ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

 

1. Приготовить препарат из спорообразующих бак-

терий, окрасить по Златогорову, изучить под микро-

скопом, обратить внимание на дифференциацию спор

от вегетативных клеток по цвету (можно окрасить Bac.

subtilis — сенную палочку из сенного настоя).

2. Провести микроскопию готового препарата, приго-

товленного из культуры капсулообразующих бактерий

(например, слизистый штамм молочнокислых бакте-

рий), обратить внимание на наличие капсулы.

3. Овладеть методом приготовления препарата «висячая

капля» или «раздавленная капля» из сенного настоя.

4. Провести микроскопию препаратов «висячая ка-

пля» или «раздавленная капля» и изучить подвижность

под 8- и 40-кратном объективах с прикрытой диафраг-

мой и опущенным конденсором.

 

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

 

1. Какое биологическое значение имеют споры в устойчиво-

сти бактерий при неблагоприятных условиях?

2. Какое биологическое значение имеют капсулы бактерий,

находящихся в организме?

БИОЛОГИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ СПОР И КАПСУЛ

311

 

3. На чем основан принцип окрашивания спор?

4. В чем заключается суть окрашивания капсул?

5. С какой целью выявляют наличие спор и капсул у бак-

терий?

6. На чем основаны косвенные методы определения нали-

чия органов движения у бактерий?

7. На чем основаны прямые методы обнаружения жгутиков

у бактерий?

8. Нарисуйте характер расположения жгутиков у различ-

ных видов бактерий.

9. С какой целью изучают наличие жгутиков у бактерий?

Тема 4

 

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ
СРЕД ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ

МИКРООРГАНИЗМОВ.
МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ

 

 

Цель занятия. Получить представление о назначении обыч-

ных, специальных, дифференциально-диагностических и элек-

тивных питательных сред. Овладеть методами приготовления

питательных сред. Ознакомиться с методами стерилизации,

применяемыми в микробиологической практике (электриче-

ским сушильным шкафом, автоклавом).

Материалы и оборудование. Автоклав, электрический су-

шильный шкаф, текучепаровой аппарат Коха, стерилизатор

с набором инструментов, твердые фильтры из белой глины,

фильтры из нитроцеллюлозы, фильтр Зейтца.

Компоненты для приготовления питательных сред — сухой

агар-агар, пептон, поваренная соль, желатин. Набор готовых пи-

тательных сред в пробирках, чашках. Образцы сухих питатель-

ных сред в фабричной упаковке. Лабораторные весы, разновески,

химические стаканы, мензурки, колбы с дистиллированной во-

дой, электроплитка.

Таблицы. Классификация питательных сред. Методы сте-

рилизации.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

313

ХАРАКТЕРИСТИКА

        И КЛАССИФИКАЦИЯ
        ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД

 

В микробиологических лабораториях готовят пита-

тельные среды для выращивания микроорганизмов с

учетом их физиологических потребностей. Ко всем пи-

тательным средам предъявляются общие требования:

1) питательные среды должны быть стерильными;

2) питательные среды должны быть влажные, так как

микроорганизмы питаются поверхностью тела путем ос-

моса и диффузии, а продукты метаболизма выделяются

только в растворенном виде;

3) для большинства бактерий благоприятной являет-

ся рН в пределах 7,2–7,4;

4) питательные среды должны содержать все пита-

тельные вещества, источники углерода и азота (пептон),

обеспечивающие оптимальный рост;

5) некоторые питательные среды должны быть про-

зрачные;

6) для анаэробных бактерий готовят питательные

среды, изолированные от воздуха слоем вазелинового

масла.

Питательные среды можно разделить по трем призна-

кам.

По составу они деляться на естественные и синте-

тические.

В состав естественных сред входят компоненты ра-

стительного (экстракты овощные, гороховые) и живот-

ного происхождения (экстракты из мяса, сыворотка

крови, кровь, яйца, молоко). Из этой группы сред ши-

роко применяются МПБ (мясопептонный бульон), МПА

(мясопептонный агар).

Синтетическими называют среды, в состав которых

вводят физиологически обоснованные количества хими-

чески чистых элементов, углеводов, незаменимых ами-

нокислот, витамины, различные минеральные вещества.

При изучении метаболических потребностей микроорга-

низмов в питательные среды вводят радиоактивно мече-

ные углерод и фосфор.

закрывают ватно-марлевыми пробками и стерилизу-

314

ТЕМА 4

По физическим свойствам среды делятся на:
 жидкие (МПБ);

 плотные (МПА);
 полужидкие;

 сухие (имеют вид порошка, находятся в фабрич-

ной упаковке, из которого готовят жидкие и

плотные питательные среды).

По назначению питательные среды делятся на:
 обычные (общеупотребительные);

 специальные;

 дифференциально-диагностические;

 селективные (накопительные, избирательные).