Ж3006 Трихомониаз (ПЦР)

Урогенитальный трихомониаз - широко распространенное инфекционное воспалительное заболевание, передаваемое половым путем, вызывается простейшим Trichomonas vaginalis. Основными очагами поражения при урогенитальном трихомониазе являются мочеиспускательный канал у мужчин, влагалище и уретра у женщин. В связи с многоочаговостью трихомонадной инфекции при постановке диагноза следует указывать локализацию поражения. У женщин в воспалительный процесс могут вовлекаться большие вестибулярные и парауретральные железы, шейка матки. Трихомонады обнаруживаются в полости матки, в сактосальпинксах, кистах яичников. Имеются сообщения о связи урогенитального трихомониаза с осложнениями беременности (преждевременные роды, ранний разрыв плодного пузыря и др.). Клиническая картина неосложненного урогенитального трихомониаза у женщин характеризуется наличием воспалительного процесса во влагалище и влагалищной части шейки матки. В дальнейшем может присоединиться вестибулит, парауретрит, эндоцервицит, эндометрит и др., что рассматривается, как осложненное течение заболевания. У мужчин трихомонады могут вызывать поражение предстательной железы, семенных пузырьков, придатков яичек, куперовых желез. Может развиваться восходящая инфекция мочевыводящих путей и почек (цистит, пиелит, пиелонефрит). Осложнения при трихомонадных уретритах у мужчин встречаются чаще, чем при гонорее. Клиническая картина трихомонадных простатитов, везикулитов, эпидидимитов отличается от таковой гонорейной этиологии, протекающей, как правило, более бурно. При затяжном течении возможно образование одиночных или множественных стриктур уретры. У девочек урогенитальный трихомониаз протекает с поражением вульвы и влагалища.

Лабораторная диагностика

Диагноз урогенитального трихомониаза устанавливается при обязательном обнаружении Т. vaginalis путем лабораторного исследования. Для лабораторной диагностики трихомониаза применяются следующие методы: исследование влажного препарата; исследование препарата, окрашенного 1 %-ным раствором метиленового синего и по Граму (последняя окраска позволяет одновременно идентифицировать Т. vaginalis и N. gonorrhoeae); культуральное исследование. Из-за общности путей заражения урогенитальный трихомониаз нередко сочетается с другими заболеваниями, передаваемыми половым путем, в связи с чем больных следует подвергать соответствующему обследованию. В случае сопутствующих урогенитальных инфекций (ассоциаций) их лечение проводится одновременно. ПЦР диагностика трихомониаза является высокоспецифичным и высокочувствительным методом, выполняется лабораторией молекулярной биологии ИОДЦ с 1999 г.

Ж3007 Гепатит B (ПЦР) ( 2Ж3025)

Вирус гепатита В (ВГВ) - возбудитель гепатита В, основной представитель семейства гепадновирусов. Вирус ГВ является ДНК-содержащим. Он представляет собой сферическую частицу диаметром 42-47 нм, состоит из ядра-нуклеоида, имеющего форму икосаэдра диаметром 28 нм, внутри которого находятся ДНК, концевой белок и фермент ДНК-полимераза. Внешняя оболочка вируса (толщиной 7 нм) образована поверхностным антигеном - HBsAg. Белки оболочки могут отличаться по антигенной специфич-ности. Полипептид, содержащийся в оболочке, обладает группо-специфичной детерминантой "А", общей для всех подтипов вируса, и двумя субдетерминантами. Таким образом, существуют 4 антигенных фенотипа. Протективные свойства связаны в основном с антителами к групповой детерминанте "А". Описан также специалистами ГВ-2 с отличающимися эпигонами к одной из детерминант, а также с отличающимися эпитопами белков pre-S2 и core. Возможно ГВ-2 является лишь антигенным вариантом классического ГВ, а не новым вирусом. Наличие вариантов вируса с мутациями и антигенных детерминант, не нейтрализуемых антителами к обычному антигену, имеет существенное практическое значение для вакцинопрофилактики. Заражение гепатитом В (ГВ) происходит с кровью, ее продуктами, спермой, слюной, вагинальными выделениями, потом и слезами от острых и хронических больных.

Инфекция реализуется при гемотрансфузии, использовании нестерильного медицинского инструментария, при гомо- и гетеросексуальных контактах, у новорожденных, рожденных матерями - носительницами вируса. У значительной части больных имеет место заражение при парентеральных манипуляциях в медицинских учреждениях. Широкое использование гемотрансфузии до вве-дения вирусологического контроля за донорами способствовало распространению заболевания при использовании крови и ее препаратов. Позднее стал очевиден риск передачи гепатита В через инъекционное оборудование. Важное значение в распознавании ГВ имеют данные эпидемиологического анамнеза (указания на парентеральные вмешательства, контакт с больным, внутривенные введения наркотиков в сроки, соответствующие периоду инкубации), клинического обследования (выявление характерной цикличности болезни и клинико-биохимических синдромов). Манифестные формы ГВ характеризуются высокой аминотрансфераземией, билирубинемией (желтушная форма), снижением сулемового титра и нормальными значениями тимоловой пробы в начале заболевания. Основное внимание следует обратить на результаты специфических методов исследования - обнаружение маркеров ГВ - вирусной инфекции. При остром ГВ, в преджелтушной и начальной фазе желтушного периодов в сыворотке крови обнаруживают HBsAg, HBeAg, HBV-DNA и IgM анти-НВc. В период разгара желтухи (через 1-1,5 мес. от начала заболевания) HBsAg, HBeAg и HBV-DNA выявляются не постоянно. С большим постоянством определяются IgM анти-НВс. В периоды угасания клинических проявлений и реконвалесценции обнаруживают IgM анти-HBc, анти-НВе, позднее - анти-HBc (total) и IgG анти-HBc. Персистирование HBeAg при отсутствии анти-НВе - прогностический признак хронизации инфекции. Однако, все чаще встречаются мутантные штаммы вируса синтезирующие HbsAg, не обнаруживаемый существующими тест-системами. Маркером активной репликации вируса, связанной с прогрессирующим заболеванием печени, является е-антиген (HbeAg). В тоже время, некоторые штаммы могут продуцировать HbeAg не выявляемый в плазме существующими тест-системами. Было показано, что обнаружение ДНК вируса гепатита В в сыворотке методом ПЦР имеет прогностическое значение для исхода острой инфекции вирусом гепатита В. Установлено, что персистирование ВГВ более 8 недель свидетельствует о хронизации заболевания, тогда как исчезновение ДНК ВГВ в течении 2 недель после появления симптомов острого гепатита коррелирует с полным выздоровлением. Определение наличия или отсутствия вирусной ДНК в сывротке крови – является прямым способом определения эффективности противовирусной терапии.

Ж3008 Гепатит G (ПЦР) ( 2Ж3025)

HGV представляет собой мелкий вирус с однонитевой линейной РНК. Геном вируса состоит из структурных и неструктурных белков, Структурные гены сосредоточены на 5' конце, а неструктурные на 3' конце. К неструктурной области относится РНК-зависимая РНК полимераза. Различают несколько субтипов HGV. 1а и 1б регистрируются в Африке, 2а и 2б в Америке и в Европе, 3 в Юго-Восточной Азии. Результаты индикации HGV -РНК у разных категорий больных в разных регионах мира свидетельствовали о повсеместном распространении инфекции. Для некоторых регионов, прежде всего Западной Африки, HGV-гепатит весьма распространенная инфекция. Маркеры выявляются у 18% всей популяции. Эпидемиологическая характеристика гепатита HGV в значительной мере близка к другим сывороточным гепатитам, особенно к гепатиту С (ГС). Это относится к источникам заражения и путям передачи. В США среди безвоздмездных доноров крови с нормальными показателями АлАТ, HGV-РНК выявлялась в 1-2%, при повышенных показателях АлАТ - в 4%, а среди доноров плазмафереза - в 13%. Соответственно, существенную группу риска, как при ГВ и ГС, представляют реципиенты, систематически получающие повторные переливания крови, в частности больные гемофилией. Важным фактором передачи HGV могут явиться препараты крови. Среди них число инфицированных серий достигает 18- 20%. Установлено нередкое инфицирование смешанной плазмы, предназначенной для приготовления препаратов иммуноглобулина. В США число инфицированных серий достигло 33-88%, в странах Европы существенно меньшее - 7-10%. Подобные "проскоки" авторы объясняют отсутствием доступных методов тестирования доноров на маркеры HGV. В зарубежной литератературе подтверждается важное значение "щприцевого" пути передачи. В частности, существенную группу высокого риска заражения HGV составляют наркоманы с внутривенным введением наркотиков, среди них инфицировано от 15 - до 33%. Как и при других сывороточных гепатитах, заражение HGV может быть связано с нанесением татуировки. Допускают возникновение семейных очагов в окружении носителей HGV. Относительно меньшее значение имеет имеет половой путь передачи HGV. Так же редко устанавливается перинатальное заражение новорожденных, родившихся от инфицированных матерей. По клинической характеристике гепатит HGV ближе всего к ГС. Его и называют HCV-подобным гепатитом. Как и при ГС, преобладают субклинические, безжелтушные, сглаженные формы инфекции. Острая фаза в основном подтверждается увеличением АлАТ. Это особенно наглядно выявляется при динамическом контроле за лицами с посттрансфузионным заражением. Причем степень повышения АлАТ существенно меньшая, чем при ГС. Обратили внимание, что при гепатите G высокому уровню вирусемии соответствует существенно меньшее повышение АлАТ. Это позволяет допустить относительно меньшее значение цитолиза гепатоцитов в патогенезе этого вида гепатита. Более высокий уровень АлАТ отмечают при сочетанной инфекции HGV и HCV. Острая фаза, как и при ГС, перерастает в длительную многолетнюю персистенцию вируса. При сочетании HGV и HCV характерно прогрессирование процесса с последующим развитием хронического гепатита, цирроза печени, гепатоцеллюлярной карциномы. Клинические проявления HGV как моноинфекции, а также сочетания HGV с HCV, HGV с HBV требуют дальнейшего всестороннего изучения. Наряду с субклиническими и клинически манифестными формами гепатита-G могут возникать тяжелые и даже особотяжелые варианты течения. Тяжелое течение, с преимущественной частотой, наблюдается при сочетании развития HCV и HGV. По данным японских исследователей маркеры HGV были обнаружены у половины больных фульминантным гепатитом. Эти данные преимущественно относятся к сочетанному развитию HCV и HGV. Однако фульминантный гепатит регистрировался при гепатите HGV и вне сочетания с HСV. В европейских странах HGV столь существенного значения в этиологической структуре фульминантного гепатита не имеет. Возможно это связано с разными генотипами HGV. Допускают определенную роль HGV в развитии апластической анемии. Аплазия костного мозга была описана также и при хроническом ГС. Она развивалась спустя месяцы или годы после острой фазы болезни и приводила к прогрессирующей анемии. Нет пока данных о том, может ли персистенция HGV, по аналогии с HCV, избирательно "запускать" аутоиммунные процессы, в частности аутоиммунный гепатит. Диагностика гепатита HGV, как уже было отмечено , ставится путем исключения сывороточных гепатитов с обязательным использованием всех доступных клинических и лабораторных критериев. Верифекация диагноза требует индикации HGV-РНК методом ПЦР. Методы ИФА- диагностики HGV пока не разработаны. Сведения о возможности этиотропной противовирусной терапии, в частности, лечения интерфероном, при гепатите-G, пока скудные, по одним данным считается, что этот вирус избирательно резистентен к интерферону. Высказывается также предположение о том, что присоединение HGV к HCV инфекции определяет преимущественную рефрактерность больных к интерферону. По другим данным HGV хорошо отвечает на интерфероно-терапию. Как ни пародоксально,продолжительность жизни больных СПИДОМ одновременно пораженных HIV и HGV достоверно выше, чем больных пораженных одним вирусом СПИДА. Данный феномен связывают с стимуляцией продукции интерферона при размножении HGV в организме больного.

Ж3011 Гонорея (ПЦР)

Neisseria gonorrhoeae - грамотрицательный диплококк, тропный преимущественно к эпителиальным клеткам слизистых оболочек мочеполовых органов, является возбудителем гонореи и относится к заболеваниям, передаваемым половым путем (ЗППП). Во многих случаев выявление гонореи не представляет особенных затруднений, а существующий арсенал лабораторных методов определения гонококков (бактериоскопия; культуральные исследования; методы полимеразной и лигазной цепной реакции; иммунофлюоресцентная; иммуноферментная; иммунохимическая и серологическая диагностика заболевания) практически исключает возможность постановки ошибочного диагноза. В то же время, в практике специалистов весь лабораторный комплекс выделения гонококков не используется и наполовину, а наиболее распространенным способом их детекции служит рутинный метод бактериоскопии (окраска метиленовым синим; - по Граму и др.), который даже при самых информативных приемах окраски препаратов нельзя считать основой диагностики инфекции. Кроме того, необходимо обратить внимание, что в последнее время клиническая картина заболевания претерпела существенные изменения (торпидное течение; отсутствие манифестных форм; возрастание частоты регистрации штаммов Neisseria gonorrhoeae с устойчивостью к основным антибиотикам и др.), что может приводить к установлению ошибочного диагноза и, как следствие, назначению неадекватной терапии. Ко всему вышесказанному следует добавить, что в настоящий момент повсеместно частота регистрации гонореи среди лиц, обратившихся за специализированной помощью чрезвычайно низкая, что вряд ли можно объяснить одним только фактом так называемого "коммерческого"лечения болезни. Указанные обстоятельства диктуют необходимость совершенствования лабораторных технологий по диагностике гонококковой инфекции и проведения сравнительного изучения чувствительности и информативности каждого из них. В этой связи, перспективным методом детекции Neisseria gonorrhoeae представляется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), способный выявлять минимальное количество микроорганизмов в анализируемом материале, благодаря многократной наработке числа копий заданного участка ДНК в присутствии фермента Taq-полимеразы. Полимеразная цепная реакция обладает рядом особенностей , позволяющей ей занять достойное место среди других методов диагностики гонорейной инфекции , а в ряде случаев (хроническая инфекция , стертая клиническая картина , прием антибиотиков ) может служить единственным инструментом , способным обнаружить Neisseria gonorrhoeae.

2Ж3016 Молекулярный анализ SRY-региона (ПЦР) Определение пола и при нарушении половой дифференцировки)

Развитие половых желез в эмбриогенезе обусловлено набором половых хромосом. Кариотин 46 ХХ определяет развитие яичников, а 46 ХY – яичек. Гонады, как мужские, так и женские, развиваются из 3 различных компонентов целомического эпителия, мезенхимы и примордиальных герминальных клеток. Первичный зародыш гонад бипотенциален и состоит из 2 частей – кортикальной и медуллярной. При наличии двух функционально нормальных Х-хромосом кортикальная часть индифферентной гонады развивается в яичник. Гены, расположенные в перицентромерной области Y-хромосомы, определяют развитие медуллярной части в яичко. Ген, ответственный за развитие яичка, был идентифицирован D.C. Page и соавт. (1987) и клонированный ими участок хромосомы был назван ZFY. Указанная последовательность (ген ZFY) выявлялась у 46 ХХ фенотипичных мужчин, но отсутствовала у 46 XY фенотипичных женщин. Эти исследования позволили считать, что ZFY является небольшой частью Y-хромосомы, сочетающейся с дифференцировкой пола. Однако ZFY у некоторых больных определялся на аутосомах, а M.S. Palmer и соавт. (1990) описали 4 мужчин с 46 ХХ набором половых хромосом, у которых наследуемый участок Y хромосомы не включал ZFY, показывая, что ZFY не является фактором, ответственным за развитие яичка. Почти одновременно A.H. Sinclair и соавт. (1990) опубликовали уточняющие данные о локализации гена в области pY53.3, ответственного за пол организма, назвав его SRY (область Y-хромосомы, ответственная за определение пола). Этот ген, по их мнению, является истинным геном-кандидатом фактора или гормона, определяющего развитие яичка. Он экспрессируется только в яичках и отсутствует в легких и почках взрослого мужчины, как и в яичниках женщины. SRY участвует в процессах половой дифференцировки в тесном взаимодействии с еще одним геном, названным K.McElreavey и соавт. (1993) геном Z, функция которого в норме заключается в угнетении специфических мужских генов. В случае нормального мужского генотипа 46XY ген SRY продуцирует белок, угнетающий ген Z, и специфические мужские гены активируются. В случае нормального женского генотипа 46ХХ, при котором отсутствует SRY, ген Z активируется и угнетает специфический мужской ген, что создает условия для развития по женскому типу. У 46ХХ мужчин также отсутствует ген SRY и это сопровождается активацией гена Z, соответственно угнетением специфического мужского гена, вызывая развитие по женскому типу. У мужчин с генотипом 46 ХХ и отсутствием SRY должна быть мутация Z гена, сопровождающаяся невозможностью экспресии Z гена, что и способствует при этом осуществлению дифференцировки по мужскому типу. Эта гипотеза также объясняет генез развития женского фенотипа при 46XY. У таких лиц имеется интактный ген SRY и, вероятно, мутация Z гена.

Ж3017 Краснуха (ПЦР)

Краснуха (Rubella)— это острое инфекционное заболевание, вызываемое вирусом семейства тоговирусов. Краснуха относится к детским инфекциям, но ей болеют и взрослые — особенно во время периодически повторяющихся (особенно в весеннее время) эпидемических вспышек. Передача инфекции происходит воздушно-капельным путем. Для заражения требуется достаточно длительный и тесный контакт с больным. Различают две формы болезни — врожденную и приобретенную. Вирус может передаваться двумя путями: от больного к здоровому при контакте и от матери — к плоду. Как отдельную нозологическую форму выделяют прогрессирующий краснушный панэнцефалит, относящийся к медленным инфекциям ЦНС, с прогрессирующим течением и летальным исходом. При передаче воздушно-капельным путем вирус попадает в слизистую оболочку верхних дыхательных путей, затем - в кровь и распространяется по всему организму, поражая, в основном, капиллярную сеть и лимфатическую ткань. Инкубационный период продолжается 15 —21 день. У детей заболевание протекает относительно легко. Начинается остро, с появления на коже бледно-розовой мелкопятнистой сыпи, не возвышающейся над поверхностью кожи, размером до 3 —5 мм. Позже присоединяется увеличение лимфатических узлов в области шеи и затылка, незначительная лихорадка, катар верхних дыхательных путей. У взрослых заболевание протекает тяжелее. Самым частым осложнением у взрослых является поражение мелких суставов рук, но, хотя и редко, поражение центральной нервной системы — энцефалит. В начале 40-х годов австралийские медики доказали, что вирус краснухи может вызывать врожденные пороки плода и ряд других серьезных осложнений беременности, например спонтанный аборт, мертворождение и др. Частота и степень поражения плода в значительной степени определяется сроком беременности в момент заражения. Чем меньше срок беременности, во время которого женщина заболела краснухой, тем чаще и сильнее воздействия вируса на плод. Наиболее опасен первый триместр беременности, когда формируются органы ребенка. Однако инфицирование плода может последовать за инфицированием матери в любые сроки беременности — вплоть до третьего триместра. Выделяют классический синдром врожденной краснухи, так называемую триаду Грега: катаракта, пороки сердца и глухота. Но могут развиться и другие тяжелейшие пороки: микроцефалия, глаукома, поражение головного мозга, пороки развития скелета, печени, селезенки и мочеполовых органов. Инфицированные краснухой дети, даже не имеющие пороков развития, часто рождаются с малой массой тела и малым ростом, и в дальнейшем отстают в физическом развитии. При лабораторном исследовании крови характерно наличие нейтрофильного лейкоцитоза и появление специфических плазматических клеток. В конце высыпания или после его исчезновения в крови обнаруживается специфический антиген IqG. Особенно важно обследование иммунитета к краснухе женщин во время подготовки их к беременности и во время беременности. Можно выделить три варианта ответов лабораторных исследований: 1. IgМ — результат отрицательный и IgG - результат отрицательный. Это означает, что иммунитет к краснухе отсутствует. 2. IgМ — результат положительный, IgG - результат отрицательный или IgМ результат положительный, IgG результат положительный. Это - острая и подострая фаза заболевания. 3. IgМ — результат отрицательный и IgG результат положительный. Такой результат свидетельствует о наличие защитного иммунитета. Женщина переболела краснухой в типичной или стертой форме. Второй раз краснухой не болеют. Оснований для беспокойства нет. Опасность заболеть краснухой во время беременности высока при эпидемических вспышках краснухи, при контакте с больными или вирусоносителями. В России каждая пятая женщина, а в Москве — каждая третья не обладает достаточным иммунитетом против краснухи. Для профилактики краснухи во время беременности желательно сделать прививку. Можно сделать прививку без предварительного обследования, т.к. прививка безопасна для тех, у кого есть антитела к вирусу краснухи. Сделать прививку следует не менее, чем за 2 —3 месяца до зачатия. После перенесенного заболевания развивается пожизненный иммунитет. Однако его напряженность с возрастом и под воздействем различных вредных воздействий может резко снизиться. Таким образом, перенесенное в детстве заболевание краснухой не может служить 100% гарантией от повторного заболевания. При заражении женщины краснухой до 17 недель беременности риск эмбриопатий (поражений плода) достигает 50%. При подтверждении диагноза серологическими тестами показано срочное прерывание беременности. При обследовании в более поздние сроки гестации (беременности) при выявлении положительного "анти-Rubella IgМ" риск эмбриопатий меньше, но все равно риск патологии у ребенка остается. Поэтому и до беременности и во время нее необходимо оценить иммунитет к этому заболеванию, определив anti-Rubella IgG и anti-Rubella IgM. Перспективным направлением лабораторной диагностики краснухи является прямой метод выявления краснухи с помощью ПЦР, который обладает рядом преимуществ: высокой чувствительностью и специфичностью, позволяющей диагностировать острые, ииапарантные и медленно прогрессирующие формы; проводить обследования контактных лиц в сроки когда серологические методу еще не эффективны, возможность использования различного клинического материала – кровь, носоглоточные смывы, моча околоплодные воды, ворсинки хориона, абортный материал, идентификация возбудителя в течении одного дня. Однако, следует иметь ввиду, что возможность выявления вируса краснухи методом ПЦР требует присутствия живого вируса в клиническом образце. Поэтому при первичном заражении наиболеевероятный период обнаружения краснухи методом ПЦР - от момента заражения в течение всего инкубационного периода плюс первая неделя после появления сыпи. Максимальной концентрации в крови и других тканях вирус достигает за несколько дней до появления первых высыпаний. К моменту появления первых антикраснушных иммуноглобулинов IgM вероятность обнаружения вируса с помощью ПЦР резко снижается. Рекомендуемый клинический материал и сроки обследования методом ПЦР: плазма переферической крови с 7 дня контакта; смывы с носоглотки 7 день контакта – 10 день после исчезновения сыпи, спиномозговая жидкость при подозрении на краснушный энцефалит; ворсинки хориона, околоплодные воды 10-16 недели беременности; кровь плода из пупочной вены с помощью кордоцентеза с 22 недели беременности, абортивный материал.

2Ж3018 Микроделеционный анализ AZF-региона Y-хромосомы (ПЦР) (Определение мужского бесплодия)

Микроделеции локуса AZF приводят к нарушению сперматогенеза и бесплодию у мужчин. Внедрение и широкое использование такого метода репродуктивных технологий позволяет части для некоторых пациентов с микроделециями Y - хромосомы преодолеть нарушение репродуктивной функции и иметь потомство. Однако у таких пациентов имеется высокая степень риска передачи Y - микроделеций плодам мужского пола. Поэтому перед проведением искусственного оплодотворения пациентам с азооспермией или олигозооспермией тяжелой степени необходимо проведение микроделеционного анализа Y - хромосомы и медико - генетического консультирования. Бесплодием страдают около 10 - 15 % супружеских пар, при этом примерно в 50 % случаев оно обусловлено нарушением репродуктивной функции со стороны мужчины, а еще в 20 % - нарушением репродуктивной функции обоих супругов. Бесплодие у мужчин в 40 - 50 % случаев может быть связано с нарушениями количественных и/или качественных показателей эякулята. Примерно у 31,7 % мужчин причину бесплодия установить не удается (идиопатическое бесплодие) ; предполагается, что оно обусловлено генетическими или иммунологическими факторами. Сперматогенез представляет собой сложный многоэтапный процесс, завершающийся образованием зрелых мужских половых клеток - сперматозоидов. Данный процесс контролируется большим количеством генов, расположенных как на аутосомах, так и на гоносомах (половых хромосомах), в особенности на Y - хромосоме . Мутации генов, контролирующих этапы сперматогенеза, могут приводить к нарушению подвижности, морфологических и фертильных свойств сперматозоидов, блоку сперматогенеза, проявляясь в диапазоне от легкого снижения сперматогенной активности до полного отсутствия половых клеток в семенных канальцах (синдром "только клетки Сертоли»). Так, микроделеции локуса AZF (Azoospermia Factor, фактор азооспермии) хромосомы Y обнаруживаются в среднем в 10 - 15 % случаев азооспермии и в 5 - 10 % случаев олигозооспермии тяжелой степени и обусловливают нарушения сперматогенеза и бесплодие у мужчин. AZF - локус содержит три неперекрывающихся субрегиона: AZFa, AZFb и AZFc [11]. Каждый из них содержит ряд кандидатных генов, мутации которых приводят к азооспермии или олигозооспермии тяжелой степени. В настоящее время широкое использование методов таких методов искусственного оплодотворения, как введение сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки позволяет преодолеть ряд нарушений репродуктивной функции у мужчин. Однако возможность передачи потомству генетических нарушений, в том числе микроделеций Y - хромосомы от отца сыну, диктует необходимость генетического обследования супружеской пары, включающего микроделеционный анализ Y - хромосомы у мужчин перед проведением этих методик.

2Ж3019 Исследование на цитомегаловирус (ПЦР)

Цитомегаловирусная инфекция - антропонозная вирусная инфекционная болезнь с аспирационным механизмом передачи возбудителя. Характеризуется преимущественно латентным течением у взрослых, а также генерализированной формой с поражением нервной системы и внутренних органов при внутриутробном заражении плода. Возбудитель - ДНК-содержащий вирус Cytomegalovirus hominis, относится к семейству Herpesviridae рода Cytomegalovirus. Различают 2 серотипа вируса цитомегами человека, определяется в РН и РСК. Вирус относительно термолабилен: утрачивает инфекционные свойства при 10-20 - минутном нагревании до 56° С и хранении в течение 7 сут при температуре 4° С, длительно сохраняются при температуре -90° С. Сравнительно стабилен при рН 5,0-9,0 и быстро разрушается при рН 3,0. Чувствителен к повторному замораживанию и оттаиванию, действию эфира и других растворителей липидов. Резервуар и источники возбудителя: человек, больной острой илилатентной формой заболевания. Период заразительности источника может длиться месяцы и даже годы в связи с латентным сохранением возбудителя в организме. Механизм передачи возбудителя аспирационный; путь передачи - воздушно-капельный, так как возбудитель выделяется со слюной. Возможен контактный путь передачи через контаминированные инфицированной мочой объекты. Доказана возможность трансплацентарной передачи возбудителя, а также передачи при трансплантации почек или сердца; не исключена возможность передачи вируса переливании крови инфицированного донора. Естественная восприимчивость людей высокая, однако характерно широкое распространение латентной инфекции: специфические антитела к цитомегаловирусной инфекции обнаруживаются у 50 % детей школьного возраста и у 80 % взрослых людей. Основные эпидемиологические признаки. Болезнь распространена повсеместно. Ей принадлежит основная роль среди всех видов перинатальной патологии, она может быть причиной недоношенности, мертворождаемости, врожденных дефектов развития. У детей старшего возраста и взрослых цитомегаловирусная инфекция в основном наблюдается как сопутствующее заболевание при процессах, сопровождающихся иммунодепрессивным состоянием организма. Сезонных, профессиональных или иных особенностей эпидемического процесса не выявлено. Инкубационный период не установлен, поскольку инфекция протекает чаще в латентной форме, а клинически выраженные формы болезни чаще возникают после воздействия какого-либо фактора, вызывающего иммунодефицит (пересадка органов, использование иммунодепрессантов и др.). При трансфузионном заражении длится от 2 до 7 нед, как осложнение ожогов - от 7 до 4 мес. Основные клинические признаки Различают приобретенную и врожденную формы цитомегаловирусной инфекции. Приобретенная цитомегаловирусная инфекция может протекать в латентной (локализованной) и генерализованной формах. Латентная форма обычно не проявляется четкими клиническими симптомами, иногда наблюдаются легкие гриппоподобные заболевания. Генерализованная форма в виде вяло текущей интерстициальной пневмонии. Врожденная цитомегаловирусная инфекция в большинстве случаев проявляется острой формой в виде поражения печени, головного и костного мозга, геморрагического синдрома, анемии, эритробластоза; как правило, заболевание заканчивается гибелью плода, а в случае выздоровления приводит к микроцефалии, двигательным расстройствам, замедленному умственному развитию. Лабораторная диагностика. Для этиологической диагностики стремятся выделить цитомегаловирус из слюны, мочи, промывных вод желудка, спинномозговой жидкости, биоптатов, секционного материала; для этой цели используют ПЦР, посевы на культуры фибробластов эмбриона и культуры диплоидных клеток человека. Учитывая неустойчивость вируса, посевы необходимо проводить в течение первых 2-4 ч после взятия пробы. Используют серологические исследования (ИФА, РСК и РПГА) со специфическим антигеном.

2Ж3020 Исследование на вирус Эпштейн-Барра (ПЦР)

Вирус Эпштейна--Барр является ДНК содержащим вирусом, впервые обнаруженным в 1964 году у больного из Африки, страдающего лимфомой Беркитта. Вирус Эпштейна--Барр может специфично связываться с рецептором на поверхностной мембране В-лимфоцитов (гликопротеин CD-21, который также является рецептором для C3b -- компонента комплемента). Связь с вирусом действует на В-лимфоцит как начальная поликлональная митогенная стимуляция, отчасти ответственная за увеличение экспрессии рецептора (CD-23) для В-клеточного ростового фактора. Вирус Эпштейна--Барр является причиной инфекционного мононуклеоза, состояния клинически схожего с абортивным течением лимфомы. Инфекционный мононуклеоз представляет собой наглядную модель в которой индуцированная вирусом Эпштейна--Барр пролиферация В-лимфоцитов, способных к злокачественной прогрессии, подавляется нормальным Т-клеточным ответом. Показано, что вирус Эпштейна--Барр индуцирует развитие фатальной лимфомы у мужчин происходящих из семей с прослеживающимся анамнезом недостаточности иммунной системы. Такие больные имеют генетический дефект сцепленный с X-хромосомой (X q24-q27). Этот генетический дефект иммунорегуляции является причиной дефицита иммунного ответа, направленного против вируса Эпштейна--Барр. Первичная инфекция, вызванная вирусом Эпштейна—Барр, может отмечаться в детском, подростковом или взрослом возрасте; примерно 50% детей переболевают до 5 лет, у большинства из них инфекция протекает субклинически. У взрослых и подростков, в зависимости от различных факторов, она может протекать как субклинически, так и в виде явного клинического синдрома (инфекционный мононуклеоз, синдром хронической усталости). С вирусом Эпштейна—Барр связаны некоторые В-клеточные новообразования. В 90% случаев инфекция протекает бессимптомно. Большинство людей к началу взрослого возраста уже инфицированы. После первичного инфицирования вирус Эпштейна—Барр остается в организме пожизненно. 15-25% здоровых ВЭБ-позитивных взрослых выделяют вирус из ротоглотки. Передача вируса может осуществляться при переливании препаратов крови, но наиболее часто она происходит при непосредственных контактах слизистой рта (поцелуях) между неинфицированными и ВЭБ-позитивными лицами. Инкубационный период составляет 30-50 дней. Основной клинической формой инфекции является инфекционный мононуклеоз. При хроническом течении инфекции может развиться так называемый синдром хронической усталости. В типичных случаях инфекционного мононуклеоза отмечается следующая тетрада признаков: утомляемость, повышение температуры, фарингит и лимфаденопатия; при этом у больных могут отмечаться как все перечисленные симптомы, так и только некоторые из них. Обычно в течение нескольких дней больные ощущают недомогание, затем повышается температура, появляется фарингит и аденопатия. Фарингит может протекать тяжело, с выраженной болезненностью, экссудативными явлениями, напоминая стрептококковый фарингит. Может вовлекаться любая группа лимфоузлов; поражение, как правило, симметрично; часто выражена аденопатия передних и задних шейных лимфоузлов. Иногда единственным клиническим проявлением заболевания может стать увеличение одного лимфоузла или одной их группы. Пик лихорадки обычно приходится на вторую половину дня или начало вечера, температура поднимается приблизительно до 39,5 °С, но может достигать и 40,5^оС. Слабость обычно максимально выражена в первые 2-3 нед. заболевания. Часто отмечается увеличение селезенки и печени. Несколько реже отмечаются пятнисто-папулезные высыпания, желтуха, периорбитальный отек, энантема на нёбе. У большинства больных бывает умеренный лейкоцитоз, обычно в сочетании с более выраженным абсолютным и относительным лимфоцитозом, обусловленным появлением морфологически атипичных лимфоцитов (мононуклеаров). Атипичные лимфоциты могут составлять до 80% общего числа лейкоцитов, но могут и отсутствовать. Обычно инфекционный мононуклеоз проходит самостоятельно. Длительность заболевания различна; острая фаза, как правило, длится около 2 нед. «Хронизация» симптомов отмечается у 1—2% больных. Для синдрома хронической усталости характерны постоянная усталость и снижение работоспособности у ранее здоровых людей при отсутствии явных заболеваний или других причин, которые могут вызвать такое состояние. При этом могут отмечаться субфебрильная температура, хронический фарингит, увеличение лимфатических узлов, мышечные и суставные боли, нарушения сна, ухудшение памяти, депрессия, быстрое изменение массы тела, нарушение функции желудочно-кишечного тракта, снижение аппетита, аритмии, дизурия, симптомы аллергии и повышенной чувствительности к лекарственным препаратам, инсоляции, алкоголю. Такое состояние продолжается до полугода и более и имеет тенденцию к утяжелению.

2Ж3021 Исследование на герпес простой 1,2 тип (ПЦР)

Под герпетической инфекцией понимается инфекция, обусловленная вирусами простого герпеса, которые входят в группу герпес-вирусов наряду с цитомегаловирусом, вирусом инфекционного мононуклеоза и ветряной оспы. Вирусы простого герпеса подразделяются на 2 типа – вирус первого типа обусловливает преимущественно поражение органов дыхания (лабиальный, т.е. локализованный на губах ), а с вирусом второго типа связано возникновен