Антибактериальная активность 4-замещенных 5H-1,2,3-дитиазол-5-она 4a, -5-тионов 6 и -5-фенилиминов 7

В Таблице 6 представлены результаты первого этапа антибактериальных испытаний методом растворения в питательной среде для грамотрицательных бактерий Escgericgia coli ATCC25922, Salmonella enterica CHP5858, Klebsiella pneumoniae CHP5373, Pseudomonas aerufinosa ATCC27853, и грамположительных бактерий Stapgylococcus aureus ATCC25923, Enterococcus iaecalis CHP103214, Bacillus cereus и Lhsteria inocua. Для выявленных на первом этапе активных соединений определены минимальная ингибирующая (MIC) и минимальная бактерицидная(MBC) концентрации (г/мл), которые представлены в таблице 7.

Минимальная ингибирующая концентрация (MIC) и минимальная бактерицидная концентрация (MBC) были определены макроразбавлением в питательной среде. MBC определена как наименьшая концентрация соединения, которая уничтожает 99,99% клеток образца. Что касается MIC, растворы дитиазолов с концентрациями, превышающими 48 мг/мл испытаны не были.

Таблица 6. Противомикробная активность соединений 7, 6, 4а, определенная методом растворения в питательной среде.

Средний диаметр зоны ингибирования (посчитан для трех образцов); - : неактивен ; + : зона ингибирования 6-9 мм. ; ++ : зона ингибирования 9-12 мм. ; +++ : зона ингибирования >12 мм.

Ни один из протестированных иминов 7a-g не оказал эффекта на рост грамположительных и грамотрицательных бактерий. Однако имин 7h и тионы 6a, 6i и 6h проявили умеренную активность против грамположительных бактерий. Грамположительные бактерии оказались более чувствительными к исследованным соединениям, чем грамотрицательные (Таблицы 6 и 7).

Таблица 7. Противомикробная активность; минимальная ингибирующая (MIC) и минимальная бактерицидная (MBC) концентрации (мг/мл)*

* Исследовано в серии из трех опытов

Фунгицидная активность 4-замещенных 5H-1,2,3-дитиазол-5-она 4a, -5-тионов 6 и -5-фенилиминов 7

В таблице 8 представлены результаты испытаний со следующими образцами: Candida albicans ATCC10231, Candida flabrata DSM6425, Candida tropicalis DSM646 и Issatcgenkia orientalis DSM6128, определенными методом растворения в питательной среде. Первые три грибка значительно ингибировались тремя соединениями 7h, 6i и 6h.

Таблица 8. Противогрибковая активность соединений 4а, 7, 6 определенная методом растворения в питательной среде.

Средний диаметр зоны ингибирования (посчитан для трех образцов); - : неактивен ; + : зона ингибирования 6-9 мм. ; ++ : зона ингибирования 9-12 мм. ; +++ : зона ингибирования >12 мм.

Первые результаты позволили выбрать соединения и грибковые штаммы для определения минимальной ингибирующей концентрации (MIC) и минимальной фунгицидной концентрации (MFC). Соотношение MFC/MIC посчитано для определения фунгистатической (MFC/MIC > 4) или фунгицидной (MFC/MIC ≤ 4) активности. Результаты приведены в Таблице 9. Коммерческие антибиотики Амфотерицин B и Флюконазол использовались в качестве стандартов фунгицидной и ингибиторной (фунгистатической) активности против грибков (дрожжей). Три соединения 7h, 6h и 6i показали значительную фунгицидную активность на уровне стандартных препаратов.

Таблица 9. Фунгицидная активность, минимальная ингибирующая концентрация (MIC) и минимальная фунгицидная концентрация (MFK) (мкг/мл) *

* Исследовано в серии из трех опытов

Выводы

1. Систематически изучена реакция легкодоступных этаноноксимов с монохлоридом серы и разработаны удобные, однореакторные методы синтеза неизвестных ранее 4-замещенных производных 1,2,3-дитиазолов: кетонов, тионов, иминов и илиденов.

2. Разработан оригинальный однореакторный метод синтеза бициклической системы – би-5,5'-1,2,3-дитиазолов из этаноноксимов.

3. Изучена реакционная способность 4-замещенных 1,2,3-дитиазолов. Показано, что реакции 4-замещенных 1,2,3-дитиазолов с нуклеофильными реагентами, в отличие от 4-хлорзамещенных производных, протекают как с сохранением 1,2,3-дитиазольного цикла, так и с образованием новых гетероциклических соединений.

4. Обнаружено неизвестное ранее превращение 4-замещенных 1,2,3-тиадизол-5-тионов и 5-онов в соответствующие 2,4-дизамещенные 1,2,5-тиадиазол-3-тионы и 3-оны, соответственно, под действием первичных алифатических аминов.

5. Показано, что 1,2,3-дитиазол-5-оны и 5-тионы взаимодействуют со вторичными аминами с раскрытием цикла и образованием -иминотиоацетамидов и -оксоацетамидов, соответственно.

6. Обнаружена реакция замещения экзоциклической серы в 1,2,3-дитиазол-5-тионах на две этоксигруппы с образованием ранее неизвестных 4-замещенных 5,5-диэтокси-5Н-1,2,3-дитиазолов.

7. Показано, что реакции с этилатом натрия 4-замещенных 1,2,3-дитиазолов - кетонов и иминов, протекают различными путями, и приводят к 2-замещенным этил--оксоацетатам и -оксотиоацетамидам, соответственно.