Возбудители микроспории

 

Возбудитель. Microsporosis (микроспороз или стри-

гущий лишай) — заразная болезнь кожи и волос, кли-

нически характеризующаяся образованием очагов по-

верхностного воспаления кожи, обламыванием волос и

поражением ногтей. Возбудители микроспории — грибы

из рода Microsporum.

Устойчивость. Споры гриба в пораженных волосах,

 

хожаровых камерах при температуре 140С гриб поги-
бает за 30 мин, при 80С — за 2 ч, при кипячении — за

2–3 мин. Под действием 3%-ного раствора формальдеги-

да и 5–8%-ных растворов гидроокиси натрия грибы по-

гибают в течение 20–30 мин.

Диагноз ставят на основании характерных клиниче-

ских признаков и эпизоотологических данных. В сомни-

тельных случаях проводят микроскопические исследо-

вания соскобов кожи и волос из пораженных участков.

С целью дифференциации грибов рода Microsporon от

Trichophyton у кошек и собак используют люминесцент-

ный метод. Исследуемый материал рассматривают под

ультрафиолетовыми лучами на расстоянии 20 см в за-

темненной комнате. Пораженные возбудителем микро-

спории волосы дают яркое зеленоватое свечение, споры

трихофитии не светятся.

пического гриба и определение вида;

раллельно проводят:

УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ И ИММУНИТЕТЕ

183

 

Для специфической профилактики применяют вак-

цину Ментавак. С лечебной целью используют мазь

юглон или 2%-ную мазь перихотецина на рыбьем жире,

препарат POCK. На протяжении 2–3 недель с кормом за-

дают гризеофульвин из расчета 25–30 мг на 1 кг живой

массы.

 

 

Возбудители микотоксикозов

 

Микотоксикозы — кормовые отравления, возни-

кающие у сельскохозяйственных животных после

скармливания им кормов, загрязненных токсинами,

вырабатываемыми микроскопическими грибами. Вос-

приимчивы все виды животных. Клинические призна-

ки разнообразны: расстройство желудочно-кишечного

тракта, поражение нервной системы, дистрофия печени.

Название болезни зависит от родового названия микро-

скопического гриба, вызвавшего кормовое отравление:

аспергиллотоксикоз (Aspergillus), стахиботриотоксикоз

(Stachybotrys), фузариотоксикоз (Fusarium).

Схема лабораторной диагностики. В лабораторию

посылают исследуемые корма с признаками плеснево-

го поражения (солома, сено, зернофураж), пораженные

участки кишечника, паренхиматозные органы. В сопро-

водительном документе указывают цель исследования,

вид корма, место отбора пробы, основные клинические

признаки у больных животных.

Схема лабораторной диагностики для всех возбуди-

телей микотоксикозов одинаковая. Одновременно и па-

 

 микологическое исследование, основная цель ко-

торого — выделение чистой культуры микроско-

 

 токсикобиологическое исследование корма,

основная цель которого — определение токсично-

сти корма и чистой культуры микроскопического

гриба.

184

ГЛАВА 10

 

Микологическое исследование. Для выделения чи-

стой культуры из исследуемого корма делают посев в

чашки Петри с агаром Чапека или сусло-агаром, содер-

жащих ингибиторы-антибиотики для подавления со-

путствующей микрофлоры. Исследуемое зерно, кусочки

кормов раскладывают на питательной среде по часовой

стрелке, культивируют при комнатной температуре

3–10 дней, по мере появления колоний приступают к

определению вида гриба. Учитывают культуральные

свойства: характер роста, форму и величину колоний,

наличие пигмента.

 

 

Микроорганизмы —

          возбудители вирусных инфекций

 

Вирус бешенства

 

Возбудитель. Вирус бешенства вызывает остро проте-

кающую болезнь теплокровных животных, характери-

зующуюся поражением ЦНС. Восприимчивы домашние

и дикие животные всех видов и человек.

Вирус относится к семейству Rhabdoviridae, роду

Lyssavirus, имеет пулевидную форму, длина — 180 нм,

содержит РНК, количество капсомеров 1200–1700, спи-

ральный тип укладки, имеет наружную оболочку с була-

вовидными выпячиваниями, является чувствительным

к эфиру, хлороформу, фенолу и формалину, репродук-

ция происходит в цитоплазме нервных клеток.

Устойчивость. Низкие температуры консервируют

вирус, высокие — инактивируют. Вирус быстро инакти-

вируется при воздействии обычно используемых дезин-

фицирующих растворов лизола, щелочей, формалина,

хлорамина. Наилучшим консервантом вируса является

50%-ный глицерин.

Культивирование. Вирус бешенства хорошо культи-

вируется на естественно восприимчивых животных, бе-

УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ И ИММУНИТЕТЕ

185

 

лых мышах, кроликах, развивающихся куриных эмбри-

онах и культурах клеток.

Клинические признаки. Инкубационный период при

бешенстве может варьировать в пределах от нескольких

дней до года и более, но чаще всего составляет 3–6 не-

дель. Его продолжительность зависит от места и силы

укусов, количества и вирулентности внесенного в рану

вируса, степени устойчивости покусанного животного

или человека. Срок инкубации у молодняка короче, чем

у взрослых животных.

Для бешенства характерно острое течение. Клини-

ческие признаки в принципе сходны у животных всех

видов, но лучше изучены у собак. Они у них обычно

проявляются в буйной или тихой форме, очень редко в

атипичной форме.

Методы диагностики. Предположительный диагноз

на бешенство ставят на основании эпизоотологических

данных и клинических признаков болезни. Окончатель-

ный диагноз ставят на основании результатов лаборатор-

ных исследований (обнаружение телец Бабеша — Негри

в мозговой ткани, выделения вируса из исследуемого ма-

териала).

Лечение больных животных не проводят. Заболев-

ших животных немедленно убивают, так как их пере-

держка связана с риском заражения людей.

Профилактика. В настоящее время для специфиче-

ской профилактики бешенства применяют инактивиро-

ванные вакцины.

 

 

Вирус гриппа

 

Все вирусы гриппа относятся к семейству Orthomyxo-

viridae и включают три рода — род вирусов гриппа А, В

и С. Эти вирусы относятся к РНК-содержащим.

Устойчивость. Вирусы гриппа устойчивы к эфиру,

хлороформу, термолабильны, чувствительны к кисло-

там, протеолитическим и липолитическим ферментам.

Растворы хлорамина, хлорной извести, формалина,

186

ГЛАВА 10

 

карболовой кислоты в принятых для дезинфекции кон-

центрациях инактивируют возбудитель за 5–10 мин.

Культивирование. Культивирование вирусов гриппа

хорошо удается в организмах белых мышей, хомяков и

хорьков при интраназальном заражении, на куриных

эмбрионах при заражении их в аллантоисную или ам-

ниотическую полости и в культурах клеток почек белых

мышей, хомяков, поросят, телят и человека.

Клинические признаки. Инкубационный период при

гриппе длится от 1 до 7 дней. На степень проявления

клинических признаков заболевания большое влияние

оказывают условия содержания, индивидуальная рези-

стентность животных. При типичном проявлении грип-

па повышается температура. Слизистые оболочки глаз

набухшие, отечные, из угла глаз выделяется серозно-ка-

таральный экссудат, животные кашляют, чихают и т. д.

Возможно поражение желудочно-кишечного тракта

(поносы), развитие плевропневмонии. Гибель взрослых

животных не превышает 2–4%, но молодняка (поросят)

достигает 70%, а птиц до 100%.

Методы диагностики. Предварительный диагноз на

грипп ставят на основании эпизоотологических, клини-

ческих и патологоанатомических данных. Для оконча-

тельного диагноза необходимо провести лабораторные

исследования (РИФ, РГА, выделение вируса и его иден-

тификация).

Иммунитет. Приобретенный в естественных условиях

иммунитет высоко штаммоспецифичен, длительность и

напряженность его у животных и птиц недостаточно из-

учены. Для специфической профилактики гриппа жи-

вотных и птиц применяются живые и инактивирован-

ные вакцины.

 

 

Вирус ящура

 

Возбудитель. Вирус ящура относится к семейству

Picornaviridae, роду афтовирус. Вирионы ящура отно-

сятся к РНК вирусам. Размер вирионов около 20 нм.

и

признаки

Клинические

УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ И ИММУНИТЕТЕ

187

Устойчивость. Вирус ящура сравнительно устойчив

к факторам внешней среды. Не чувствителен к эфиру.

В стенках афт он сохраняет вирулентность 67 дней, в на-

возной жиже — 39, в сточных водах до 103 дней. Луч-

шие дезинфицирующие средства — 2–3%-ные горячие

растворы NaOH и 1%-ный раствор формальдегида.

Методы культивирования. Вирус культивируется на

естественно восприимчивых и лабораторных животных:

новорожденныx мышатах и крольчатах, морских свин-

ках, хомяках 60-дневного возраста. Хорошо репродуци-

руется в культуре клеток почек чувствительных живот-

ных, некоторых перевиваемых линиях клеток (ВНК-21,

СПЭВ и др.) с выраженным ЦПД.

                                                                патологоанатомические
изменения. Инкубационный период продолжается

1–3 дня, иногда до 7–10 дней. Самый характерный при-

знак данного заболевания у животных — везикулярное

поражение слизистых оболочек рта и кожи венчика и

вымени. Через сутки афты разрываются и образуются

эрозии. У молодняка ящур обычно протекает злокачест-

венно (гибель 80% и более).

Диагностика болезни осуществляется прежде всего

на основании эпизоотологических данных, клиниче-

ских признаков и патологоанатомических изменений.

Лабораторные методы диагностики используются для

уточнения поставленного диагноза и определения ти-

пов и вариантов (выделение вируса и идентификация

его в PCK).

Иммунитет. Продолжительность иммунитета у жи-

вотных, переболевших ящуром, составляет 8–12 мес.,

у свиней — 10–12, у овец — 18 мес. При ящуре возника-

ет тканевой и гуморальный иммунитет.

Специфическая терапия и профилактика. Для ле-

чения ящура используют сыворотку (кровь) реконва-

лесцентов. Для специфической профилактики ящура у

крупного рогатого скота и овец стали также использо-

вать бивалентную вакцину из культурального вируса.

Сконструированы генно-инженерные и синтетические

вакцины.

188

ГЛАВА 10

ТЕХНОЛОГИЯ

           ПРОИЗВОДСТВА БИОПРЕПАРАТОВ
           СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОГО

           НАЗНАЧЕНИЯ (ЛЕЧЕБНО-
           ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ

           И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ,
           ПРОБИОТИКИ, ФЕРМЕНТЫ,
           АНТИБИОТИКИ)

 

Вакцины — это биологические препараты, содержа-

щие микроорганизмы или продукты их жизнедеятель-

ности, которые применяют для активной иммунизации

с целью создания иммунитета (невосприимчивости)

организма к определенным инфекционным болезням.

Различают вакцины живые и инактивированные (кор-

пускулярные), а также химические и анатоксины (не-

корпускулярные).

Живые вакцины представляют собой взвесь бак-

терий, приготовленных из аттенуированных возбуди-

телей, ослабленных ультрафиолетовыми лучами, дли-

тельным выращиванием на искусственных питательных

средах, иногда в присутствии ингибитора и т. д. В ре-

зультате целенаправленного воздействия микроорганиз-

мы, потеряв вирулентность, должны сохранить антиген-

ные и иммуногенные свойства.

Убитые вакцины обычно готовят из взвеси вирулент-

ных и иммуногенных штаммов бактерий, поэтому в

процессе приготовления вакцин их инактивируют. Для

инактивирования бактерий используют высокую темпе-

ратуру или химические вещества, в основном применя-

ют формалин, добавляя от 0,2 до 0,5%, в зависимости от

биологических особенностей микроорганизмов.

Вначале выращивание бактериальной массы для жи-

вой и убитой вакцины проводят в жидкой обогащенной

питательной среде в котлах-реакторах, аэрируемых по-

даваемым кислородом. После накопления максималь-

ной концентрации бактериальная масса отделяется от

жидкой части путем центрифугирования. Полученная

бактериальная масса служит основой для получения

УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ И ИММУНИТЕТЕ

189

 

вакцин. Концентрацию бактерий в 1 мл готовой вакци-

ны доводят до 4 млрд в 1 мл при помощи стандартного

эталона мутности, фотометрически подогнанного к мут-

ности определенной концентрации бактерий.

Для усиления процессов иммуногенеза в вакцины в

процессе изготовления стерильно добавляют адъюван-

ты. Это различные химические вещества органической

и неорганической природы: гидроокись алюминия, алю-

мокалиевые квасцы, ланолин, сапонин. Адъюванты уси-

ливают гуморальный иммунитет и клеточный иммун-

ный ответ на введенный антиген.

Приготовленную вакцину проверяют на стерильность,

безвредность и активность (иммуногенность). Все ина-

ктивированные препараты должны быть стерильными.

Для контроля на стерильность из препарата делают высев

на МПА, МПБ, МППБ и среды для выявления микроско-

пических грибов. При высеве из живой вакцины должна

вырасти только одна культура, указанная на этикетке.

Важнейшим элементом контроля на безвредность яв-

ляется проверка качества вакцины на лабораторных жи-

вотных. Обычно используют от 3 до 5 животных на ка-

ждую серию изготовленной партии. Вакцина безвредна,

если у привитых животных она не вызывает никаких па-

тологических симптомов. Активность (иммуногенность)

определяют следующим методом: животных иммуни-

зируют проверяемой вакциной, через две недели имму-

низированным и контрольным животным вводят смер-

тельную дозу культуры микробов, за ними наблюдают

в течение определенного времени. Иммунизированные

животные должны остаться живыми и здоровыми, а

контрольные — погибнуть.

Химические вакцины представляют собой антигенные

комплексы, извлеченные из микробной клетки и очищен-

ные от балластных иммунизирующих веществ.

Анатоксины — это экзотоксин, утративший свою

токсичность, но сохранивший антигенные и иммуно-

генные свойства. Широко применяемыми анатоксина-

ми являются вакцины против столбняка и ботулизма.

трату токсинсодержащей бульонной культуры добавля-

190

ГЛАВА 10

 

При приготовлении столбнячного анатоксина к филь-

 

ют 0,5% формалина, инактивируют при 39С в течение

30 сут, затем концентрируют удалением 80% надоса-

дочной жидкости и добавляют алюмокалиевые квасцы.

Контроль качества биопрепарата проводят по обычным

параметрам.

Все флаконы с биопрепаратами должны быть опеча-

таны и снабжены этикетками, на которых указывают

наименование препарата, биофабрику, дату выпуска,

срок годности, серию, номер госконтроля, дозировку.

Иммунные сыворотки и иммуноглобулины выпуска-

ются предприятиями биологической промышленности.

В качестве продуцентов иммунных сывороток использу-

ют лошадей, мулов, ослов, волов и реже другие виды жи-

вотных. Гипериммунизацию проводят нарастающими

дозами антигенов по утвержденным производственным

схемам, отличающимся продолжительностью иммуни-

зации, интервалами между циклами иммунизации, до-

зами для каждого цикла введения антигена и реакцией

продуцента.

После окончания цикла иммунизации, когда в сы-

воротке крови животных-продуцентов находится мак-

симальное количество специфических антител, у жи-

вотных частично или тотально берут кровь. Кровь

помещают в термостат для свертывания, при этом от-

деляется прозрачная сыворотка, ее отсасывают и сте-

рилизуют, пропуская через бактериальные фильтры.

Сыворотку консервируют, добавляя 0,25–0,5% фенола,

разливают во флаконы с этикеткой.

Гипериммунные сыворотки применяют для лечеб-

ных и профилактических целей, они создают лишь крат-

ковременный пассивный иммунитет. Иммунитет после

введения сыворотки наступает в ближайшие часы, но не

превышает 2–3 недель.

Безвредность каждой серии сывороточных препара-

тов проверяют на лабораторных животных, которым

подкожно вводят 10 мл сыворотки. Животные должны

оставаться здоровыми, без выраженных проявлений

местной и общей реакции.

УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ И ИММУНИТЕТЕ

191

 

Специфическую активность сывороточных препа-

ратов определяют с помощью реакции биологической

нейтрализации: чем меньше доза сыворотки, способная

нейтрализовать действие определенной дозы токсина,

тем выше ее активность.

Контроль бактериальной чистоты сывороточных пре-

паратов проводят по общепринятой методике высевами

из препарата на специальные питательные среды (МПА,

МПБ, МППБ и на агар Сабуро).

Диагностические

антительные диагностикумы вы-

пускают предприятия биологической промышленности.

Получают путем гипериммунизации животных соответ-

ствующим антигеном-возбудителем. Чаще продуцентами

сывороток являются лабораторные животные (кролики),

которые во время гипериммунизации активнее выраба-

тывают антитела в высоком титре. Технологический про-

цесс гипериммунизации, методика отделения сыворот-

ки, контроль специфической активности антительного

диагностикума в принципе тот же, что и при получении

лечебной иммунной сыворотки. Антительные диагно-

стикумы применяют как известный компонент в сероло-

гических реакциях при определении вида возбудителя,

выделенного из исследуемого материала.

Диагностические антигенные диагностикумы гото-

вят на предприятиях биологической промышленности

по принципу приготовления инактивированных вак-

цин. Например, приготовление бруцеллезного антиген-

ного диагностикума проводят по следующей методике:

на обогащенном печеночном агаре выращивают бруцел-

лезную биомассу из вакцинного штамма № 19, инактиви-

руют нагреванием, устанавливают концентрацию 10 млрд

микробных тел в 1 мл, консервируют фенолом, разливают

во флаконы с этикеткой.

Сальмонеллезный антигенный диагностикум пред-

ставляет собой взвесь из 10 млрд сальмонелл, применя-

ют при серологической диагностике сальмонеллеза.

Стандартный сибиреязвенный антиген для РП пред-

ставляет собой прозрачный экстракт из убитых нагре-

ванием бацилл вирулентного штамма сибирской язвы,

192

ГЛАВА 10

 

применяют для контроля качества компонентов при по-

становке РП при исследовании кожевенного сырья, мяса

на сибирскую язву.

Аллергены — выпускают предприятия биологиче-

ской промышленности. Представляют собой экстракты

из бактериальной массы, не должны обладать антиген-

ными свойствами. Аллергены применяют для аллерги-

ческой диагностики туберкулеза (туберкулин), бруцел-

леза (бруцеллин), сибирской язвы (антраксин) и др.

Туберкулин готовят путем выращивания культур

микобактерий туберкулеза человеческого вида на мя-

сопептонном глицериновом бульоне в течение 6–8 не-

дель. Затем культуру автоклавируют, выпаривают до

1/10 объема, фильтруют через бактериальные фильтры

Зейтца и добавляют 50% глицерина от общего объема.

Контроль качества аллергена включает в себя уста-

новление стерильности и специфической активности.

Специфическую активность проверяют на здоровых и

реагирующих на аллерген животных параллельно со

стандартным аллергеном.