Определение уровня молочного сахара (лактозы).

Лактоза появляется в моче беременных и кормящих женщин. Положительная качественная реакция на лактозу позволяет исключить в этих случаях глюкозурию, которая обусловлена другой патологией. Лактоза дает те же реакции восстановления, что и глюкоза. Плоскость поляризации вращает вправо.

Качественная реакция на лактозу

Необходимые реактивы: 1. 10%-ный раствор едкого натра.

2. Аммиак (не слабее 10%).

Ход исследования. К 8–10 мл мочи приливают 4–5 мл аммиака и 5–10 капель щелочи, нагревают на водяной бане при температуре 60–70 °С. В присутствии лактозы появляется розовое окрашивание. Глюкоза дает желтое окрашивание. Количество лактозы определяют в поляризационном аппарате. Полученный результат умножают на 0,947.

Определение фруктозы (левулезы)

Левулеза иногда встречается в моче при нарушении обмена веществ и при диабете (вместе с глюкозой).

Необходимые реактивы: 1.Резорцин. 2.Соляная кислота концентрированная.

Ход исследования: Растворяют несколько зерен резорцина в 3 мл концентрированной соляной кислоты, прибавляют двойное количество мочи и быстро нагревают на водяной бане. Пробу не следует долго кипятить, так как при этом из глюкозы может образоваться левулеза. При наличии левулезы проба окрашивается в вишнево-красный цвет. Проба считается положительной при быстром появлении интенсивной окраски. Моча, содержащая левулезу, дает все реакции на глюкозу и вращает плоскость поляризации влево. При определении ее количества в поляриметре полученный результат умножают на 0,54. Так как фруктоза большей частью встречается одновременно с глюкозой, то вращения влево обнаружить не удается.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КЕТОНОВЫХ ТЕЛ В МОЧЕ

К методам определения кетоновых тел в моче относятся:

1). Проба Ланге. 2). Модифицированная проба Ротеры. 3). Проба Легаля.

4). Проба Лестраде. 5). Экспресс-тесты

Проба Ланге

Реактивы:1. Уксусная кислота 80%. 2. Нитропруссид натрия (свежеприготовленный 10% раствор). 3. Аммиак.

Ход определения: к 12-15 мл мочи приливают около 1 мл уксусной кислоты и около 0,5 мл раствора нитропруссида натрия. Затем наслаивают аммиак. В положительном случае на границе двух жидкостей образуется фиолетовое кольцо. Кольцо может появиться не сразу, а в течение 2-3 мин.

Другая модификация этой пробы удобна тем, что можно использовать готовый реактив нитропруссида натрия.

Приготовление реактива. 6 г нитропруссида натрия растворяют в 100 мл 30% уксусной кислоты.

Ход определения: к 5-6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива (до цвета чая) и наслаивают аммиак. В положительном случае на границе жидкостей появляется фиолетовое кольцо.

Модифицированная проба Ротеры.

Реактивы.1. Нитропруссид натрия, раствор 50 г/л; готовят перед употреблением. 2. Аммония сульфат. 3. Аммиак водный – 25% раствор.

Ход определения. Приблизительно 200 мг сухого сульфата аммония, 5 капель мочи и 2 капли раствора нитропруссида натрия тщательно смешивают в пробирке, а затем на эту смесь тщательно наслаивают 10-15 капель раствора водного аммиака. При наличии кетоновых тел на границе раздела в течение 3-5 мин образуется красно-фиолетовое кольцо, интенсивность окраски которого позволяет ориентировочно судить о концентрации кетоновых тел в моче (таблица 21).

Таблица 21

Ориентировочная количественная оценка кетоновых тел в моче

При незначительной концентрации кетоновых тел слабое кольцо может появиться на 8-10 минуте.

Проба Легаля

Реактивы. Свежеприготовленный 5% водный раствор нитро-пруссида натрия. 2. 10-15% раствор едкого натрия. 3. Уксусная кислота ледяная.

Ход определения: 5-6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива № 1 и 0,5 мл реактива № 2. Получается красное окрашивание. Добавляют 0,5-1 мл реактива № 3. Если красный цвет исчезает, проба отрицательная, если сохраняется – положительная. Если получается слабо-розовая окраска, то проба считается также положительной.

Проба Лестраде

Проба Лестраде - определение кетоновых тел в моче с помощью сухого реактива (или таблеток).

Приготовление сухого реактива. Нитропруссида натрия 1 г.

Сульфата аммония 20 г. Карбоната натрия безводного 20 г.

Отвешенные реактивы тщательно растирают в ступке до получения мелкого однородного порошка. Порошок хранят в хорошо закупоренной стеклянной банке в сухом месте.

Ход исследования. Предметное стекло кладут на лист фильтровальной бумаги. На стекло помещают небольшое количество (на кончике ножа) сухого реактива или таблетку и наносят на него 2-3 капли мочи. При наличии кетоновых тел получается окрашивание от розового до темно-фиолетового (появление окраски может наступить в течение 2-3 мин).

Экспресс-тест

К экспресс-тестам определения кетоновых тел в моче относятся: набор для экспресс-анализа ацетона в моче и диагностические полоски. Исследование проводится согласно инструкции.

Факторы, влияющие на определение кетоновых тел в моче

При оценке результатов проб на кетоновые тела в моче следует учитывать ряд факторов. Так, например, известно, что ацетоуксусная кислота в стерильной моче стабильна до 8-10 дней, при бактериурии или большом количестве дрожжевого грибка может полностью исчезнуть в течение 24 часов. Около 20% ацетона при комнатной температуре исчезает за 24 часа, но сохраняется в холодильнике. Поэтому важное значение имеет правильный сбор мочи, ее хранение и сроки выполнения анализа. Кроме того, кетоновые тела могут исчезать из мочи при бактериурии и in vivo, что может привести к ложноотрица-тельным результатам.

К ложноположительным результатам может привести использование месны, фенолфталеина, метаболитов некоторых препаратов (например, леводопы и каптоприла); кислая моча, повышенный удельный вес мочи. Все эти факторы приводят к химическому завышению результатов анализа, то есть непосредственно влияют на химическую реакцию определения кетоновых тел в моче, а количество самих кетоновых тел в моче может быть нормальным.

Необходимо помнить, что существуют также факторы, приводящие к клиническому повышению кетоновых тел в моче, то есть непосредственно влияющих на их уровень в моче за счет воздействия на обменные процессы, связанные с образованием кетоновых тел. К таким фактором относится прием некоторых лекарственных препаратов – инозитола, метионина, метформина, фенформина, феназопиридина, эфирного наркоза, интоксикация изониазидом, изопропиловым спиртом, ацетилсалициловой кислотой.