  Показатели клеточного иммунитета периферической крови новорожденных (субпопуляции лимфоидных популяций)
(Торубарова Н.А. и соавт., 1993 год)
Показатели (маркеры лимфоидных популяций) | Средние значения, % | ||||||||||
| Доношенные дети | Недоношенные дети | ||||||||||
| CD 3 | 44,2 | 36,0 | |||||||||
| CD 4 | 29,9 | 27,0 | |||||||||
| CD 8 | 14,8 | 12,0 | |||||||||
| CD 1 | 0,88 | 2,4 | |||||||||
| CD 38 | 0 | 5,0 | |||||||||
| CD 2 | 38,4 | 38,0 | |||||||||
| D (slg +) | 12,7 | 12,3 | |||||||||
| CD10 | 0 | 3,1 | |||||||||
Приложение 3
Количественные соотношения лимфоцитов крови у новорожденных первых 10 дней жизни ( M ± m)
( по Афониной Л.Г. и Михайловой З.М., 1976 год).
Возраст, сутки
Т-лимфоциты
|
Возраст, сутки |
В-лимфоциты |
О-лимфоциты | ||
| % | Абс. число | % | Абс. число | |
| 1-е | 35,2 ± 2,300 | 19222 ± 280 | 14.3 ± 2.9 | 781 ± 22.0 |
| 3-5-е | 27,8 ± 2,2 | 1325 ± 210 | 21, 0 ± 4,1 | 1004 ± 29,0 |
| 7-10е | 29,2 ± 2,4 | 1650 ± 310 | 16, 9 ± 3.4 | 914 ± 30. 0 |
Приложение 4
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Этот метод основан на выделении, многократном размножении и детекции ДНК. Метод изобретен в 1983 году Кэрри Мюллис, за что автор был удостоен Нобелевской премии.
Материал для исследования- ткань или кровь, содержащий ДНК (РНК) возбудителя.
ПЦР – это многократное увеличение числа копий специфического участка ДНК путем комплементарного достраивания ДНК матрицы, катализируемое ферментом ДНК-полимеразой.
Методика проведения ПЦР анализа включает три этапа:
1. выделение ДНК (РНК) из клинического образца;
2. увеличение числа копий специфических фрагментов ДНК;
3. детекция полученных копий фрагментов ДНК.
Для выделения ДНК (РНК) клиническая проба подвергается специальной обработке, в результате которой происходит лизис клеточного материала, удаление белковых и полисахаридных фракций и получение раствора ДНК (РНК).
При многократном повторении циклов синтеза увеличивается число копий специфического фрагмента ДНК, что позволяет из небольшого количества анализируемого материала, который может содержать лишь единичные клетки микроорганизмов, получить достаточное количество копий ДНК для идентификации их методом электрофореза. Для определения специфических участков генома РНК-содержащих вирусов, сначала получают ДНК-копию с РНК-матрицы, используя реакцию обратной транкрипции, катализируемую ферментом ревертазой (обратной транскриптазой).
После этого проводят разделение полученных продуктов электрофорезом в агарозном или полиакриламидном геле и при осмотре в ультрафиолетовых лучах сравнивают с контрольным образцом ДНК.
Преимущества ПЦР:
- высокая чувствительность и специфичность;
- возможность диагностики латентной инфекции при наличии единичных микроорганизмов.
Недостатки ПЦР:
- высокая стоимость;
- специальное оснащение и организация лаборатории, подготовка персонала;
- применение возможно на базе крупных клиник и научно-исследовательских учреждений;
- низкая информативность для контроля излеченности, так как возможно определение ДНК нежизнеспособных микроорганизмов.
Приложение 5
Метод иммуноферментного анализа (ИФА).
ИФА – метод определения антител (качественно и количественно) или антигена в сыворотке крови. Применяется твердофазный ИФА, в качестве твердой фазы используются планшеты или шарики с адсорбированными на них антигенами или антителами. Для определения антител в лунки планшета с адсорбированным известным антигеном добавляют исследуемую сыворотку. Если в сыворотке есть антитела, то образуются соединения антиген-антитело, несвязанные антитела удаляются промыванием. К полученным иммунным соединениям добавляют антииммуноглобулиновые антитела, меченные ферментом (пероксидаза), затем субстрат для фермента (перекись водорода) и хромоген. Полученный продукт имеет специфическую окраску, наличие и интенсивность которой определяют объективно в цифрах с помощью специального прибора.
Против возбудителей вырабатываются и циркулируют в крови специфические антитела. При первичной инфекции вначале появляются антитела класса Ig М, затем Ig G и Ig А. Антитела Ig G появляются позже и их титр нарастает одновременно с падением титра антител Ig М (сероконверсия). Диагностика сероконверсии принципиально важна для беременных, когда решается вопрос о первичной вирусной (герпес, цитомегалия, краснуха), токсоплазменной инфекции. Для этого применяют метод парных сывороток. При хронической инфекции титр антител Ig М может оставаться одинаково низким, а титр Ig G нарастает. После перенесенной инфекции антитела долго циркулируют в крови, а антитела Ig G остаются пожизненно.
Наличие в крови специфических антител Ig G свидетельствует о перенесенной в прошлом инфекции или текущей в настоящее время хронической инфекции.
Преимущества ИФА:
- возможность серийных (партиями) постановок;
- метод автомотизирован, результаты документируются;
- использование метода для массовых скринингов;
- диагностика сероконверсии (при первичной инфекции);
- диагностика инфекции любой локализации, когда недоступен биоматериал, содержащий антиген или ДНК.
Недостатки ИФА:
- необходимость определения двух классов антител в динамике;
- ложно отрицательный результат в ранние сроки после инфицирования, когда нет антител в достаточном количестве;
- низкая информативность для контроля излеченности, так как антитела длительно циркулируют в крови.
Приложение 6
 2019-11-13 |
 222 |
 Обсуждений (0) |
из
5.00
|
Обсуждение в статье: Показатели клеточного иммунитета периферической крови новорожденных (субпопуляции лимфоидных популяций) |
|
Обсуждений еще не было, будьте первым... ↓↓↓ |
Почему 1285321 студент выбрали МегаОбучалку...
Система поиска информации
Мобильная версия сайта
Удобная навигация
Нет шокирующей рекламы
