтожения вируса достигается обработкой поверхностей и инструментов антисептиками: соляная, борная, фосфорная кислоты; 70% этанол; спирт; хлорамин; перекись водорода.

Культивирование. Вирус гепатита С не культивируется на куриных эмбрионах, не обладает гемолитической и гемагглютинирующей активностью. Экспериментальной моделью является шимпанзе. Трудно адаптируется к культивированию в культуре клеток.

Источником инфекции является только человек. Вирус у больных и носителей обнаруживается в 100 % случаев в крови (2/3 всех посттрансфузионных гепатитов вызывает HCV), в 50 % – в слюне, в 25 % – в сперме, в 5 % – в моче. Это определяет пути заражения.Содержание вируса гепатита C в крови низкое, поэтому его очень трудно обнаружить с помощью микроскопии. Культивирование вируса in vitro разработано плохо, поэтому его изучают в экспериментах на шимпанзе.

Клиническое течение гепатита С легче, чем гепатита В. Вирус С называют «мягким убийцей». Желтуха наблюдается в 25 % случаев; до 70 % случаев заболевания протекают в скрытой форме. Независимо от тяжести течения в 50 – 80 % случаев гепатит С принимает хроническую форму, а у таких больных в 20 % случаев впоследствии развиваются цирроз, карцинома. В опытах на мышах установлено, что вирус гепатита С помимо гепатоцитов может поражать и нервные клетки, вызывая тяжелейшие последствия. Начальные проявления гепатита С могут ограничиться слабостью и снижением аппетита. Через несколько дней картина начинает меняться: пропадает аппетит, появляются боли в правом подреберье, тошнота, рвота, темнеет моча и обесцвечивается кал. Вирус, попав в кровь, разносится по всему организму. В печени он присоединяется к поверхностным структурам гепатоцита и проникает в него. Длительное присутствие вируса в печени приводит к гибели её клеток и к их перерождению в злокачественные (раковые) клетки. Размножение вируса в иммунокомпетентных клетках (в том числе в моноцитах) приводит к нарушению их функции. Врачи фиксируют увеличение печени и реже — селезенки. В крови обнаруживаются характерные для гепатитов изменения: специфические маркеры вирусов, увеличивается билирубин, печеночные пробы увеличиваются в 8–10 раз

Вирус в культуре клеток размножается плохо, поэтому диагностика его затруднена. Это один из немногих вирусов, для которых определение РНК – единственный способ идентификации. Возможно определение РНК вируса с помощью ЦПР в варианте с обратной транскрипцией, методом ИФА антител к вирусу с использованием рекомбинантных белков и синтетических пептидов.

Интерферон, продукция которого при хронических гепатитах нарушена, и индуктор его эндогенного синтеза амиксин – основные патогенетические средства лечения всех вирусных гепатитов.

Профилактика. Чтобы уберечься от заражения гепатитами, необходимо соблюдать несложные правила. Не следует употреблять некипяченую воду, всегда мыть фрукты и овощи, не пренебрегать термической обработкой продуктов. Так можно предотвратить заражение гепатитом А. В целом, необходимо избегать контакта с биологическими жидкостями других людей. Для предохранения от гепатитов В и С - в первую очередь с кровью. В микроскопических количествах кровь может остаться на бритвах, зубных щетках, ножницах для ногтей. Не стоит делить эти предметы с другими людьми. Нельзя делать пирсинг и татуировки нестерильными приборами. Также для профилактики гепатита В применяют рекомбинантные вакцины, полученные на культурах Saccharomyces cerevisiae. Иммунизация показана всем группам риска, включая новорожденных.

Семейство ортомиксовирусы. Вирус гриппа. Структура вириона, культивирование. Резистентность к химическим и физическим факторам. Патогенность для человека, иммунитет, лабораторная диагностика, профилактика. Гемагглютинин и нейраминидаза, их локализация и строение

Семейство Оrthomyxoviridae. К семейству ортомиксовирусов относятся вирусы гриппа родов Influenzavirus А, В, С, имеющие тропизм к эпителию слизистых оболочек дыхательных путей. Вирусы гриппа типа А патогенны для человека и некоторых животных (лошади, свиньи), а также для птиц. Вирусы типа В и С поражают только людей.

Грипп – острое инфекционное заболевание, чаще поражающее слизистые оболочки верхних дыхательных путей и сопровождающееся лихорадкой, головными болями, недомоганием.

Структура вириона. Вирионы имеют сферическую форму, диаметр 80-120 нм, сердцевину и липопротеидную оболочку. Сердцевина содержит геном-линейную, фрагментированную однонитевую (-)РHK, каждый из 8 ее фрагментов кодирует свой вирусный протеин (семь сегментов вирусного генома кодируют структурные белки, восьмой сегмент кодирует неструктурные белки NS₁ и NS₂). Важное значение имеет матриксный белок (М) и нуклеопротеидный (NP). РНК покрыта белковым капсидом, который окружен слоем матриксного белка М, учавствующего в сборке вирионов. Нуклеокапсид имеет спиральный тип симметрии, содержит фермент РНК-полимеразу, фосфопротеин, ассоциированный с РНК (NP). В транскрипции и репликации вируса принимают участие внутренние белки (Р₁, Р₂, Р₃). На поверхности суперкапсида есть шипы – гликопротеины со свойствами гемагглютинина и нейраминидазы. Репликация ортомиксовирусов первично осуществляется в цитоплазме инфицированной клетки. Вирусная РНК синтезируется в ядре клетки хозяина.

Вирус репродуцируется в клетках цилиндрического эпителия дыхательных путей. Благодаря короткому циклу репродукции (6-8 часов) при попадании в дыхательные пути одной вирусной частицы уже через 8 часов появляется 10³, а к концу суток 10²⁷ вирионов. Эти расчеты объясняют инкубационный период заболевания – от 6-12 часов до суток. С места внедрения вируса процесс быстро распространяется на слизистую оболочку глотки, гортани, трахеи, бронхов, при этом эпителий разрушается. Через эрозированную поверхность слизистой оболочки вирус попадает в кровь и повреждает эндотелиальные клетки кровеносных сосудов (капилляров), в результате повышается их проницаемость, что приводит к отеку мозга, легких, поражается вегетативная нервная система. В процесс вовлекаются все отделы воздухоносных путей, вплоть до альвеол, отмечаются кровоизлияния в легких, миокарде, паренхиматозных органах.

Под воздействием вируса гриппа активные формы О₂, которые генерируют нейтрофилы,превращаются в высокотоксичные химические соединения, обладающие мощным цитотоксическим действием на мембраны клеток. Утрата барьерных функций клеточных мембран является условием распространения вируса от клетки к клетке. Разрушается сурфактант, альвеолы деформируются, спадаются, заполняются транссудатом, что способствует развитию пневмонии.

Тяжесть процесса обусловлена вирулентностью вируса, состоянием иммунитета, особенно интенсивностью интерферонообразования, а также состоянием Т-клеточного иммунитета и неспецифической резистентностью организма. Но развитие иммунитета обычно запаздывает (антитела – с 7-8 дня болезни).

Частые бактериальные осложнения обусловлены разрушением эпителия и вируснойсупрессией иммунитета. Вирус попадает в лимфатические узлы, повреждает лимфоциты, может развиваться приобретенный иммунодефицит, который способствует возникновению вторичных бактериальных осложнений. Такой осложненный грипп формируется чаще у людей пожилого возраста, детей, ослабленных больных.

Резистентность. Устойчивость вирусов во внешней среде вне организма человека невелика: при 220С они инактивируются через несколько часов. Плохо переносят повышенную температур: при 650С погибают через 5-10 минут, при 1000С– мгновенно. Чувствительны к высушиванию, действию ультрафио- летовых лучей и обычных дезинфектантов: эфира, спирта, дезоксихолата. Вирусы хорошо сохраняются при глубоком холоде (-700С).

Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется типоспецифический иммунитет, который обеспечивается неспецифическими (интерферон и ЕК) и специфическими (антигемагглютинины, антинейраминидазные АТ и секреторные антитела IgA) факторами защиты.Пассивный естественный иммунитет сохраняется у детей после рождения в течение 6-8 месяцев. Активный иммунитет создается вакцинацией.

Лабораторная диагностика. Материал – носоглоточный смыв (первые 3-5 дней), в поздние сроки – сыворотка, в летальных случаях – кусочки легочной ткани или мозга. В основе диагностики гриппа лежат 3 группы методов.

Экспресс-метод: используют РИФ для обнаружения вируса или его АГ в материале. Для постановки РИФ готовят мазки-отпечатки, прикасаясь узким стеклом к нижним раковинам носовых ходов. За счет дегенерации клеток они остаются на стекле. На мазки наносят типоспецифические противогриппозные люминесцирующие сыворотки. В люминесцентном микроскопе в цитоплазме клеток выявляют свечение.

Вирусологический метод. Для выделения вируса заражают 10-12-дневные куриные эмбрионы в аллантоисную полость смывом с носоглотки, обработанным антибиотиком. С целью выявления вируса ставят реакцию гемагглютинации (РГА), если она положительна, то для идентификации ставят реакцию торможения гемагглютинации (РТГА) с антисыворотками против типа А (Н₃ N₂), (Н₂ N₂) и др. род вируса определяют в РСК.

Для выделения вируса гриппа используют также перевиваемые тканевые культуры МД СК, Hela, Hep 2, первичную культуру клеток почек эмбриона человека, фибробласты легкого эмбриона человека.

Серологическийметод – ретроспективный, его используют для выявления АТ с помощью РТГА, РСК, ИФА, реакции преципитации в геле, реакции нейтрализации. Исследуют парные сыворотки больного с интервалом в 8-12 дней. Увеличение титра АТ во 2-й сыворотке в 4 и более раз расценивают как признак острой вирусной инфекции.

Этот метод используют для оценки коллективного иммунитета: если титры АТ низкие, то прогнозируют возможную эпидемию.

Методприменяюттакже для отбора донорской плазмы с высоким титром АТ с целью приготовления противогриппозного иммуноглобулина.

Культивирование. Культивирование вирусов гриппа в условиях лаборатории на протяжении почти 50-летней истории их изучения прошло 3 этапа. Первый из них связан с выделением вируса от больных людей путем заражения хорьков. Последующее титрование вируса в легких зараженных хорьков, изучение антигенной структуры вирусов гриппа и особенностей формирующегося противогриппозного иммунитета проводили с помощью интраназального заражения белых мышей. Второй, наиболее плодотворный, связан со способностю вирусов гриппа размножаться в клетках амниотического мешка и хорион-аллантоисной мембраны развивающихся куриных эмбрионов.Новые методы резко сократили также время проведения исследований в связи с быстротой постановки РГА и реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и обеспечили возможность получения больших объемов вируссодержащего материала в виде амниотической и аллантоисной жидкостей из зараженных куриных эмбрионов. На основе РГА и РТГА был разработан высокочувствительный метод диагностики гриппа с помощью непрямой РГА. Кроме того, постановка РГА и РТГА в микрообъемах существенно расширила возможность серодиагностики гриппа за счет увеличения числа антигенов, необходимых для расшифровки респираторных заболеваний у детей, от которых невозможно получение больших объемов сыворотки.

Профилактика и лечение. Для профилактики гриппа используют противовирусные препараты (ремантадин, адапромин, дейтифорин, арбидол), интерферон, оксолиновую мазь и вакцины (живые и инактивированные). Живая гриппозная вакцина представляет собой поливалентный препарат, содержащий в одной ампуле три варианта вируса гриппа А (H₁N₁), A (H₃N₃), B. Известны следующие типы инактивированных гриппозных вакцин: цельновирионные, сплит (расщепленные), где структурные компоненты разъединены, и субъединичные, содержащие только поверхностные вирионные белки (H и N). Цельновирионная и сплит-вакцины примерно одинаковы по эффективности стимуляции антител; субъединичная вакцина более эффективна для лиц, имеющих довакцинальный иммунитет.К противогриппозным вакцинам нового поколения относится полимерсубъединичная вакцина «гриппол», которая содержит протективные поверхностные антигены геммагглютинина и нейраминидазы вирусов гриппа типов А и В, связанных с иммуностимулятором (полиоксидонием).

Антигенная структура Вирусы гриппа имеют внутренние и поверхностные антигены. Сердцевинные антигены определяют роды вируса гриппа А, В, С. Поверхностные представлены гемагглютинином (НА) и нейраминидазой (NА). Гемагглютинин – основной специфический антиген, который вызывает образование вируснейтрализующих антител и обеспечивает адсорбцию вируса на клетках, в том числе на эритроцитах человека и животных, поэтому вызывает их склеивание – гемагглютинацию. Нейраминидаза расщепляет нейраминовые кислоты клеточных мембран, участвует в освобождении вирусов из клетки, обладает токсичностью. Характерной особенностью вирусов гриппа типа А является высокая изменчивость антигенов НА и NА. Известно 18 антигенных подтипов по гемагглютинину (Н₁-Н₁₈) и 11 по нейраминидазе (N₁-N₁₁). Из них в состав вирусов гриппа человека типа А входит три гемагглютинина (Н₁-Н₃) и две нейраминидазы (N₁-N₂). В зависимости от их сочетания выделяют три подтипа вируса гриппа А человека Н₁N₁, Н₂N₂, Н₃N₂, Н₅N₁.

Изменчивость поверхностных антигенов обусловлена двумя генетическими процессами – дрейфом и шифтом. Дрейф – это небольшие изменения гемагглютинина и нейраминидазы, не выводящие штамм вируса за пределы данного подтипа. Он обусловлен точечными мутациями генов. Шифт – скачок – определяет полную замену антигенов НА и NА, в результате чего появляется новый подтип вируса. Антигенный шифтсвязан с заменой генов в связи с генетическими рекомбинациями между вирусами человека, животных и птиц. Вирусы типов В и С стабильны.