Индикация наличия золотистых стафилококков

 

Метод основан на выявлении характерного роста бак-

терий на элективных средах, изучении морфологиче-

ских свойств, наличии фермента плазмокоагулазы.

1 г продукта и 1 мл разведения (10

дукта) вносят в пробирку с 6–7 мл солевого рыбопеп-

тонного бульона (7% NaCl). При исследовании соленых

продуктов (свыше 5%) дополнительно проводят посев в

1%-ный глюкозный РПБ. Посевы помещают в термостат

37С в течение 24 ч.

чистой культуры и инкубируют при температуре 37С

37С. Учет реакции плазмокоагуляции проводят через

температуре 37С.

462

ТЕМА 20

при температуре 37C на 24 ч. Из сред обогащения (соле-

вого, глюкозного бульонов) проводят посев на электив-

ные среды: желточно-солевой или молочно-солевой агар

или среду Байрда — Паркера. Посевы выдерживают при

 

Из типичных для стафилококков колоний (на мо-

лочно- и желточно-солевом агаре они с радужным вен-

чиком вокруг колоний; на среде Байрд — Паркер — они

черные, блестящие с узким белым краем, окруженные

прозрачной зоной) делают препараты, окрашивают по

Граму, микроскопируют; оставшуюся часть колонии от-

севают на скошенный агар в пробирках для получения

 

в течение 24 ч. С суточной культурой ставят реакцию

плазмокоагуляции.

Методика реакции плазмокоагуляции. В пробирку с

0,5 мл кроличьей плазмы, разведенной физраствором в

соотношении 1:5 (1 мл плазмы + 4 мл физраствора), вно-

сят петлю суточной культуры стафилококка. Для конт-

роля одну из пробирок с плазмой оставляют незасеян-

ной. Пробирки помещают в термостат при температуре

 

2, 4 ч. Реакция считается положительной, если сгусток

образовался в течение 24 ч.

 

 

Индикация наличия бактерий рода Сальмонелл

 

Метод основан на способности бактерий рода Сальмо-

нелл, расти на дифференциально-диагностических сре-

дах и давать реакцию агглютинации со специфическими

сальмонеллезными сыворотками.

Навеску продукта в количестве 25 г засевают в 100 мл

среды обогащения (магниевую или селенитовый буль-

он), учитывая необильное обсеменение продукта сальмо-

неллами. Посевы помещают на 18–20 ч в термостат при

 

На второй день исследования из проросших сред

обогащения делают пересев на плотные дифференци-

лом в столбик. Посевы выдерживают в термостате при

вы на средах Эндо и Плоскирева термостатируют в тече-

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ ПРОИЗВОДСТВА РЫБЫ

463

 

ально-диагностические среды в чашках Петри: висмут-

сульфитный агар (ВСА), среду Левина или Эндо. Перед

посевом среду необходимо подсушить в термостате, что-

бы колонии не сливались и были изолированные. Посе-

 

ние 15–18 ч, на среде ВСА — 48 ч при 37С.

На ВСА сальмонеллы образуют черные с металличе-

ским блеском колонии, цвет питательной среды под ко-

лониями черный. Исключение составляют S. paratyphi,

S. cholerae-suis и ряд других, растущих в виде мелких

серовато-зеленых колоний с черным центром и без него.

Кишечная палочка на ВСА образует бесцветные, зелено-

ватые или серые колонии или не дает роста.

На среде Эндо колонии сальмонелл бесцветные, сла-

бо-розовые, выпуклые. На средах Плоскирева и Левина

колонии прозрачные, голубоватые, бледные или нежно-

розовые.

С дифференциально-диагностических сред отсевают

несколько колоний на трехсахарный агар с мочевиной

или среду Клиглера с мочевиной: посевы делают сна-

чала штрихом по скошенной поверхности, а затем уко-

 

температуре 37С 24 ч. На этих средах учитывают спо-

собность культуры ферментировать глюкозу, лактозу и

мочевину. Готовая среда — трехсахарный агар с мочеви-

ной — имеет розовый цвет. Отсутствие изменения цвета

скошенной поверхности указывает на то, что лактоза и

сахароза не разлагаются исследуемой культурой. Жел-

тое окрашивание столбика, образование газа (разрывы в

глубине агара) и сероводорода (почернение) указывают

на рост бактерий рода Сальмонелл.

Желательно со среды Клиглера или с трехсахарного

агара отсеять выросшую культуру на скошенный агар,

короткий пестрый ряд, включающий среды Гисса с лак-

тозой, глюкозой, маннитом, сахарозой, мальтозой. Для

определения индола и сероводорода посев делают на

рыбо- или мясопептонный бульон, после чего над посе-

вом между пробкой и стенкой пробирки закрепляют две

полоски фильтровальной бумаги, одна из них смоченна

дят пересев из проросшей жидкой среды на поверхность

вносят в колбу со 100 мл жидкой среды обогащения. По-

ния индола. Посевы термостатируют при температуре

464

ТЕМА 20

 

уксуснокислым свинцом для определения сероводорода,

а другая — раствором щавелевой кислоты для определе-

 

37С в течение 24 ч.

Таким образом, к сальмонеллам относятся бактерии,

не разлагающие лактозу, сахарозу и мочевину, ферменти-

рующие глюкозу, маннит и мальтозу с образованием газа,

продуцирующие сероводород и не образующие индол.

Для окончательного заключения с выделенной куль-

турой ставят РА на предметном стекле с поливалентной,

О- и Н-агглютинирующими монорецепторными саль-

монеллезными сыворотками. В случае положительной

реакции агглютинации с монорецепторными О- и Н-аг-

глютинирующими сыворотками делают окончательный

вывод о присутствии в исследуемом продукте сальмо-

нелл.