Базальная концентрация свободного тироксина в сыворотке

Хотя золотым стандартом измерения свТ₄ считается равновесный диализ, эта техника дорогостояща и проводится только в научных лабораториях. В коммерческих лабораториях концентрацию свТ₄ измеряют одним из трех методов: модифицированный равновесный диализ (МРД), аналог РИА или аналог хемилюминесцентного метода. При методе МРД короткая стадия диализа используется для разделения свободного и связанного с белками Т₄, а затем свТ4 определяется радиоиммунологическим методом. Аналогичные методы измеряют свТ₄ с непосредственно помощью РИА или хемилюминесценции, однако реактивы оптимизированы для исследования человеческой сыворотки и зависят от преобладания связывания гормона ТСГЛ (Ferguson, 2007). Техники МРД считаются наиболее точной коммерческой техникой определения концентрации свТ₄ в сыворотке собак. В одном исследовании правильность измерения свТ₄ с помощью МРД составила 95% (рис. 3-23) (Peterson et al, 1997). В более новых исследованиях указана правильность разных методов МРД от 86 до 93%, в сравнении с правильностью определения T₄ от 75 до 85% (Nelson et al, 1991; Scott-Moncrieff et al, 1994; 2011; Peterson et al, 1997). Важно использовать метод определения свT₄, показавший приемлемые рабочие характеристики при исследовании собак, так как некоторые аналогичные диагностические системы для определения свT₄ у человека по своей правильности не превышают методы измерения общего T₄ у собак (Scott-Moncrieffet al, 2011). Сыворотку для анализа на свТ₄ можно хранить в пластиковых пробирках и пересылать без охлаждения, если анализ будет проводиться в течение 5 дней (Behrend et al, 1998); однако из-за риска воздействия чрезмерных температур во время транспортировки рекомендуется замораживать образцы сыворотки и отправлять в лабораторию в упаковках со льдом. В целом, концентрации свТ₄ более 1,5 нг/дл говорят о нормальной функции щитовидной железы, а значения менее 0,8 нг/дл (особенно менее 0,5 нг/дл) дают основания предполагать гипотиреоз, если анамнез, результаты клинического осмотра и лабораторных исследований также согласуются с этим диагнозом, а системные заболевания отсутствуют (см. табл. 3-7). Антитела к тироксину в крови не влияют на результаты определения свТ₄ с помощью техники МРД, однако могут влиять на результаты анализа другими методами. Концентрации свТ₄ в меньшей степени подвержены снижению при заболеваниях, не относящихся к щитовидной железе, чем концентрации Т₄, хотя при тяжелом заболевании концентрация свТ₄ может снизиться до уровня ниже 0,5 нг/мл; см. «Сопутствующие заболевания» (синдром заболевания, не относящегося к щитовидной железе). Кроме того, некоторые породы имеют более низкие пределы нормы свТ₄, например грейхаунды (см. табл. 3-5) (Shiel et al, 2007a).

ТАБЛИЦА 3-6. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАЗАЛЬНОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ ТИРОКСИНА И ТИРЕОТРОПИНА*

АТ - антитела; L-T₄, - левотироксин или L-тироксин; T₄, тироксин; ТСГ, тиреостимулирующий гормон или тиреотропин.

*T₄, свободный T₄, ТСГ.

ТАБЛИЦА 3-7. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАЗАЛЬНОГО ТИРОКСИНА СЫВОРОТКИ И СВОБОДНОГО ТИРОКСИНА У СОБАК С ПОДОЗРЕНИЕМ НА ГИПОТИРЕОЗ

*При условии отсутствия серьезного системного заболевания.

Концентрация Т₃ в сыворотке (нг/мл)

РИС. 3-22. Базальные концентрации T₃ в сыворотке 35 здоровых собак, 35 собак с гипотиреозом и 30 собак с нормальной функцией щитовидной железы и сопутствующим кожным заболеванием. Обратите внимание на перекрывающиеся диапазоны результатов определения T₃ в трех группах собак.

Концентрация своб. Т₄ в сыворотке (пмоль/л)

Клинич. здоровые Гипотиреоз Норм. функция щитовидной железы

РИС. 3-23. Коробчатые диаграммы сывороточных концентраций свободного T₄ (свT₄) у 150 клинически здоровых собак, 54 собак с гипотиреозом и 54 собак с нормальной функцией щитовидной железы и другим заболеванием. «Коробка» соответствует межквартильному диапазону (т. е. от 25 до 75 процентиля, или средняя половина данных). Горизонтальные линии в коробках соответствуют медиане. Т-образные линии в каждой коробчатой диаграмме соответствуют основному массиву данных. Точки данных, лежащие за пределами диапазона, обозначены светлыми кружками. Закрашенная область соответствует нормальным пределам концентрации свободного T₄. (источник: Peterson et al.: Measurement of serum total thyroxine, triiodothyronine, free thyroxine, and thy­rotropin concentrations for diagnosis of hypothyroidism in dogs J Am Vet Med Assoc 211[11]:1398,1997)

Т4 в сыворотке (нг/мл)		ТСГ в сыворотке (нг/мл)
	Время (дней)

РИС. 3-24.Средняя концентрация тироксина в сыворотке (T₄; °) и тиреостимулирующего гормона (ТСГ; •) у собак после экспериментальной индукции гипотиреоза (день 0) и лечения левотироксином (L-T₄ натрия; начиная с 42 дня). Линии соответствуют СО. *Значимое (Р<0,05) отличие от значений в день 0. (Источник: Williams DA, et al Validation of an immunoassay for canine thyroid-stimulating hormone and changes in serum concentration following induction of hypothyroidism in dogs, J Am Vet Med Assoc 209[10]:1730, 1996.)

ТАБЛИЦА 3-8. ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ, СПЕЦИФИЧНОСТЬ И ПРАВИЛЬНОСТЬ ЧЕТЫРЕХ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ НАБОРОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИРОКСИНА У СОБАК*

T₄, тироксин.

*Популяция собак состояла из 56 собак с клиническими признаками гипотиреоза (31 с нормальной функцией щитовидной железы, 25 с гипотиреозом). Диагностические наборы включали: IMMULITE 2000 для определения свободного T₄ в ветеринарии (Аналог свТ₄) (Siemens Health Care Diagnostics), непосредственный метод определения T₄ с помощью равновесного диализа (MED IVD) (IVD technologies), определение св. Т₄ с помощью равновесного диализа (MED AN) (Antech Diagnostics) и радиоиммунологический метод (РИА) GammaCoat Free T₄ (двухступенчатый)(Diasorin Inc).