Физические методы стерилизации

 

Термическая обработка

 

1. Стерилизацию в пламени (в условиях лаборатории

чаще в пламени спиртовки) или фламбирование приме-

няют только для обработки мелких инструментов, таких

как бактериологические петли, пинцеты, скальпели,

ножницы, пастеровские пипетки.

2. Стерилизацию сухим жаром проводят в электриче-
ских сушильных шкафах при 165–170С в течение 1,5–

2 ч. Этим методом стерилизуют лабораторную стеклянную

посуду, предварительно завернутую в бумагу.

3. Кипячение в специальных стерилизаторах в тече-

ние 30–40 мин применяют для обработки хирургических

инструментов, при этом вода должна быть обязательно

дистиллированная, для усиления эффекта добавляют

1–2% соды. В последние годы появились разнообразные

одноразовые инструменты, но, тем не менее, стерилиза-

ция методом кипячения находит применение. Недостат-

ком этого метода является то, что есть споры, выдержи-

вающие такой режим обработки.

4. Стерилизация паром. Различают обработку паром

под давлением в герметично закрывающихся автокла-

вах и текучим паром в аппарате Коха.

Стерилизация паром под давлением проводится в

автоклаве, который представляет собой двустенный

металлический котел с герметично завинчивающейся

крышкой. Между стенками всегда должна находить-

ся вода, во время кипения которой образуется пар,

поступающий в рабочую камеру. Давление внутри ав-

токлава показывает манометр. На шкале манометра

обозначается только избыточное давление, нормаль-

ное давление соответствует показанию «0». Работа с

автоклавом требует строгого выполнения правил и

техники безопасности, предусмотренных специальной

инструкцией:

При давлении в 0,5 атм температура в автоклаве равна

метки и закрыть кран;

326

ТЕМА 4

 через воронку налить дистиллированную воду до

 

 загрузить стерилизационную камеру и герметич-

 



но закрыть;

включить нагревательную систему автоклава при

открытом паровыпускающем кране, дождаться

появления непрерывной сухой струи пара, свиде-

тельствующей о том, что весь воздух из рабочей

камеры вытеснен, и только после этого перекрыть

паровыводящий кран. Далее нагревание продол-

жается, образующийся пар не находит выхода,

поэтому давление возрастает — мы наблюдаем

это по показателю манометра.

Во время работы автоклава наблюдают за показателя-

ми двух манометров: один из них показывает давление

в рабочей камере, другой автоматически поддерживает

заданный режим работы.

 

110–112С, в 1 атм — 120–121С, в 1,5 атм — 124–126С, в
2 атм — 132–134С. Длительность работы с момента дости-

жения заданного режима продолжается 20–30 мин.

Электронагревательные приборы выключают после

окончания стерилизации. Крышку автоклава открыва-

ют, соблюдая технику безопасности, только после того,

как давление упадет до нуля.

При автоклавировании на бактерии губительно дей-

ствуют одновременно высокая температура и давление,
поэтому автоклавирование является самым надежным

методом стерилизации. Эффективность стерилизации

можно проверить, помещая в автоклав реактивы с из-

вестной точной точкой плавления или пробирки, со-

держащие термофильные спорообразующие бактерии,

которые проверяют посевом в стерильные питательные

среды. После выдерживания в термостате среды должны

остаться стерильными.

В автоклаве стерилизуют питательные среды, физ-

раствор, посуду, отработанные бактериальные культу-

ры, халаты, вату, бинты.

гнилостных и молочнокислых бактерий. После пастери-

5. Пастеризация (частичнаястерилизация) — про-

сред (с углеводами, желатиной), которые изменяют свои

а удаляется через открытые краны постоянно, поэтому

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

327

 

Дробная стерилизация текучим паром проводится в

аппарате Коха или в автоклаве с открытым паровыводя-

щим краном (т. е. появляющийся пар не накапливается,

 

температура выше 100С не поднимается). Этот метод

стерилизации рекомендуют применять для питательных

 

свойства при нагревании выше 100С. Режим работы:
три дня подряд по 40 мин с момента достижения 100С.

Суть сводится к тому, что при первом прогревании веге-

тативные клетки погибают, а споры остаются (предпо-

лагается, что они в течение суток прорастут). Повторное

прогревание на второй день вновь убивает проросшие

вегетативные клетки. Третье прогревание проводят для

большей надежности, при этом погибают все вновь поя-

вившиеся вегетативные клетки.

 

гревание при температуре ниже 100С. Например, мо-
локо пастеризуют при 74–76C в течение 20 с. Цель

пастеризации — уничтожение патогенных бактерий

(возбудителей туберкулеза, бруцеллеза, ящура), а также

 

зации молоко сразу охлаждают до 4С, чтобы предотвра-

тить размножение оставшейся термофильной и споровой

микрофлоры. Пастеризовать рекомендуют соки, пиво,

вино, которые нельзя прогревать при более высокой тем-

пературе, так как происходит снижение биологической

ценности пастеризуемого продукта.